Colorazione di Gram1a. Da brodocoltura: 1 o 2 ansate, strisciate su vetrino pulito.

1b. Da piastra: Deporre una goccia di acqua, e stemperarvi un ago caricato

sulla colonia, fino a formare un sottile velo

2. Asciugare all’aria; fissare al calore; far raffreddare

3. Coprire con Cristal Violetto per un minuto. Sciacquare con acqua.

4. Coprire con la soluzione iodo-iodurata per 1 minuto. Sciacquare con

acqua

5. Decolorare per 3 secondi con l’alcool, e sciacquare immediatamente con

acqua

6. Per il contrasto, coprire con Safranina per 30 secondi; sciacquare con

acqua.

7. Asciugare con carta bibula..

Schema dei passi nella colorazione di Gram

Fasi nella colorazione di Gram

Gram Gram PositivePositive

Gram NegativeGram Negative

GRAM POSITIVEGRAM POSITIVE

GRAM NEGATIVEGRAM NEGATIVE

CytoplasmCytoplasm

CytoplasmCytoplasm

Lipoteichoic acid Peptidoglycan-teichoic acid

Cytoplasmic membrane

Inner (cytoplasmic) membrane

Outer Membrane

LipopolysaccharidePorin

Braun lipoprotein

Peri

plas

mic

spa

ce

Confronto delle superfici

GRAM STAIN