Protocolo de Antihipertensivo

7/24/2019 Protocolo de Antihipertensivo

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Facultad de farmacia y Bioqumica Ctedra: Bioqumica Aplicada

AO DE LAS CUMBRES MUNDIALES EN EL PER

UNIVERSIDAD NACIONAL DE

LA AMAZONA PERUANA

FACULTAD DE FARMACIA YBIOQUMICA

PROTOCOLO DE ANTIHIPERTENSIVO

ASIGNATURA :

Bioqumica Aplicada.

DOCENTE :

Qf. WILREDO GUTIERRE! AL"ARADO

TE#A :

ESTUDIO DEL EFECTO ANTIHIPERTENSIVO DE LA SalviascutellarioidesEN UN MODELO DE RATAS HIPERTENSAS.

ALU#NO :

SANC$E! RODRIGUE! "LADI#IR

CODIGO :

%&''&()

SE#ESTRE :

I * %&&+

IQUITOS PER%&&+


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ESTUDIO DEL EFECTO ANTIHIPERTENSIVO DE LA SALVIASCUTELLARIOIDES EN UN MODELO DE RATAS HIPERTENSAS

RESUMEN

Introduccin: La infusin de los tallos y hojas de la planta Salviascutellarioides (nombre vulgar: mastranto) es ampliamente utilizada en lamedicina tradicional colombiana por sus efectos antihipertensivos y diurticos.asta el momento no se han realizado estudios e!perimentales "ue validen elefecto antihipertensivo de la S. scutellarioides.

Objti!o:#studiar el efecto de la S. scutellarioides en la presin arterial con unmodelo de ratas hipertensas.

Mtodo"o#$%: Se tomaron treinta ratas machos repartidas en $ gruposhomogneos y al azar as%: grupo & solucin salina ($ ml'g p.o.) y solucin

salina (& ml'g i.p.) grupo *. S. scutellarioides (&g'g p.o.) y L+,-# (/0 mg'gi.p.) grupo 1. S. scutellarioides (* g'g p.o.) y L+,-# (/0 mg'g i.p.) grupo /.enalapril (*$ mg'g p.o.) y L+,-# (/0 mg'g i.p.) grupo $. Solucin salina ($ml'g p.o.) y L+,-# (/0 mg'g i.p.). Los tratamientos se administrarondiariamente durante / semanas. La medicin de la tensin arterial (sistlicamedia y diastlica) se realiz de forma no invasiva con un tensimetro de cola yun sensor piezoelctrico.

R&u"t%do&: La administracin de S. scutellarioides * g'g produjo unareduccin estad%sticamente significativa en la tensin arterial media (2-) ytensin arterial diastlica (2-3) en comparacin con el grupo "ue recibi L+,-# y solucin salina. La reduccin producida por S. scutellarioides en la2- y 2-3 es comparable con el grupo "ue recibi enalapril *$ mg'g. Ladisminucin en la 2- y 2-3 se obtuvo durante la semana & (p40.00&) en lasemana * (p40.0&) y en la semana / (p40.0$) de tratamiento. La administracinde S. scutellarioides & g'g no tuvo efecto en la tensin arterial.

Conc"u&ion&: #l estudio corrobora la aparente actividad antihipertensivainformada por practicantes de la medicina tradicional de S. scutellarioides. Sere"uieren m5s estudios para determinar el perfil farmacolgico y la to!icidad dela planta.

P%"%br%& c"%!: ipertensin. Salvia scutellarioides. astranto.#tnofarmacolog%a. L+,-#. S. palaefolia.

E!%"u%tion o' t( %nti()*rtn&i! ''ct o' S%"!i% &cut""%rioid& in % r%t+od" o' ()*rtn&ion

SUMMAR,

Introduction:-n infusion of stems and leaves of the plant Salvia scutellarioides(common name: astranto) is used in the 6olombian traditional medicine due

to its antihypertensive and diuretic effects. 7p to date no e!perimental studieshave been done to validate the reported effects.

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Objcti!:2o determine the effect of S. scutellarioides in blood pressure usinga model of hypertensive rats.

Mt(od&: - total of thirty male rats 8ere randomly distributed in fivehomogeneous randomly distributed groups: group &. ,ormal saline solution ($

ml'g p.o.) and normal saline solution (& ml'g i.p.)9 group *. S. scutellarioides(& g'g p.o.) and L+,-# (/0 mg'g i.p.)9 group 1. S. scutellarioides (* g'gp.o.) and L+,-# (/0 mg'g i.p.)9 group /. enalapril (*$ mg'g p.o.) and L+,-# (/0 mg'g i.p.)9 group $. ,ormal saline solution ($ ml'g p.o.) and L+,-# (/0 mg'g i.p.). 2he treatments 8ere administered daily during four8ees. lood pressure measurements (systolic median and diastolic) 8ereperformed in a non invasive form using a tail pressure meter 8ith a piezoelectric sensor9 furthermore renal and cardiac histopathology 8ere performedto all animals.

R&u"t&:2he administration of S. scutellarioides * g'g produced a statisticallysignificant reduction of median blood pressure (;) and diastolic bloodpressure (3;) in comparison 8ith the group that received L+,-# and normalsaline solution. 2he ; and 3; reduction produced by S. scutellarioides 8ascomparable to that of the group that received enalapril *$ mg'g.


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vasodilatador se han descrito en plantas de la familia Lamiaceae algunas deestas como el 5cido metiripariocromeno - (--) aislado de la Drthosiphonaristatus se evalBan en fases e!perimentales precl%nicas y cl%nicas.

La especie S. scutellarioides (familia: LamiaceaeEnombre vulgar: mastranto+

sinonimia: S. palaefolia) es nativa de 6olombia donde crece de formaendmica en las regiones pac%fica y andina a alturas entre &?00 y 1$00 metrossobre el nivel del mar. #l presente estudio evalBa el efecto de la administracinde S. scutellarioides en un modelo de ratas hipertensas por administracincrnica de L+,-#. (,F+nitro+L+arginina metil ester). #l L+,-# es uninhibidor irreversible de la enzima !ido n%trico sintasa (,DS) encargada de laproduccin de !ido n%trico en el endotelio a partir de la L+arginina. La inhibicinde la ,DS disminuye la produccin de !ido n%trico (,D) ocasionavasoconstriccin aumento de la liberacin de renina e hipertensin arterial.

METODOLO/0A

Obtncin d "% *"%nt% ) %"+%cn%+into.La S. scutellarioides se recolecten el ilmetro &G v%a uenaventura en un mercado local de plantasmedicinales. La identificacin de la planta la realiz el doctor ;hillipeSilverstone (bilogo bot5nico ;rofesor 2itular de biolog%a =acultad de6iencias 7niversidad del Calle)9 en el herbario del 3epartamento de iolog%ade la 7niversidad del Calle se almacenaron muestras de hojas tallos y ra%cesde la S. scutellarioides. #l material recolectado se lav y despus se desec enun horno de flujo laminar a 1$H 6 durante /G horas. #l almacenamiento se hizoen envases cerrados a una temperatura de 0H 6. Los procesos empleados paracolectar y procesar la planta se realizaron de acuerdo con las recomendacionesdel 6I2#3 (6iencia y 2ecnolog%a para el 3esarrollo) para la recoleccin yprocesamiento de plantas medicinales.

Pr*%r%cin d" 1tr%cto. Las hojas y tallos secos se fraccionaronmec5nicamente9 para cada preparacin del e!tracto se tomaron &0 g delmaterial a los "ue se les practic un proceso de e!traccin con arrastre devapor en $00 ml de *0 destilada. #l e!tracto acuoso (#-) obtenido se colocen un rotoevaporador hasta obtener un volumen de *$ ml e"uivalente a une!tracto acuoso (#-) al /0@ de concentracin.

Ani+%"& d 1*ri+nt%cin.#l modelo e!perimental se realiz en ratasmachos Sprague+3a8ley machos con peso de *00 a *$0 g y edad G+&0semanas. Los animales se mantuvieron en el ioterio de la 7niversidad delCalle con las siguientes condiciones: ciclo luz+d%a de &* horas temperatura **+*?H6 seis animales por cada jaula agua y comida ad libitum.

M2todo d r#i&tro d "% tn&in %rtri%".La tensin arterial sistlica (2-S)media (2-) y diastlica (2-3) se midieron con un e"uipo de toma de tensinarterial no invasiva de seis canales JKK26 si! channels ,K;2 consistente enuna c5mara para seis ratas a temperatura constante de 1&H69 un tensimetrode cola con un transductor piezoelctrico conectado a un amplificador de

pulsos y un scanner para alternar la medicin entre cada rata sin manipular alanimal. Los datos del amplificador para cada rata se env%an al computador por

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medio de un e"uipo de ad"uisicin de datos J;&00 data ac"uisition system+KD;-62 y se analizan mediante el soft8are -cno8ledge 1.0AMKD;-62. #l soft8are monitorea el pulso y la tensin arterial en canalesdiferentes el principio de los pulsos indica la 2-S y el punto de m5!imaamplitud de los pulsos indica la 2-. La 2-3 se calcula de la siguiente forma:

TAD3 45TAM 6 TAS7 8 9

Los mtodos no invasivos para el registro de la 2- han mostrado una buenacorrelacin con el uso de catteres intra+arteriales en ratas.

Mod"o d (i*rtn&in con LNAME.#l modelo de hipertensin mediante L+,-# se utiliza ampliamente para estudiar la fisiopatolog%a y la farmacolog%ade la hipertensin arterial. Se ha descrito "ue la administracin de L+,-#produce un aumento de *0@ a /0@ de la tensin arterial sistlica y diastlicaen ratas. -dem5s el L+,-# produce fibrosis card%aca y nefropat%a

caracter%sticas de daNo de rgano blanco similares a la hipertensin humana.La hipertensin por L+,-# se debe sobre todo a la vasoconstriccin puesdisminuye la s%ntesis de ,D y al aumento en la s%ntesis de renina. ;or estosmecanismos se ha descrito "ue la administracin de K#6-s junto con el L+,-# previene el desarrollo de hipertensin arterial y el daNo de rganoblanco en este modelo. La administracin de L+,-# se hizo al mismo tiempocon la S. scutellarioides de la forma como se ha descrito en los protocolos yestudios basados en este modelo. Se escogi la dosis de /0mg'g'i.p. de L+,-# por ser la "ue cursa con el mayor grado de fibrosis card%aca y permiteevaluar el efecto de la S. scutellarioides en la prevencin del daNo de rganoblanco por hipertensin arterial. Se tomaron 10 ratas machos y se repartieron alazar en $ grupos homogneos para la administracin diaria de los siguientestratamientos:

. Frupo &. Solucin salina 0.O@ (0.$ ml'g intrag5strico)P solucin salina (&ml'g i.p.). Frupo *. S. scutellarioides & g'g ($ ml'g #- al *0@ intrag5strico)PL+,-#(/0 mg'g i.p.). Frupo 1. S. scutellarioides * g'g ($ ml'g #- al /0@ intrag5strico)PL+,-#(/0 mg'g i.p.).Frupo /. #nalapril *$ mg'g ($ ml'g)PL+,-# (/0 mg'g i.p.)

. Frupo $. Solucin salina 0.O@ (0.$ ml'g intrag5strico) PL+,-# (/0 mg'gi.p.)

Se tomaron medidas de 2- antes de iniciar la administracin de lostratamientos (semana cero) y luego cada semana durante *G d%as. -l finalizarlas cuatro semanas de tratamiento se anestesiaron los animales conpentobarbital (&00 mg'g) para perfusin con solucin salina isotnica (Q*00ml) y seguidamente con formol amortiguado (Q*00 ml). 3espus de laperfusin se e!trajeron el corazn y los riNones de todos los animales. Loscorazones se disecaron y pesaron para obtener la relacin ;CK';6 (pesoventricular iz"uierdo'peso corporal) %ndice utilizado para cuantificar el grado de

hipertrofia ventricular. ;or Bltimo todas las muestras de corazn y riNn seprocesaron para teNirlas con hemato!ilina+eosina.

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An;"i&i& &t%d$&tico. Los resultados de tensin arterial sistlica media ydiastlica se e!presaron como la media del grupo y se procesaron con unan5lisis de varianza (-,DC-) de medidas repetidas. Las diferencias entre losgrupos se analizaron con el ajuste de onferroni. Se acept a priori una p40.0$como indicador de diferencias estad%sticamente significativas. Los datos se

analizaron procesaron y graficaron con el uso de Fraph;adM ;rism versin/.0 para Rindo8sM ;.

RESULTADOS

-ntes de administrar los tratamientos (semana cero) no se observarondiferencias estad%sticamente significativas en la 2-S 2- y 2-3. Laadministracin de S. scutellarioides (& y * g'g) no redujo significativamente la2-S si se compara con el grupo "ue recibi L+,-#Psolucin salina (Fr5fica&). Sin embargo la dosis de * g'g de S. scutellarioides produjo unadisminucin estad%sticamente significativa en la 2- en las semanas &

(p40.0&) * (p40.0&) y / (p40.0$) de e!perimentacin frente al grupo L+,-#Psolucin salina (Fr5fica *). La 2-3 (Fr5fica 1) tambin disminuy conS. scutellarioides (* g'g) en las semanas & (p40.00&) y * (p40.0&). #l grupo"ue recibi S. scutellarioides a dosis de & g'g no present diferenciasestad%sticamente significativas con el grupo L+,-#Psolucin salina.

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http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f1http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f1http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f2http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f3http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f1http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f1http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f2http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f3


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#n la primera semana de tratamiento murieron dos ratas una en cada uno delos grupos de S. scutellarioides (& g'g y * g'g p.o.). La necropsia de losanimales revel "ue la causa de muerte fue broncoaspiracin del e!tractoacuoso en ambos casos. ,o hubo otros casos de mortalidad despus de esaprimera semana.

#l an5lisis microscpico de las histopatolog%as renales y card%acas no mostranormalidades para las ratas del grupo control (solucin salina i.p. y p.o.) y elgrupo tratado con L+,-# y enalapril. ;or el contrario se observarterioloesclerosis hipertrofia de cardiomiocitos y fibrosis card%aca en el grupo"ue recibi solamente L+,-# y en los dos grupos tratados con L+,-# y S.scutellarioides (Fr5fica /). Los hallazgos histopatopatolgicos del grupo deratas hipertensas tratadas con enalapril fueron comparables al grupo control.#n ninguno de los grupos e!perimentales se observ glomeruloesclerosis. #lan5lisis estad%stico de la relacin ;CK';6 no mostr diferenciasestad%sticamente significativas entre los grupos (=otograf%a &).

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http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f4http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7foto1http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f4http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7foto1


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La Fr5fica & muestra los valores semanales de 2-S en ratas tratadasdiariamente con solucin salina al 0.O@ S. scutellarioides &g'g P L+,-# S.scutellarioides * g'gPL+,-# enalapril *$ mg'gPL+,-# y L+,-#Psolucin salina durante 10 d%as. ,o se encontraron diferenciasestad%sticamente significativas entre los grupos tratados con S. scutellarioidescon respecto al grupo control. Los datos se dan como el promedio Q errorest5ndar de la media (n T $+?.

La Fr5fica * muestra los valores semanales de 2- en ratas tratadas

diariamente con solucin salina al 0.O@ S. scutellarioides & g'g P L+,-# S.scutellarioides * g'g P L+,-# enalapril *$ mg'g P L+,-# y L+,-# P

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http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f1http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f2http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f2http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f1http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1657-95342006000100008&lng=pt&nrm=iso#cm1a7f2


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solucin salina durante 10 d%as. La administracin de S. scutellarioides (* g'g)produjo una disminucin estad%sticamente significativa en la 2- en lassemanas & * y /9 en comparacin con el grupo "ue slo recibi L+,-#. Losdatos se presentan como el promedio Q error est5ndar de la media (n T ?).

La Fr5fica 1 muestra los valores semanales de 2-3 en ratas tratadasdiariamente con solucin salina al 0.O@ S. scutellarioides & g'gPL+,-# S.scutellarioides * g'g P L+,-# enalapril *$ mg'g P L+,-# y L+,-# Psolucin salina durante 10 d%as. La administracin de S. scutellarioides (* g'g)produjo una disminucin estad%sticamente significativa en la 2-3 en lassemanas & y *9 en comparacin con el grupo "ue apenas recibi L+,-#. Losdatos aparecen como el promedio Q error est5ndar de la media (n T ?).

La Fr5fica /muestra la relacin ;CK';6 obtenida despus del sacrificio de losanimales en el modelo de hipertensin con L+,-#. ,o se encontrarondiferencias estad%sticamente significativas entre los grupos. Los datos figuran

como el promedio Q error est5ndar de la media (n T $+?).

DISCUSI


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grado de fibrosis card%aca y arterioloesclerosis en comparacin con otrosmodelos de hipertensin. -dem5s este modelo tambin se caracteriza pordesarrollo de hipertrofia card%aca y daNo renal manifestaciones menosfrecuentes en comparacin con otros modelos como el de ratas Foldblatt(estenosis unilateral de la arteria renal) y el de ratas hipertensas tipo 3ahl

(cepa de ratas hipertensas al administrar dieta hipernatrmica).

La administracin de S. scutellarioides * g'g produjo una disminucin de la2- y 2-3 en las dos primeras semanas de e!perimentacin comparablescon el descenso de la presin arterial en el grupo control y grupo de ratashipertensas tratadas con enalapril. La administracin de S. scutellarioides noprodujo alteracin de la 2-S en ninguna de las dosis estudiadas. #l efectoantihipertensivo del grupo de S. scutellarioides (* g'g) en la 2- y 2-3disminuy en las semanas tercera y cuarta de tratamiento.

La tolerancia al efecto antihipertensivo de la S. scutellarioides en el modelo con

L+,-# se debe aclarar en futuros e!perimentos. Sin embargo se puedensugerir dos hiptesis "ue e!pli"uen el desarrollo de tolerancia al efectoantihipertensivo de la planta:

&. #l efecto farmacolgico antihipertensivo de la planta se puede mediar porvasodilatacin "ue activa respuestas fisiolgicas compensatorias como elsistema renina+angiotensina+aldosterona aumento de las concentraciones deadrenalina y vasopresina. #stos mecanismos hormonales pueden compensaruna reduccin farmacolgica de la presin arterial.*. Bltiples mecanismos diferentes a la inhibicin de la s%ntesis de ,D seencuentran comprometidos en el desarrollo de hipertensin por L+,-# loscuales podr%an e!plicar la tolerancia al efecto antihipertensivo de la planta.#ntre ellos se ha descrito "ue la administracin crnica de L+,-# produce unaumento de la liberacin de renina (*0) aumento en la e!presin de -


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protegen contra el daNo de rgano blanco en el modelo de L+,-# pese a"ue su efectividad se ha visto en mBltiples ensayos cl%nicos controlados*?+*G.

#n 6olombia al igual "ue en otros pa%ses subdesarrollados un porcentaje altode la poblacin recurre en forma creciente y por diversas causas a

medicamentos herbolarios para el tratamiento de entidades crnicas como lahipertensin arterial. #s por tanto imperativo validar sus usos conocer losefectos colaterales to!icolog%a y los posibles mecanismos de accin. Losresultados obtenidos en este proyecto sumado al amplio uso en medicinatradicional de la S. scutellarioides justifican realizar estudios de to!icidadampliar a diferentes modelos animales de hipertensin arterial para determinarla seguridad y eficacia de su uso. -dem5s se re"uieren ensayos in vitro enrgano aislado y cultivos celulares para estudiar el perfil farmacolgico de la S.scutellarioides9 estos estudios se llevar5n a cabo en conjunto con estudiosbio"u%micos y de biolog%a molecular para la obtencin de los principios activosfarmacolgicos de la planta.

CONCLUSIONES

U #l e!tracto acuoso de S. scutellarioides disminuye la 2-3 a una dosis de *g'g durante las primeras dos semanas en el modelo de hipertensin arterialpor L+,-#.U #l e!tracto acuoso de S. scutellarioides no tiene efectos significativos en la2-S del modelo empleado.U Se re"uieren futuros estudios in vitro y otros modelos animales dehipertensin para aclarar los mecanismos subyacentes a estos resultados.U La S. scutellarioides aun"ue aparentemente eficaz para reducir la 2- nopreviene el daNo de rgano blanco en el modelo con L+,-#.U Los resultados del estudio coinciden con la aparente actividad antihipertensivainformada por practicantes de la medicina tradicional de S. scutellarioides.U Se re"uiere establecer definitivamente las caracter%sticas to!icolgicas de laplanta antes de iniciar los estudios cl%nicos limitados y controlados en humanospara comprobar su efectividad como antihipertensivo y establecer lospar5metros de uso limitaciones y efectos colaterales.

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REFERENCIAS

&. Staessen V- Rang V ianchi F irenhager R. #ssential hypertension.Lancet *0019 1?: &?*O+&?/&.*. Wearney ; Rhelton


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Foldblatt to genetic engineering. 6ardiovasc

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