Le principali patologie delle lumache

Dr. Alessandro Dondo

Struttura Complessa Diagnostica Generale – Sede di Torino

Gli Istituti Zooprofilattici Sperimentali:

• svolgono attività di ricerca scientifica sperimentale veterinaria e di accertamento dello stato sanitario degli animali e di salubrità dei prodotti di origine animale

• operano nell’ambito del Servizio sanitario nazionale, garantendo ai Servizi Veterinari delle regioni e delle province autonome e delle unità sanitarie locali le prestazioni e la collaborazione tecnico-scientifica necessarie all’espletamento delle funzioni in materia di igiene e sanità pubblica veterinaria

Struttura Complessa DIAGNOSTICA GENERALE - Torino Principali campi di attività: � Ricerca scientifica sperimentale veterinaria ed acc ertamento dello

stato sanitario degli animali � Esame clinico � Esame necroscopico � Esame anatomopatologico � Prescrizione terapie � Consulenza tecnica all’utenza � Esami parassitologici � Esami batteriologici � Esami con tecniche immunoenzimatiche � Esami sierologici � Prove biologiche � Esami biotossicologici � Esami con Immunofluorescenza diretta � Esami con tecniche immunocromatografiche � Esami per ricerca virus rabido � Identificazione di rettili Il laboratorio è dotato di attrezzature adeguate ed è collegato alla rete informatica dell’Ente.

Campo di applicazione & diversificazione

Applicazione di strategie

Patologie in allevamento

«contesto epidemiologico»

Anamnesi

Visita clinicaEsame anatomopatologico

Esami di laboratorio

Diagnosi eziologicaSchema ciclo diagnostico

Profilassi….

I campioni da sottoporre ad analisi possono essere prelevati da animali, organi o ambiente per:

per:� formulare una diagnosi eziologica� vigilanza sanitaria� controllare la risposta di un trattamento

teraupetico o vaccinale� indagini epidemiologiche

I campioni possono essere rappresentati da: animali vivi o morti tessuti ed organi, liquidi biologici e feci alimenti di origine animale alimenti ad uso zootecnico acqua nelle diverse classificazioni campioni prelevati dall'ambiente

MATERIALI e METODI

2345….

• Organi esaminabili

– polmone, cuore, rene

– piede

– apparato digerente

– apparato genitale

• Obiettivo

– il ruolo della chiocciola dal punto di vista igienico

sanitario

Diagnostica delle malattie battericheMateriale d’esame(essudati, trasudati, escreti, frammenti d’organo, prelievi bioptici, liquidi organici, ecc.)

Senza isolamento Microscopia ottica

Studio aspetti morfologici e tintoriali

Rilevazione dell’Ag con anticorpi marcati

Con isolamento Esame colturale su terreni:

di base, arricchiti, di arricchimento,

differenziali, selettivi

Studio attività biochimico-metaboliche

Identificazione eventuale di siero- o biotipo

Sensibilità in vitro agli antibiotici

Tecniche di biologia molecolare

Anamnesi Natura del campione Patologia sospettata Esami microscopici diretti

Scelta e semina dei terreni per colture primarie

Colorazioni, IFD

Incubazione

Studio della morfologia delle colonie isolate, colorazioni (GRAM)

Trapianto per ottenere colture pure su terreni solidi e liquidi

Colorazione GRAM, catalasi test, ossidasi test, ecc..

Scelta e semina su terreni differenziali

Lettura ed identificazione finale

Incubazione

Antibiogramma se urgente

Antibiogramma

Anaerobiosi, microaerofilia, aerobiosi

Tecniche di biologia molecolare / sequenziamentoVaccino

stabulogeno

Diagnostica delle malattie viraliMateriale d’esame(essudati, trasudati, escreti, frammenti d’organo, prelievi bioptici, liquidi organici, ecc.)

Senza isolamento Microscopia elettronica

Ricerca di Ag virale con anticorpi marcati

Sonde di acidi nucleici

Con isolamento

colture di cellule uova embrionate infezione sperimentale

-effetto citopatico -morte embrionale -attitudine patogena-lesioni cellulari -comparsa di emoagglutinina -riproduzione malattia

-emadsorbimento -arresto sviluppo embrione,

emorragie, ecc.

Regolamento di igiene, sanità pubblica e veterinaria

• Gli allevamenti di chiocciole destinate all’alimentazione umana sono soggetti a vigilanza veterinaria

• Gli allevatori sono tenuti a segnalare al Servizio Veterinario qualunque episodio di mortalità eccedente la norma

• Sono altresì tenuti a mantenere l’allevamento e le aree ad esso circostanti in buone condizioni igieniche

Le chiocciole presenti sul nostro pianeta da innumerevole tempo si sono evolute per essere in grado di resistere a malattie, variazioni climatiche e condizioni ambientali estreme, mancanza di cibo e attacchi dei predatori e alcune specie sono state in grado di adattarsi, o di sfruttare, gli ambienti artificiali creati dall’uomo.

......... Concetti generali

• Le chiocciole non hanno un vero e proprio apparato immunitario, poichè questa funzione viene affidata alle cellule del sangue: le immunoglobuline, il sistema complemento ecc. sono sostituite in questo caso da agglutinine, le quali sembrano avere l’incredibile capacità di discriminare tra i vari tipi di sostanze. Queste particolari proteine non si trovano solo nell’emolinfa, ma anche nel mucoprodotto dalla cute e sembrano costituire i sistemi più primitivi di difesa contro i microrganismi.

• I gasteropodi possiedono cellule sanguigne dette amebociti in grado di fungere da fagociti nella digestione di materiale non-self, sia questo di origine organica o no: questo processo è in grado di eliminare in poco tempo anche possibili batteri penetrati nell’organismo

......... Concetti generali – meccanismi di difesa

• Inoltre nonostante siano in grado di veicolare al loro interno una flora microbica varia, questi animali sembrano difendersi dagli attacchi batterici tramite una sostanza contenuta nella bava, molto simile alla streptomicina, la quale ha dimostrato la sua efficacia in laboratorio contro organismi come E. coli e Staphylococcus aureus

• Altro meccanismo di difesa importante è l’epifragma, il quale protegge l’apertura buccale della chiocciola, durante il sonno invernale, da infezioni, traumi e disidratazione. Si conoscono le sue proprietà antimicrobiche

Opercoli completamente formati sono stati prelevati in modo sterile e per ognuno di essi è stata calcolata la MIC (concentrazione minima inibente) nei confronti di patogeni quali E. coli, Salmonella, Pasteurella e Staphylococcus aureus, messa poi a paragone con laMIC dell’antibiotico streptomicina. Per tutti gli agenti, ad eccezione diS. aureus, la MIC del mollusco si è rivelata più efficace rispetto a quella del farmaco

......... Concetti generali - MECCANISMI DI DIFESA VERSO PATOGENI

Esame della chiocciola eseguito su:

• Soggetti non opercolati (periodo estivo)

• Soggetti opercolati (periodo invernale)

l’opercolatura coinvolge tutta la fisiologia del mollusco e ne condiziona la

conservazione

La morte di qualche soggetto determina solitamente la morte rapida di tutti gli

altri conservati nello stesso contenitore.

Come regola generale si è pertanto stabilito che il prodotto o è tutto in buono

stato o deve essere distrutto, anche se una parte residua dovesse trovarsi, al

momento del controllo sanitario, ancora in buono stato.

• Controlli sanitari delle chiocciole si basano sulle

caratteristiche degli individui che compongono

una partita.

• I segni principali, in caso di chiocciole morte o

ammalate, sono: umidità eccessiva, sporcizia e

odore nauseabondoLe chiocciole morte di recente sono retratte nella conchiglia (è possibile stabilire la

morte verificando l’insensibilità alla puntura.

Le chiocciole ammalate sono immobili al fondo della conchiglia, l’estremità del

piede è poco arcuata, grigiastra, emettono viscosità abbondante e di cattivo

aspetto. Spesso il piede è al di fuori della conchiglia e non si distende

completamente

In questi casi non si può operare nessuna cura efficace e pertanto si impone il

sequestro e la distruzione dell’intera partita

Le principali cause di mortalità nelle chiocciole sono rappresentate da parassiti e predatori, ben poco si conosce sulle malattie infettive di questa specie

•• BatteriBatteri

– infezione sperimentale con Salmonella typhimurium, infantis e dublin

(Caracappa et al., 1980)

– infezione sperimentale di soggetti sani con germi isolati da soggetti

malati (Rossi-Vigliani, 1975)

– Episodi di alta mortalità imputabili ad Aeromonas spp sono stati documentati sia in Achantina fulica, sia in Helix aspersa.

•• ParassitiParassiti

– forme larvali di Trematodi e forme adulte di Nematodi nell’epato-

pancreas (Arru-Leoni, 1979)

– presenza di Riccardoella limacum (acaro) nel sacco polmonare (Vara,

1979)

•• VirusVirus

– infezione sperimentale con virus di Newcastle (Beccaria-Ferrari, 1980)

……….. come animale

• Non esistono dati certi sul ruolo dei germi isolati quali

patogeni

• Salmonella spp può essere veicolata da H. pomatia, ma non

sembra causare malattia

• Parassiti ed acari possono giocare un ruolo importante se c’è

infestazione massiva

• NCDV può essere veicolato ma non causa malattia in H.

pomatia

…………..come animale

Vi sono delle difficoltà nello stabilire quali specie di batteri siano veri patogeni primari obbligati e quali invece facoltativi, saprofiti.

E’ però indispensabile considerare l’interazione di tre fattori:

1. Ospite

2. Agente patogeno

3. Ambiente

……………..come animale

1

1-3 1-2

1-2-3

2-3

3 2

La malattia si verifica quando 1 e 2 sono presenti in un ambiente 3 che favorisce lo sviluppo di una malattia. Questa regola si può applicare solitamente anche all’eziopatogenesi delle malattie batteriche delle chiocciole

• Dunque è noto che molti batteri, se le chiocciole si trovano in condizioni ottimali, si comportano come saprofiti; ma se si verificano condizioni stressanti da cause ambientali, alimentari, ecc essi possono causare infezioni con conseguenti perdite anche severe.

• Diventa pertanto importante stabilire se i germi isolati da una chiocciola malata o morta rappresentano l’agente eziologico primario, oppure se sono di semplice irruzione secondaria.

…………….come animale

• I parassiti rappresentano il problema più grave all’interno di uno stabilimento, le cause principali sono da attribuirsi a scarse condizioni igieniche nell’allevamento, inadeguata nutrizione, sovrappopolamento e cattiva gestione da parte dell’allevatore.

• Nelle chiocciole allevate è possibile constatare frequentemente la presenza di nematodi e di acari, entrambi fonti di gravi danni, oltre alla presenza di funghi come Fusarium spp., in grado di diminuire la schiudibilità delle uova.

• Gli acari sono maggiormente rappresentati da Riccardoella limacum: si trovano per lo più al riparo nel bordo conchigliare o nel pneumostoma, attraverso il quale entrano per raggiungere il polmone e nutrirsi del sangue del loro ospite. E’ stato dimostrato come questi parassiti siano in grado di provocare sia una diminuzione della crescita fino al 40%, sia problemi riproduttivi (Graham et al 1996), pare inoltre che sia coinvolta una predisposizione genetica all’infestazione.

• I soggetti allo stato selvatico sono spesso invece colpiti da ditteri, i quali rilasciano le loro uova sulla conchiglia del mollusco e all’interno di esso completano il loro ciclo di sviluppo, sembrano in particolare preferire chiocciole che hanno appena ovodeposto (Elmslie,2005).

Principali agenti di mortalità della chiocciola CONSEGUENZA SULLA CHIOCCOLA

Predatori: roditori, carabidi, stafilinidi, lampiridi, arionidi Morte degli individui, soprattutto quelli giovani, morte anche delle uova di cui i predatori di nutrono

Condizioni climatiche avverse: pioggia eccessiva e acqua stagnante, vento, sbalzi ti temperatura

Rispettivamente: annegamento, disidratazione, congelamento

Avvelenamento da rodenticidi, insetticidi, disinfestanti ecc. Morte dei soggetti con pericolo di residui all’interno dei sopravvissuti

Parassitosi Produzione eccessiva di bava, danni a causa degli acari e ditteri, fino a morte dei soggetti

Deficienze nutrizionali Sviluppo di parassitosi, indebolimento della conchiglia, mancataproduzione dell’epifragma fino a morte dell’individuo

Traumi Rottura della conchiglia fino a decesso del soggetto

Batteri: Aeromonas, Pseudomonas Indebolimento del soggetto, perdita di peso, comparsa di odori sgradevoli.