Colorazione di Gram 1a. Da brodocoltura: 1 o 2 ansate, strisciate su vetrino pulito. 1b. Da piastra:...

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Colorazione di Gram1a. Da brodocoltura: 1 o 2 ansate, strisciate su vetrino pulito.

1b. Da piastra: Deporre una goccia di acqua, e stemperarvi un ago caricato

sulla colonia, fino a formare un sottile velo

2. Asciugare all’aria; fissare al calore; far raffreddare

3. Coprire con Cristal Violetto per un minuto. Sciacquare con acqua.

4. Coprire con la soluzione iodo-iodurata per 1 minuto. Sciacquare con

acqua

5. Decolorare per 3 secondi con l’alcool, e sciacquare immediatamente con

acqua

6. Per il contrasto, coprire con Safranina per 30 secondi; sciacquare con

acqua.

7. Asciugare con carta bibula..

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Schema dei passi nella colorazione di Gram

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Fasi nella colorazione di Gram

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Gram Gram PositivePositive

Gram NegativeGram Negative

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GRAM POSITIVEGRAM POSITIVE

GRAM NEGATIVEGRAM NEGATIVE

CytoplasmCytoplasm

CytoplasmCytoplasm

Lipoteichoic acid Peptidoglycan-teichoic acid

Cytoplasmic membrane

Inner (cytoplasmic) membrane

Outer Membrane

LipopolysaccharidePorin

Braun lipoprotein

Peri

plas

mic

spa

ce

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Confronto delle superfici

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GRAM STAIN