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Controllo della Scrapie

Selezione genetica — Un nuovo strumento per

l’allevatore

Maggio 2005

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Di che cosa parleremo Scrapie:

Storia e distribuzione concetti base della malattia

Genetica della ScrapieCome usare la genotipizzazione per la selezione genetica alla resistenzaLe vostre domande

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Storia e Distribuzione della Scrapie

Descritta per la prima volta in Inghilterra nel XVIII secolo

Diffusa in tutto il mondo, solamente l’Australia e la Nuova Zelanda vengono considerate “Scrapie Free”

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Concetti Base della malattia

Trasmissione e periodo d’incubazione

Gli ovini e i caprini che sono suscettibili alla scrapie in genere si infettano da agnelli attrraverso il contatto con placente e liquidi fetali di pecore/capre infette – non necessariamente dalla propria madre

In genere il periodo d’incubazione va da 2 a 5 anni

Sempre mortale — non esistono cure o vaccini

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La Scrapie e i montoni… I montoni prendono la

scrapie I montoni infetti non

sembrano in grado di trasmettere la scrapie

La genetica del montone influenza la suscettibilità alla scrapie dei propri figli

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Capre

Ad oggi non sono stati identificati genotipi resistenti nelle capre.

Pertanto, tutte le capre devono essere considerate suscettibili.

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I segni clinici (variabili) sono: Modificazioni del

comportamento Iperreattività ai rumori Prurito e grattamento

Problemi neurologici Perdita della

coordinazione Sbattimento delle labbra

(nibble) alterazione dell’andatura

(Bunny hopping/walking on eggshells)

Perdita di peso Debolezza,

incapacità ad alzarsi

Morte, talvolta improvvisa

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Diagnosi Animali morti

Cervello (SNC) e tessuti linfatici

Animali vivi Tessuti

linfatici della terza palpebra (o tonsille)

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Di che cosa tratteremo La Scrapie:

Storia e Distribuzione Concetti base della Malattia

Genetica della Scrapie

Come si può usare la tipizzazione genetica negli allevamenti infetti e aderenti al piano Le vostre Domande

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I genotipi che controllano la suscettibilità e la resistenza alla malattia sono LA cosa più importante che un allevatore deve sapere sulla genetica della scrapie!

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La Genetica della Scrapie

Obiettivo di questa presentazione è: Aiutare gli allevatori a capire come

usare la genetica per proteggere i loro allevamenti dall’infezione da scrapie.

Non vogliamo farvi diventare dei genetisti

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La Scienza dietro la Genetica della Scrapie ci dice:

??

Alcune pecore si ammalano più facilmente di altre

La Genotipizzazione è usata per identificare i geni che controllano la suscettibilità o la resistenza alla scrapie

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Cos’è la Genotipizzazione?

La Genotipizzazione è un test del DNA

Un semplice esame del sangue o di tessuti permette di determinare il genotipo degli ovini il genotipo non cambia mai. Un solo

esame basta per tutta la vita. Può essere definito a qualsiasi età

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Genotipizzazione E’ preferibile usare un sistema di

identificazione permanente (microchip o 2 marche) sui capi da esaminare

Il prelievo deve essere eseguito sotto il controllo di un veterinario riconosciuto

Usare provette con EDTA e farle arrivare al Laboratorio prima possibile

Il Genotipo rimane lo stesso per tutta la vita dell’animale

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GenotipizzazioneUna genotipizzazione viene riconosciuta ufficialmente se:

il sangue è prelevato da un veterinario AUSL o riconosciuto

Il capo è identificato ufficialmente Il campione è inviato al lab

accompagnato dall’allegato IV del DM 17/12/2004

Il lab è stato riconosciuto dal Min.Salute

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Laboratori che effettuano le genotipizzazioni

Laboratorio Gruppi sanguigni di Cremona solo per allevamenti iscritti a libro

genealogico

IZSLER - Sezione di Modena Ovini della Regione Emilia-Romagna

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Cos’è la Genotipizzazione? (cont.)

Può capitare che un ovino già genotipizzato debba essere ricampionato: Problemi di identificazione dell’animale o del

campione Campione non idoneo per l’esame (degradato) Errori nell’identificazione dell’animale Verifica sul genotipo effettuata per

sorveglianza da parte della A.USL

Il test del genotipo misura solo la suscettibilità e non se l’animale ha la scrapie

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La teoria del prione

La scrapie è causata dalla modificazione di una proteina prodotta naturalmente da tutti gli animali (PrPc) in una proteina patologica (PrPsc) che produce più copie di sé stessa, accumulandosi nelle cellule nervose e facendole morire (EST).

A seconda della genetica dell’animale la PrPc risulta più o meno modificabile dalla PrPsc.

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Le PrPC che ci interessano

In particolare della proteina PrPc, composta da 254 aminoacidi, ci interessano quelli posti nelle posizioni 136, 154 e 171.

A ogni aminoacido corrisponde una lettera V136R154Q171 (VRQ) è la PrPC più facilmen-te

modificabile in PrPSC; A136R154R171, (ARR) è la PrPC più resistente

alla modificazione in PrPSC.

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Geni Ovini: Uno da ciascun genitore

Ogni genitore dà una copia del gene che codifica la PrPc all’agnello. Il gene è in genere uno di questi tre: ARQ, VRQ, ARR,

Quindi, ogni agnello porta due copie del gene. Le combinazioni possibili sono: ARQ/ARQ, ARR/ARQ, ARR/ARR, ARQ/VRQ, ARR/VRQ, VRQ/VRQ.

I genotipi rari AHQ, ARH, ARK, ecc. sono considerati equivalenti all’ ARQ.

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Combinazioni dei genotipi e suscettibilità alla scrapie

ARR/ARR — sono resistenti (Classe I) ARR/ARQ— sono semi-resistenti (Classe

II) ARQ/ARQ— sono suscettibili (Classe III) ARQ/VRQ— sono molto suscettibili

(divieto di impiego come riproduttori) VRQ/VRQ— sono molto suscettibili

(divieto di impiego come riproduttori) ARR/VRQ— sono poco suscettibili

(divieto di impiego come riproduttori)

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Classificazione dei riproduttori

Classe Riproduttori Genotipi Note1° Classe ARR/ARR Genotipo resistente

2° ClasseARR/ARQ ARR/AHQ

ARR/ARHGenotipo semi-resistente

3° ClasseARQ/ARQ ARQ/AHQ ARQ/ARH ARH/AHQ AHQ/AHQ ARH/ARH

Genotipi sensibili o rari

Divieto d'impiegoVRQ/ARQ VRQ/AHQ VRQ/ARH ARR/VRQ

VRQ/VRQPortatori allele VRQ

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La ricerca ha dimostrato che:

Tutte le placente 171QR di pecore infette 171QQ esami-nate sono risultate negative per scrapie, mentre le placente 171QQ di pecore infette 171QQ sono risultate positive.

Pertanto, le placente ed i liquidi fetali 171QR di pecore infette non dovrebbero essere in grado di trasmettere la scrapie alle altre pecore suscettibili.

?

?

la Scrapie si diffonde alle pecore suscettibili e alle capre attraverso il contatto con la placenta ed i liquidi fetali infetti.

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L’importanza del genotipo della placenta nella trasmissione della scrapie

Gli agnelli hanno una combinazione del DNA della pecora e del montone; una pecora 171QQ (III) accoppiata ad un

montone 171RR (I) produrrà un agnello

171QR (II) con fluidi e placenta 171QR (II). una pecora 171QQ (III) accoppiata ad un

montone 171QQ (III) produrrà un agnello

171QQ (III) con fluidi e placenta 171QQ (III).

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feto 171QQ

+ placenta infetta da

Scrapie=

SCRAPIE

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feto 171QR

+ placenta non

infetta da Scrapie

= STOP SCRAPIE

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I genotipi che controllano la suscettibilità e la resistenza alla malattia sono LA cosa più importante che un allevatore deve sapere sulla genetica della scrapie!

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Come l’allevatore può usare la Genotipizzazione per prevenire la Scrapie

Selezionando montoni resistenti (171RR / I

Classe) o semi-resistenti (171QR / II Classe) Ogni individuo riceve un gene da ciascun genitore. Montoni resistenti produrranno solamente agnelli

resistenti (171RR) o semi-resistenti (171QR). Montoni semi-resistenti (171QR) produrranno

agnelli resistenti, semi-resistenti o suscettibili a seconda del genotipo della pecora coperta.

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Come l’allevatore può usare la Genotipiz-zazione per prevenire la Scrapie (cont.)

Selezionando pecore resistenti (171RR / I Classe) o semi-resistenti (171QR / II Classe) Una pecora trasmetterà i suoi caratteri di

resistenza/suscettibilità allo stesso modo del montone, ma solamente al suo agnello.

La genotipizzazione delle pecore ha un basso costo/efficacia rispetto a quella del montone.

In pratica è utile solo per le madri di montoni o quando si vuole accelerare al massimo la selezione (allevamento infetto).

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Tabella di suscettibilità degli agnelli

Montone x PecoraPecora x Montone I Classe II Classe III ClasseI Classe x I Classe dà 100% 0% 0%I Classe x II Classe dà 50% 50% 0%I Classe x III Classe dà 0% 100% 0%II Classe x II Classe dà 25% 50% 25%II Classe x III Classe dà 0% 50% 50%III Classe x III Classe dà 0% 0% 100%

dàAgnello

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Come l’allevatore può usare la Genotipiz-zazione per prevenire la Scrapie (cont.)

La Genotipizzazione deve essere considerata come “uno” strumento non come “unico” strumento di prevenzione Il metodo più efficace per evitare

l’introduzione della scrapie è quello di non comprare pecore

Se il tuo sistema di allevamento richiede l’acquisto di pecore, compra pecore resistenti (classe I - 171RR) o semi-resistenti (classe II - 171QR).

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Come l’allevatore può usare la Genotipiz-zazione per prevenire la Scrapie (cont.)

Se pensi che il tuo allevamento sia a rischio di scrapie perché negli anni hai comprato pecore da diversi greggi con stato sanitario sconosciuto e in particolare pecore di razze ad alta prevalenza (massesi, bergamasche, langhe)

Considera di aderire al piano di selezione genetica per aumentare la resistenza del tuo gregge e inizia a comprare pecore di classe I o II e/oa ridurre il rischio di trasmissione delle pecore con genotipo ignoto usando montoni di classe I.

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Il Piano regionale di selezione genetica per la resistenza alle EST negli ovini

Il piano è obbligatorio per gli allevamenti iscritti ai Libri genealogici e per i greggi ad alto merito genetico.

Tutti gli altri allevamenti ovini possono aderire volontariamente.

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Obiettivi del piano

Obiettivo generale del Piano è quello di in-crementare la frequenza dei caratteri di resistenza genetica alle TSE nella popolazio-ne ovina al fine di:a) contribuire alla tutela della salute umana ed animale;b) concorrere al controllo delle TSE degli ovini;c) concorrere alla creazione di aziende ovine a “basso rischio” di TSE.

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Obiettivi del piano

Obiettivi specifici del piano sono:a) eliminazione dell’allele VRQ dagli allevamenti aderenti al piano;b) incremento della frequenza dell’allele ARR negli allevamenti aderenti al Piano.c) aumento della disponibilità di montoni con genotipo resistente (ARR/ARR), utili anche per il ripopolamento degli allevamenti infetti;d) progressiva diminuzione della frequenza dell’allele ARQ negli allevamenti aderenti al piano.

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Come funziona il piano Selezione genetica per linea maschile:

tutti i montoni vengono tipizzati. I montoni con genotipo non idoneo (VRQ)

vengono macellati con indennizzo. Limitazioni nell’introduzione (solo da

allev. aderenti e per i primi 5 anni) e nell’utilizzo nel tempo (per i primi 7 anni) di montoni di classe III.

Stesse regole per le pecore genotipizzate.

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Schema di selezioneClassificazione dei riproduttori

La selezione avviene per linea maschile; per accelerare la selezione possono essere

testate anche le femmine (gruppi di monta).

Classe Riproduttori Genotipi Note1° Classe ARR/ARR Genotipo resistente

2° ClasseARR/ARQ ARR/AHQ

ARR/ARHGenotipo semi-resistente

3° ClasseARQ/ARQ ARQ/AHQ ARQ/ARH ARH/AHQ AHQ/AHQ ARH/ARH

Genotipi sensibili o rari

Divieto d'impiegoVRQ/ARQ VRQ/AHQ VRQ/ARH ARR/VRQ

VRQ/VRQPortatori allele VRQ

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Come funziona il piano (cont.)

Tutti i riproduttori del gregge devono essere identificati in modo permanente (microchip);

Tutti gli allevatori devono usufruire della consulenza di un veterinario riconosciuto

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Schema di selezioneUtilizzo dei riproduttori La Regione, su parere della

Commissione, definisce se una razza ha frequenza di ARR superiore al 40%.

Da allevamenti con qualifica

da allevamenti senza qualifica

1° Classe Autorizzato Autorizzato Autorizzato

2° Classe Autorizzato Autorizzato Autorizzato

3° Classe Autorizzato Autorizzato Vietato

Divieto d'impiego Vietato Vietato Vietato

Ignota Vietato Vietato Vietato

Rimonta internaClasse Riproduttori

Rimonta esterna o fecondazione artificiale

Montoni di III classe: introdotti solo nei primi 5 anni del piano utilizzabili solo nei primi 7 anni del piano

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Compiti dell’allevatore

Allevare e gestire i gruppi di monta Identificare (ID permanente) tutti i

riproduttori ovini e caprini di età >6 mesi Segnalare alla AUSL i capi con sintomi

sospetti e i morti Segnalare alla AUSL le introduzioni Introdurre ed utilizzare solamente

montoni di genotipi ammessi dal piano

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Compiti dell’allevatore

Macellare i riproduttori dichiarati non idonei (indennizzo)

Pulizia, disinfezione e raccolta delle placente

Mantenere aggiornato il registro di stalla Aiutare il Servizio Veterinario A.USL

nelle operazioni di verifica del piano Eseguire test del DNA aggiuntivi

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Compiti della AUSL Identificare gli allevamenti aderenti al piano,

raccogliere le domande. Effettuare i prelievi per la tipizzazione genetica dei

montoni (veterinario riconosciuto). Assegnare le qualifiche sanitarie agli allevamenti

aderenti al piano. Eseguire ispezioni semestrali per la verifica dell’

andamento del piano. Controlli a campione annuali. Predisporre le pratiche per l’indennizzo dei

riproduttori non idonei macellati

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Schema di selezioneQualifica degli allevamenti La AUSL sulla base della situazione

genetica rilevata e sugli esiti delle ispezioni periodiche assegna una qualifica “di resistenza” all’allevamento.

Qualifica nazionaleLivello resistenza Dec.2003/100/CE

Criteri

Livello I Livello I Tutti i capi ARR/ARR

Livello II Livello IITutti i montoni ARR/ARR e i restanti capi ARR/***

Livello III Livello II Tutti i montoni ARR/ARR

Livello IV Non previsto Tutti i montoni ARR/***

Livello V Non previsto Greggi aderenti al piano

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Costi del piano

Il SSN copre le spese relative alle analisi genetiche effettuate nelle aziende aderenti al piano.

Il SSN indennizza (L.218/1988) i riproduttori (portatori dell’allele VRQ) delle aziende aderenti al piano macellati ai sensi del piano nazionale (DM 17/12/04).

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Punti critici

La formazione e l’informazione di allevatori e veterinari;

La motivazione e la collaborazione degli allevatori;

L’identificazione degli animali; Il ruolo del veterinario aziendale.

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Conclusioni

Alla tipizzazione genetica non consegue una diagnosi di scrapie;

Il successo del piano deriverà dal numero di adesioni da parte di allevatori motivati;

Risultati apprezzabili in tempi medio-lunghi (5-7 anni).

Di che cosa abbiamo parlato la Scrapie:

Storia e diffusione Concetti base sulla malattia

Genetica della Scrapie

Le vostre domande più frequenti

Come usare la genotipizzazione per la selezione genetica verso la resistenza alle EST

Di cosa parleremo ora:

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Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata nel mio gregge? - 1

In caso di diagnosi di scrapie su capi con sintomi sospetti, morti in stalla o macellati viene applicato il Regolamento CE 999/2001, come modificato dal Reg.CE 1492/2004, e dal DM 08/04/1999. Essi prevedono: sequestro dell’azienda e blocco delle

movimentazioni; sequestro e distruzione del latte prodotto (con

indennizzo) fino al completamento delle operazioni di abbattimento;

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Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata nel mio gregge? - 2

poi: Abbattimento e distruzione (con indennizzo)

di tutti i caprini presenti in azienda; genotipizzazione di tutti gli ovini presenti in

azienda; abbattimento e distruzione (con indennizzo)

di tutti i montoni, esclusi quelli di Classe I; abbattimento e distruzione (con indennizzo)

di tutte le pecore, escluse quelle di classe I e II;

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Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata nel mio gregge? - 3

Dopo l’abbattimento, il ripopolamento potrà avvenire: solo con montoni di Classe I; solo con pecore di Classe I o di Classe II; le pecore di Classe II potranno lasciare

l’azienda solo con destinazione macello; indagini per le EST a campione su animali

macellati e test di tutti i morti in azienda; Restrizioni mantenute per tre anni.

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Negli allevamenti aderenti al piano, soprattutto in quelli che hanno da tempo eliminato i montoni di Classe III gli abbattimenti in caso di scrapie riguarderanno una percentuale di animali decisamente inferiore a quella che dovrebbe essere abbattuta in un allevamento non aderente.

In un allevamento di Livello I o II non verrebbe abbattuto neanche un ovino (solamente gli eventuali caprini presenti).

Cosa succede se la scrapie viene diagnosticata nel mio gregge?

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Riassumendo

Domanda: Abbiamo capito che la scrapie è una

malattia del sistema nervoso sempre mortale e che la probabilità di ammalarsi è controllata dalla genetica, ma vengono denunciati solamente poche decine di casi all’anno in Italia, perché tanta enfasi sulla sua eradicazione?

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Riassumendo

Risposta: La Scrapie costa diversi milioni di Euro agli

allevatori a causa di mancate vendite, degli aumentati costi e mortalità legata alla malattia.

La Scrapie è una Encefalopatia Spongiforme Trasmissibile (EST). I consumatori si aspettano l’eradicazione di tutte le TSE.

Molti casi di scrapie non vengono diagnosticati. E’ provato che un piano di selezione genetica è un modo efficace per controllare questa malattia.

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RiassumendoDomanda: Qual è la cosa più importante che

dobbiamo conoscere sulla genetica della scrapie?

Risposta:La suscettibilità dei diversi genotipi: ARR/ARR (Classe I) — sono resistenti ARR/ARQ (Classe II) — sono semi-resistenti ARQ/ARQ (Classe III) — sono molto

suscettibili [ARQ=AHQ=ARH=ARK] I portatori di VRQ — sono talmente suscettibili

che ne è vietato l’impiego come riproduttori

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Riassumendo

Domanda:Se il mio gregge è a rischio di scrapie perché ho comprato delle pecore, che cosa dovrei fare?

Risposta:Se si considera il proprio gregge a rischio, diventa opportuno l’impiego di montoni di Classe I per aumentare la percentuale di agnelli geneticamente più resistenti alla scrapie.

Riassumendo

Risposta: Sì, soprattuto se:il tuo gregge è a rischio di scrapie perché: allevi una razza nella quale la scrapie si

manifesta e hai comprato pecore da allevamenti con stato sanitario sconosciuto;

Hai comprato pecore da un allevamento infetto; Hai osservato in passato segni clinici di scrapie

nel tuo allevamento;• Gli altri allevatori richiedono riproduttori di

genotipi resistenti alla scrapie.

Domanda:Se le mie pecore non hanno la scrapie devo comunque pensare di aderire al piano di selezione genetica?

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Riassumendo

Risposta: Sì, se sei iscritto a libro genealogico.

No, se non sei iscritto a libro e non ti interessa vendere riproduttori ad altri allevamenti. Oppure i vantaggi legati alla selezione per altri tratti genetici superano quelli legati alla resistenza alla scrapie.

Ad ogni modo prendi in considerazione di applicare tutte le pratiche per prevenire l’introduzione della scrapie nel tuo allevamento attraverso l’acquisto di riproduttori di classe I o classe II.

Domanda:Se non ho la scrapie in allevamento, devo comunque aderire al piano di selezione genetica per la resistenza alla scrapie?

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????—Altre domande--????

For maggiori informazioni visita questi siti web:

http://www.bs.izs.it/cerev/ http://www.izsto.it/ceaindice.htm

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Fine

Produced by the National Scrapie Education Initiative.

Tradotto a cura della Commissione regionale dell’Emilia-Romagna.