Colliri Biologici : Autosiero e lisato piastrinico Laura MAZZUCCO - Valeria BALBO

SC MEDICINA TRASFUSIONALE – AO ALESSANDRIA

Terapia biologica

La medicina rigenerativa sfrutta le potenzialità biologiche delle cellule come terapia per la riparazione dei tessuti

Il ripristino della funzionalità di un tessuto danneggiato non è però limitato alla compensazione della sua componente cellulare danneggiata,

ma dipende anche dalla ristabilizzazione dell’omeostasi e del microambiente cellulare.

Questo concetto di “riportare alla normalità”

il “microambiente” della zona danneggiata di un tessuto

è il target che si vuole raggiungere con

le terapie biologiche con emocomponenti per uso non trasfusionale

anche in ambito oculistico

… concetto che si rincorre da parecchi anni…

Network

GF

GF

GF

IL

MMP

TNF IL

PF4

FIBR

Network Network

GF

Network

MMP GF

Network

GF

MMP GF

Network

GF

MMP GF

Network

IL

GF

MMP GF

GF IL

MMP GF

GF

PREMESSA : la caratteristica più importante di questi prodotti/preparati derivati da tessuti (sangue, sangue cordonale, membrana amniotica) è il rilascio nel sito di applicazione di un insieme di biomolecole che agiscono contemporaneamente attivando fenomeni autocrini e paracrini e creando un network di azioni che inducono poi l’effetto biologico della riparazione / rigenerazione/ guarigione

Plasma Ricco di Piastrine Siero

Plasma

Emocomponenti per uso topico - collirio

..le frazioni del sangue che vengono utilizzate per i colliri biologici

sangue privo di anticoagulante

parte non corpuscolata del

sangue che si separa dopo la coagulazione

sangue con anticoagulante

matrice fluida che si separa dalla parte

corpuscolata

sangue con anticoagulante

frazione di plasma che contiene un numero di piastrine superiore

almeno di 4 volte il valore

basale

Siero AUTO Siero COLLIRIO

È sicuramente il primo emocomponente utilizzato come collirio,

Semplice e facile preparazione… spesso fatta home made in modo un po’ grossolano

diluito in fisiologica… 10%, 20%, 30%, 50% ????

AUTO Siero COLLIRIO

AUTO Siero COLLIRIO Razionale scientifico….

..contiene molte proteine della matrice extracellulare

Fibronectina

Albumina

Vitamina A

Vitamina E

VIT A ng/mL

VIT E ng/mL

FIBRONECTIN ng/mL

3,52±1,02 35,6±8,2 455,1±65,6

Table 1 from: Transfusion 2004; 44: 1724 1753

Duplice Azione Rigenerante

matrice extracellulare cellule

AUTO Siero COLLIRIO Razionale scientifico….

6 h 24 h

I GF sono molecole segnale che agiscono legandosi ai recettori di membrana delle cellule target attivando la trasduzione del segnale e

quindi la gene regulation …

proliferazione, differenziazione, apoptosi della cellula

metodica di preparazione

high variability

Pertanto per ovviare…

DM 02 novembre 2015 CP deve contenere 1 x 106 piastrine /microLitro ± 20%

STANDARD DI PRODOTTO

Preparazione dei colliri biologici da emocomponenti

Obiettivi Ottimizzazione della preparazione dei prodotti Valutazioni in vitro dose/risposta Standardizzazione della preparazione Ricerca di un device adeguato alla somministrazione “safe e monodose e di facile utilizzo per il paziente”

Preparazione autosiero collirio – SIMT AO Alessandria

arruolamento del paziente (consenso informato)

prelievo venoso (48 mL)

provetta dedicata (MD)

lavorazione del campione sotto cappa a flusso laminare

biohazard

Step 3…

60 mL of anticoagulated (ACD-A) peripheral blood was collected from each

patient and centrifuged to obtain autologous Platelet Rich Plasma.

PRP was frozen and thawed (- 80 °C /+37°C) to obtain platelets lysis (CPlys).

The preparation for eye drops was diluted with a sterile balanced saline

solution final concentration and was aliquoted with specific device in 30 sterile

doses, one dose per day, to be stored in the patients’ own freezer (–20 °C).

All samples were subjected to microbiological control to verify the sterility.

Preparazione Concentrato Piastrinico collirio – SIMT AO Alessandria

Consegna al paziente…. che utilizza a domicilio (max 30 dosi)

Istruzioni per la conservazione

Dosi non in uso -18°C

Dosi in uso +4 / +8°C

Mai lasciare a temperatura ambiente!!!!!

Decreto Ministeriale

2 novembre 2015

Art.20 - Allegato X

Maggio 2012

definisce in modo dettagliato la preparazione e le caratteristiche degli emocomponenti per uso non trasfusionale…. introducendo e definendo due nuovi prodotti: il Collirio di lisato piastrinico e il CP da sangue cordonale

Utilizzo del sangue cordonale che non raggiunge i requisiti quantitativi

previsti per il bancaggio…

Concentrato piastrinico

CBPG

Siero collirio

Concentrato piastrinico collirio

…uguale efficacia

…UCS migliora il controllo del dolore

IERI □ Si □ No Normativa □ Si □ No Caratteristiche di prodotto □ Si □ No Evidence base medicine

OGGI □ Si □ No Normativa □ Si □ No Caratteristiche di prodotto □ Si □ No Evidence base medicine

?