Il piano nazionale e regionale di selezione genetica per la resistenza alle TSE ovine

Il piano nazionale e regionale di selezione genetica per la resistenza alle TSE ovineMarco TambaCentro Emiliano-Romagnolo di Epidemiologia Veterinaria

Ferrara, 11/11/05

Scopo della presentazioneConoscere la filosofia del piano di selezione genetica per la resistenza alle TSEPresentare il piano regionale (Del. 1356/04 del 12/07/04)Presentare il piano nazionale (DM 17/12/2004)

Focolai di scrapie in Italia:curva epidemica 1995-2005211 focolai2 in corso di conferma>87.000 animali coinvolti

focolai totali 2004(2)

10

10

190

90

140

150

130

828

1024

1013

passive surv.

active surv.

2002

ANNO 2002

speciesurvregionecasi(sempre 1Somma di casi2002

oattivaEmilia R.1regioneTotale

oattivaUmbria1Abruzzo3Conteggio di specie

oattivaEmilia R.1Calabria1speciesurvTotale

opassivaUmbria1Emilia R.5cattiva2

oattivaMolise1Lazio3Totale c2

cattivaPuglia1Molise1eattiva2

oattivaEmilia R.1Piemonte1Totale e2

oattivaEmilia R.1Puglia1oattiva24

opassivaToscana1Sardegna4passiva8

eattivaLazio1Sicilia6Totale o32

oattivaSardegna1Toscana8Totale complessivo36

opassivaSardegna1Umbria2

oattivaLazio1Veneto1

opassivaToscana1Totale complessivo36

oattivaSicilia1

opassivaSardegna1

eattivaLazio1

oattivaAbruzzo1

oattivaToscana1

oattivaToscana1sorv 2002

oattivaVeneto1

opassivaToscana1Conteggio di surv

oattivaSicilia1survTotale

opassivaToscana1attiva2877.78

oattivaCalabria1passiva822.22

oattivaSicilia1Totale complessivo36

oattivaToscana1

oattivaAbruzzo1

oattivaSicilia1

cattivaAbruzzo1

oattivaEmilia R.1

oattivaSardegna1

oattivaSicilia1

oattivaSicilia1

opassivaToscana1

oattivaPiemonte1

2003

ANNO 2003

speciesurvregionecasi(sempre 1Somma di casiConteggio di surv

oattivaMarche1regioneTotalespeciesurvTotale

oattivaLazio1Basilicata1cattiva1

oattivaSardegna1Campania2passiva1

oattivaVeneto1Lazio1Totale c2

oattivaToscana1Marche4eattiva3

opassivaMarche1Piemonte2Totale e3

eattivaSicilia1Sardegna10oattiva20

oattivaSardegna1Sicilia5passiva9

opassivaSardegna1Toscana5Totale o29

oattivaSardegna1Veneto2Totale complessivo34

oattivaToscana1Lombardia1

oattivaCampania1Abruzzo1

cattivaCampania1Totale complessivo34

oattivaPiemonte12003

opassivaSardegna1

oattivaPiemonte1Conteggio di surv

eattivaVeneto1survTotale2470.59attiva

eattivaBasilicata1attiva241029.41passiva

oattivaSicilia1passiva1034100.00

oattivaSicilia1Totale complessivo34

opassivaSardegna1

opassivaSicilia1aggiornato al 5/1/04tipo sorveglianza

opassivaSardegna1

oattivaSicilia1sorveglianza199519961997199819992000200120022003

opassivaToscana1attiva00000002824

oattivaMarche1passiva11199141513810

cpassivaSardegna1totale111991415133634

oattivaMarche1

oattivaLombardia1

oattivaToscana1

opassivaSardegna1

opassivaToscana1

oattivaAbruzzo1

oattivaSardegna1

2004

ANNO 2004

focspeciesurvregionecasi (sempre 1)Conteggio di regioneConteggio di surv

1cattivaSicilia1regioneTotalespeciesurvTotale

2oattivaPiemonte1Emilia R.1cattiva2

3oattivaSicilia1Lazio1Totale c2

4opassivaSardegna1Marche1oattiva11

5oattivaSardegna1Piemonte1passiva10

6oattivaLazio1Sardegna9Totale o21

7opassivaEmilia R.1Sicilia4Totale complessivo23

8oattivaMarche1Puglia1

9oattivaSardegna1Toscana4

10oattivaPuglia1Umbria1

11opassivaSardegna1Totale complessivo23

12oattivaToscana1

13opassivaSardegna1

14opassivaSardegna12004

15oattivaSardegna1

16opassivaToscana1Conteggio di surv

17opassivaToscana1survTotaleTotale

18opassivaSardegna1attiva131356.52attiva

19opassivaSardegna1passiva101056.52passiva

20opassivaToscana1Totale complessivo2323

21cattivaUmbria1

22oattivaSicilia1

23oattivaSicilia1

aggiornato al 3/01/05tipo sorveglianza

sorveglianza1995199619971998199920002001200220032004

attiva0000000282413

passiva1119914151381010

totale11199141513363423

sorveglianza1995199619971998199920002001200220032004

active surv.0000000282413

passive surv.1119914151381010

totale11199141513363423

tot165

2005

ANNO 2005

focspeciesurvregionecasi (sempre 1)2005

1opassivaSardegna1Conteggio di regioneConteggio di surv

2opassivaSardegna1regioneTotalespeciesurvTotale

3oattivaToscana1Emilia R.1cattiva4

4oattivaLazio1Lazio6Totale c4

5opassivaToscana1Sardegna15oattiva19

6cattivaSicilia1Sicilia6passiva21

7oattivaSicilia1Puglia1attiva1

8oattivaToscana1Toscana11Totale o41

9opassivaSardegna1Abruzzo2Totale complessivo45

10oattivaLazio1Campania2

11oattivaAbruzzo1Calabria1

12oattivaSardegna1Totale complessivo45

13opassivaToscana1

14oattivaLazio1

15oattivaSardegna1aggiornato al 25/10/05tipo sorveglianza

16opassivaSardegna1

17oattivaPuglia1sorveglianza19951996199719981999200020012002200320042005

18opassivaToscana1attiva000000028241324

19opassivaSicilia1passiva111991415138101021

20cattivaToscana1totale1119914151336342345

21oattivaSicilia1

22oattivaSicilia1sorveglianza19951996199719981999200020012002200320042005

23opassivaSardegna1active surv.000000028241324

24opassivaToscana1passive surv.111991415138101021

25oattivaCampania1totale1119914151336342345

26opassivaLazio1

27oattivaLazio1

28oattivaSardegna1

29oattivaSardegna1

30opassivaToscana1

31opassivaSardegna1

32opassivaSardegna1

33oattivaCampania1

34opassivaToscana1

35opassivaSardegna1

36cattivaSicilia1

37opassivaSardegna1

38opassivaSardegna1

39cattivaCalabria1

40oattivaAbruzzo1

41opassivaSardegna1

42oattivaLazio1

43oattivaEmilia R.1

44opassivaToscana1

45opassivaToscana1

Somma di casi (sempre 1)casi (sempre 1)

surv1Totale complessivo

attiva2323

passiva2121

attiva11

Totale complessivo4545

focolai totali

10

10

190

90

140

150

130

828

1024

1013

2124

passiva

attiva

dati fulvio2002

2002

Npositivinegativinon idoneiP*10000Int conf (Fl)

aa regmac2423133241225813.712560609,6-19,4

aa morti34922434244469.6349245,6-103,4

Tot27723572754610220.62770515,8-26,9

erad1251601191479.6370,9-616,9

FocGenotipoN

attiva28ARQ/ARQ76

passiva8ARQ/AHQ20

Tot36ARQ/VRQ1

Tot97

DATI EUROPEI

N totpositiviP*10000

aa regmac2635531867.1

aa morti8030523128.8

Tot34394841712.1

erad9447107113.3

NegativipositiviORInt conf

aa regmac24122331-

aa morti3424245.12,9 - 8,9

eradicati11916036.823,5 - 57,8

datiparz2003

7/31/03

Npositivinegativinon idoneiP*10000Int conf (Fl)

aa regmac2778014277665.0277802,5-8,8

aa morti4046340437.440462,3-27,7

Tot3182617318095.3318263,0-9,1

erad2524772447305.1

NegativipositiviORInt conf

aa regmac27766141-

aa morti404331.5

eradicati24477762.4

focolai totali 2004

10

10

190

90

140

150

130

828

1024

1013

passiva

attiva

Focolai di Scrapie denunciati in Emilia-Romagna (dati al 31/10/05)Dal 1991 ad oggi in Emilia-Romagna sono stati denunciati complessivamente 12 focolai di Scrapie.6/9 province hanno registrato almeno un focolaio.

Grafico1

19981

19991999

20002000

20014

32

20032003

20041

12005

attiva

passiva

tab.3 razze ovine

RazzaAziendeMFTot% capi

Sarda4344616,77617,22267.8%

Massese11439931,0364.1%

Comisana463093151.2%

Appenninica291251,2381,3635.4%

Sopravissana129110.0%

Delle Langhe6198008193.2%

Bergamasca14273023291.3%

Frisona Italiana100.05575572.2%

Biellese24567277833.1%

Corniglio4523383901.5%

Ile de France1411150.1%

Suffolk462531,4951,7486.9%

Valle del Belice135765792.3%

Berrichonne Du Cher7641622260.9%

Texel194130.1%

Totale2021,10924,29725,406100.0%

tab.4 razze capra

RazzaAziendeMaschiFemmineTotale

Saanen5711912630.7%

Camosciata delle alpi31813915738.2%

Rossa Mediterranea1010310325.1%

Frisa Valtellinese10661.5%

Meticcia4019194.6%

Totale1425386411100.0%

tabb.5-6

OVINI

ProvinciaSospettiMacellati ad uso umano >18 mesiAbbattimenti per estinzione focolaiMorti in aziendaTotale

EsaminatiPositiviEsaminatiPositiviEsaminatiPositiviEsaminatiPositiviEsaminatiPositivi

2002209901716184845614

200360252016904270

2004460090314826985

Totale8081102619501101,58119

CAPRINI



2002100510610

200340160350550

20046010490560

Totale1002700013501720

AnnoOvini Morti in aziendaCaprini Morti in aziendaAnnoNum. FocolaiOvini Abbattuti in focolaio% pos.

EsaminatiPositiviEsaminatiPositiviEsaminatiPositivi

200218485102003000-

200316903502004132330.9%

20041482490200512114.8%

Totale501101350Totale234441.2%

tab.8 Macelli

Categoria animali200220032004

TotaleSottoposti a test rapidoN PositiviTotaleSottoposti a test rapidoN PositiviTotaleSottoposti a test rapidoN Positivi

Ovi-caprini > 18 mesi regolarmente macellati493201067028301,1054420

Ovi-caprini > 18 mesi giunti al macello morti2202525040380

Totale495203069530801,1454800

tabb. 13-14 genotipi

Genotipi casi

RazzaGenotipo e classe20012002200320042005Tot%

SardaARQ/ARQ (III)31051878.3%

AppenninicaARQ/ARQ (III)114.3%

MeticcioARQ/ARQ (III)228.7%

MeticcioARQ/AHQ (III)228.7%

Totale31305223100.0%

genotipizzazioni in focolaio

AnnoN focolaiRazzaN soggetti genotipizzatiClasse IClasse IIClasse IIIClasse IV

ARR/ARRARR/ARHARR/AHQARQ/ARRARQ/ARQARQ/AHQAHQ/AHQARQ/ARHARH/ARHAHQ/ARHVRQ/VRQVRQ/ARQVRQ/ARHVRQ/AHQ

20011Sarda332513832

%6.1%0.0%15.2%39.4%24.2%9.1%6.1%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%

20041Sarda7461590263751721400000000

%21.3%0.0%3.5%50.3%23.1%1.9%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%

Annoattivapassivatot

199811

19990

20000

200144

2002325

20030

200411

200511


attiva

passiva

fig1-2

Percentuale casi per causale

Macellati per uso umano0.0%

Sospetti e abbattimenti in focolai11.1%

Morti in stalla88.9%




Ratio causale/annoEmilia RomagnamacellatiSospetti/AbbattutiiMorti in stallatotaleRatio causale/annoITALIAmacellatiSospetti e abbattimenti in focolaiMorti in stallatotale

MacellatiSospetti/AbbattutiMortiTotaleesposesposesposesposMacellatiSospetti/AbbattutiMortiTotaleesposesposesposespos

20020.034.734.027.120021090173623585171420020.174.67.54.72002236033010067533362527945130

20030.00.00.00.0200326801002040482020030.442.61.83.920033891616391816771601349994196

20040.031.310.26.6200446109631972754520040.045.00.85.0200418864928201276539528223141

AnnoDistribuzione et (mesi di vita)

Distribuzione geografica: (1995-2005)Incidenza di allevamenti colpitiOvini: 8,1 milioni*Caprini: 978 mila**Dati Eurostat dicembre 2004

Foglio1

Incidenza focolai regionali per numero allevamenti

RegioneNumero aziendeFocolaiIncidenza dal 1995incid/classi

Bolzano391200.00no foc

Trento99400.00no foc

Trentino-Alto AdigeTRENTINO-ALTO ADIGE490600.00no foc

Friuli V. GiuliaFRIULI-VENEZIA GIULIA62100.00no focaggior al 3/10/05

Valle d'AostaVALLE D'AOSTA57600.00no foc

LombardiaLOMBARDIA904411.11=3 =5 =10 =15=25

SardegnaSARDEGNA184516635.86

Emilia R.EMILIA-ROMAGNA27151140.56

ToscanaTOSCANA64894366.36

Italia12915021016.3

Grafico1

1.1057054401

1.5599407223

2.7005130975

3.7386671652

3.7807183365

4.7679593134

5.3461641272

6.4176614042

14.1342756184

16.111707841

19.1152375751

19.3704600484

21.6122757726

26.9204884146

35.7704189475

40.5156537753

66.2659885961

16.2601626016

INCIDENZA CUMULATIVAN Focolai / 10.000 allevamenti

cartina agg

aggiornata al 26/10/05

cartina agg 2004

aggiornata al 2212/04

cumulative incidence outbreaks/10,000 holdings

MBD00011F9E.unknown

MBD0016ACB3.unknown

Obiettivi del pianoObiettivo generale del Piano quello di in-crementare la frequenza dei caratteri di resistenza genetica alle TSE nella popolazio-ne ovina al fine di:a) contribuire alla tutela della salute umana ed animale;b) concorrere al controllo delle TSE degli ovini;c) concorrere alla creazione di aziende ovine a basso rischio di TSE.

Obiettivi del pianoObiettivi specifici del piano sono:a) eliminazione dellallele VRQ dagli allevamenti aderenti al piano;b) incremento della frequenza dellallele ARR negli allevamenti aderenti al Piano.c) aumento della disponibilit di montoni con genotipo resistente (ARR/ARR), utili anche per il ripopolamento degli allevamenti infetti;d) progressiva diminuzione della frequenza dellallele ARQ negli allevamenti aderenti al piano.

Basi del pianoIl piano si basa sullosservazione del fatto che solamente determinati genotipi ovini sembrano ammalarsi di scrapie.

Malattia # Infezione

La Scienza dietro la Genetica della Scrapie ci dice:Alcune pecore si ammalano pi facilmente di altreLa Genotipizzazione usata per identificare i geni che controllano la suscettibilit o la resistenza alla scrapie

??

La Scrapie e i montoniI montoni prendono la scrapie I montoni infetti non sembrano in grado di trasmettere la scrapie La genetica del montone influenza la suscettibilit alla scrapie dei propri figli

e le Capre?Ad oggi non sono stati identificati genotipi resistenti nelle capre.

Pertanto, tutte le capre devono essere considerate suscettibili alla Scrapie.

Cos la Genotipizzazione?La Genotipizzazione un test del DNAUn semplice esame del sangue o di tessuti permette di determinare il genotipo degli oviniil genotipo non cambia mai. Un solo esame basta per tutta la vita.Pu essere definito a qualsiasi et

GenotipizzazioneE preferibile usare un sistema di identificazione permanente (microchip o 2 marche) sui capi da esaminareIl prelievo deve essere eseguito sotto il controllo di un veterinario riconosciutoUsare provette con EDTA e farle arrivare al Laboratorio prima possibile (o congelate)Il Genotipo rimane lo stesso per tutta la vita dellanimale

GenotipizzazioneUna genotipizzazione viene riconosciuta ufficialmente se:il sangue prelevato da un veterinario AUSL o riconosciutoIl capo identificato ufficialmenteIl campione inviato al lab accompagnato dallallegato IV del DM 17/12/2004Il lab stato riconosciuto dal Min.Salute

Laboratori che effettuano le genotipizzazioniLaboratorio Gruppi sanguigni di Cremonasolo per allevamenti iscritti a libro genealogico

IZSLER - Sezione di ModenaOvini della Regione Emilia-Romagna

Cos la Genotipizzazione? (cont.)Pu capitare che un ovino gi genotipizzato debba essere ricampionato:Problemi di identificazione dellanimale o del campioneCampione non idoneo per lesame (degradato)Errori nellidentificazione dellanimaleVerifica sul genotipo effettuata per sorveglianza da parte della A.USL Il test del genotipo misura solo la suscettibilit e non se lanimale ha la scrapie

Basi del pianoLa tipizzazione genetica rileva solamente il grado di suscettibilit del soggetto esaminato alla malattia clinica.

Genotipo sensibile # Animale infetto

Dettagli di GeneticaGli ovini hanno un paio di geni che influenzano la suscettibilit alla scrapieQuesti geni sono conosciuti come geni PRNP (PrioN Protein) Ogni ovino ha due copie (un paio) di geni PRNP Una copia da ciascun genitore

Dettagli di Genetica (cont.)Negli ovini, il gene PRNP produce una proteina prionica normale PrPcNegli ovini infetti da scrapie la PrPc viene modificata in: PrPsc, proteina prionica scrapie, la forma patologica e infettiva della proteina prionica

La teoria del prioneLa PrPc esiste in tutti gli animali con piccole differenze di specie

PrPsc produce pi copie di s stessa, provocando una modificazione strutturale della proteina prionica normale.

Dettagli sul Gene PRNPTutti i geni, PRNP compreso, sono composti da codoniCiascun codone dice alla cellula di mettere uno specifico aminoacido in un punto particolare di una proteina che sta costruendoLa proteina prionica PrPc (prodotta dal gene PRNP) ha 254 aminoacidiI punti dei 254 aminoacidi sono numerati da 1 a 254

Geni e Scrapie Nel gene PRNP, tre codoni influenzano la suscettibilit alla scrapieCodone 171Codone 154Codone 136

Codone 141 (141F correlata a infezione con ceppo atipico Nor98)

Genetica & Suscettibilit alla ScrapieCodone 136 - Influenza la suscettibilit negli ovini esposti ad alcuni ceppi di scrapieCodone 154 - Gioca un ruolo minoreCodone 171 - E il maggiore determinante della suscettibilit alla scrapie

Codoni 136 & 171 e i loro polimorfismi Il Codone 136 codifica per laminoacido Valina (V), Alanina (A) o Treonina (T)Il Codone 171 codifica per laminoacido Glutamina (Q), Arginina (R), Istidina (H), o Lisina (K):Si considera che Q, H, K al 171 abbiano la stessa suscettibilit e vengono refertati come Q dalla maggior parte dei laboratori

Come si scrivono i GenotipiI genotipi ovini possono essere scritti in due modi:Lettere degli aminoacidi: ARQ/ARR, ARR/VRQ, etc. (lordine delle lettere quello numerico dei codon 136, 154 e 171), oppure Il numero del Codone seguito dall amino acido corrispondente: 171QR, 171RR, etc.

Geni Ovini: Uno da ciascun genitoreOgni genitore d una copia del gene allagnello. Il gene in genere uno di questi tre: ARQ (wt), VRQ, ARR, Quindi, ogni agnello porta due copie del gene. Le combinazioni possibili sono: ARQ/ARQ, ARR/ARQ, ARR/ARR, ARQ/VRQ, ARR/VRQ, VRQ/VRQ.I genotipi rari AHQ, ARH, ARK, TRQ, ecc. sono considerati equivalenti allARQ.

Combinazioni dei genotipi e suscettibilit alla scrapieARR/ARR - sono resistenti (Classe I)ARR/ARQ - sono semi-resistenti (Classe II)ARQ/ARQ - sono suscettibili (Classe III)ARQ/VRQ - sono molto suscettibili (divieto di impiego come riproduttori)VRQ/VRQ - sono molto suscettibili (divieto di impiego come riproduttori)ARR/VRQ - sono poco suscettibili (divieto di impiego come riproduttori)

Schema di selezioneClassificazione dei riproduttoriLa selezione avviene per linea maschile;per accelerare la selezione possono essere testate anche le femmine (gruppi di monta).

Foglio1

Classe RiproduttoriGenotipiNote

1 ClasseARR/ARRGenotipo resistente

2 ClasseARR/ARQ ARR/AHQ ARR/ARHGenotipo semi-resistente

3 ClasseARQ/ARQ ARQ/AHQ ARQ/ARH ARH/AHQ AHQ/AHQ ARH/ARHGenotipi sensibili o rari

Divieto d'impiegoVRQ/ARQ VRQ/AHQ VRQ/ARH ARR/VRQ VRQ/VRQPortatori allele VRQ

Foglio2

Foglio3

La ricerca ha dimostrato che:Tutte le placente 171QR di pecore infette 171QQ esami-nate sono risultate negative per scrapie, mentre le placente 171QQ di pecore infette 171QQ sono risultate positive.Pertanto, le placente ed i liquidi fetali 171QR di pecore infette non dovrebbero essere in grado di trasmettere la scrapie alle altre pecore suscettibili.?? la Scrapie si diffonde alle pecore suscettibili (171QQ) e alle capre attraverso il contatto con la placenta ed i liquidi fetali infetti.

Limportanza del genotipo della placenta nella trasmissione della scrapieGli agnelli hanno una combinazione del DNA della pecora e del montone; una pecora 171QQ accoppiata ad un montone 171RR produrr un agnello 171QR con fluidi e placenta 171QR. una pecora 171QQ accoppiata ad un montone 171QQ produrr un agnello 171QQ con fluidi e placenta 171QQ.

Come lallevatore pu usare la Geno-tipizzazione per prevenire la ScrapieSelezionando montoni resistenti (171RR / I Classe) o semi-resistenti (171QR / II Classe)Ogni individuo riceve un gene da ciascun genitore.Montoni resistenti produrranno solamente agnelli resistenti (171RR) o semi-resistenti (171QR).Montoni semi-resistenti (171QR) produrranno agnelli resistenti, semi-resistenti o suscettibili a seconda del genotipo della pecora coperta.

Tabella di suscettibilit degli agnelli

Foglio1

MontonexPecoradAgnello

PecoraxMontoneI ClasseII ClasseIII Classe

I ClassexI Classed100%0%0%

I ClassexII Classed50%50%0%

I ClassexIII Classed0%100%0%

II ClassexII Classed25%50%25%

II ClassexIII Classed0%50%50%

III ClassexIII Classed0%0%100%

Foglio2

Foglio3

Schema di selezioneUtilizzo dei riproduttoriLa Regione, su parere della Commissione, definisce se una razza ha frequenza di ARR superiore al 40%.Montoni di 3 classe:introdotti solo nei primi 5 anni del pianoutilizzabili solo nei primi 7 anni del piano

Foglio1






Classe RiproduttoriRimonta internaRimonta esterna o fecondazione artificiale

Da allevamenti con qualificada allevamenti senza qualifica

1 ClasseAutorizzatoAutorizzatoAutorizzato


3 ClasseAutorizzatoAutorizzatoVietato

Divieto d'impiegoVietatoVietatoVietato

IgnotaVietatoVietatoVietato

4 Vietato Vietato Vietato

Ignota Vietato Vietato Vietato

Foglio2

Foglio3

Come lallevatore pu usare la Geno-tipizzazione per prevenire la Scrapie (cont.)Selezionando pecore resistenti (171RR / I Classe) o semi-resistenti (171QR / II Classe)Una pecora trasmetter i suoi caratteri di resistenza/suscettibilit allo stesso modo del montone, ma solamente al suo agnello. La genotipizzazione delle pecore ha un basso costo/efficacia rispetto a quella del montone.In pratica utile solo per le madri di montoni o quando si vuole accelerare al massimo la selezione (allevamento a rischio; razze a bassa frequenza allele ARR).

Come lallevatore pu usare la Geno-tipizzazione per prevenire la Scrapie (cont.)La Genotipizzazione deve essere considerata come uno strumento non come unico strumento di prevenzioneIl metodo pi efficace per evitare lintroduzione della scrapie quello di non comprare pecoreSe il sistema di allevamento richiede lacquisto di pecore, comprare pecore resistenti (classe I - ARR/ARR) o semi-resistenti (classe II - ARR/***).

Possibili conseguenze della selezione geneticaSelezione di portatori saniComparsa di nuovi ceppiSelezione di animali sensibili allagente della BSE Selezione di animali maggiormente suscettibili ad altre patologieEffetti negativi sulle produzioni

Dal 01/04/05 il piano obbligatorio per gli allevamenti iscritti ai Libri genealogici e per i greggi ad alto merito genetico.Tutti gli altri allevamenti ovini possono aderire volontariamente.Chi va piano ...

Chi va piano ...Piani alternativi sulla base della situazione epidemiologica e delle frequenze alleliche;istituzione di una Commissione di coordinamento.

Compiti della CommissioneLa Commissione deve coordinare le attivit:1. di informazione agli allevatori, e di formazione dei veterinari ufficiali e riconosciuti;2. di identificazione permanente e tipizzazione genetica nelle aziende aderenti al piano;3. di selezione genetica negli allevamenti aderenti al piano;

Compiti della CommissioneLa Commissione deve coordinare le attivit:4. valutare l'andamento del piano e del suo impatto sulla zootecnia (relaz.annuale);5. Revisionare il piano e, in base alle valutazioni di cui al punto precedente, allevoluzione della normativa, delle conoscenze scientifiche sulla malattia e della situazione epidemiologica, proporre eventuali modifiche;

Compiti della CommissioneLa Commissione deve coordinare le attivit:6. rapportarsi con la commissione nazionale di coordinamento e con i diversi enti coinvolti nel piano nazionale;7. decidere, dietro proposta del servizio veterinario dellAUSL competente, se unazienda aderente al piano debba essere esclusa dallo stesso per inadempienza agli obblighi previsti.

Compiti dellallevatoreAllevare e gestire i gruppi di montaIdentificare (ID permanente) tutti i riproduttori ovini e caprini di et >6 mesiSegnalare alla AUSL i capi con sintomi sospetti e i mortiSegnalare alla AUSL le introduzioni Introdurre ed utilizzare solamente montoni di genotipi ammessi dal piano

Compiti dellallevatoreMacellare/castrare i riproduttori dichiarati non idonei nei tempi [30 gg.](indennizzo)Pulizia, disinfezione e raccolta delle placenteMantenere aggiornato il registro di stallaAiutare il Servizio Veterinario A.USL nelle operazioni di verifica del pianoEseguire test del DNA aggiuntivi

Compiti della AUSLIdentificare gli allevamenti aderenti al piano, raccogliere le domande.Effettuare i prelievi per la tipizzazione genetica dei montoni (veterinario riconosciuto).Assegnare le qualifiche sanitarie agli allevamenti aderenti al piano.Eseguire ispezioni semestrali per la verifica dell andamento del piano. Controlli a campione annuali.Predisporre le pratiche per lindennizzo dei riproduttori non idonei macellati

Schema di selezioneQualifica degli allevamentiLa AUSL sulla base della situazione genetica rilevata e sugli esiti delle ispezioni periodiche assegna una qualifica di resistenza allallevamento.

Foglio1






Classe RiproduttoriRimonta internaRimonta esterna o fecondazione artificiale

Da allevamenti con qualificada allevamenti senza qualifica



3 ClasseAutorizzatoAutorizzatoVietato

Divieto d'impiegoVietatoVietatoVietato

IgnotaVietatoVietatoVietato

4 Vietato Vietato Vietato

Ignota Vietato Vietato Vietato

Qualifica nazionaleLivello resistenza Dec.2003/100/CECriteri

Livello ILivello ITutti i capi ARR/ARR

Livello IILivello IITutti i montoni ARR/ARR e i restanti capi ARR/***

Livello IIILivello IITutti i montoni ARR/ARR

Livello IVNon previstoTutti i montoni ARR/***

Livello VNon previstoGreggi aderenti al piano

Foglio2

Foglio3

Costi del pianoIl SSN copre le spese relative alle analisi genetiche effettuate nelle aziende aderenti al piano.Il SSN indennizza (L.218/1988) i riproduttori (portatori dellallele VRQ) delle aziende aderenti al piano macellati ai sensi del piano nazionale (DM 17/12/04).

Sistema informativoPresso il CEA istituita la BDNSG;Presso il CEREV istituita la BD regionale: allevamenti aderenti (copia allegato 2) qualifiche resistenza (elenco al 31 dic.) ovini tipizzati (da laboratori) ...

Genotipi presenti in Emilia-Rom. Periodo gen.2004-feb.2005Nellambito di un progetto di ricerca sono stati tipizzati geneticamente oltre 1.000 ovini della Regione.I soggetti tipizzati appartenevano a 13 razze diverse.Sono stati rilevati 17 genotipi diversi, alcuni dei quali neppure previsti dal piano nazionale (ARK/***).

Genotipi presenti in Emilia-Rom. Periodo gen.2004-feb.2005Frequenze alleliche rilevate per le razze dellER

tab.3 razze ovine


Sarda4344616,77617,22267.8%

Massese11439931,0364.1%


Appenninica291251,2381,3635.4%





Biellese24567277833.1%



Suffolk462531,4951,7486.9%



Texel194130.1%

Totale2021,10924,29725,406100.0%

tab.4 razze capra


Saanen5711912630.7%




Meticcia4019194.6%

Totale1425386411100.0%

tabb.5-6

OVINI



2002209901716184845614

200360252016904270

2004460090314826985

Totale8081102619501101,58119

CAPRINI



2002100510610

200340160350550

20046010490560

Totale1002700013501720



200218485102003000-

200316903502004132330.9%

20041482490200512114.8%


tab.8 Macelli





Totale495203069530801,1454800


Genotipi casi






Totale31305223100.0%




20011Sarda332513832

%6.1%0.0%15.2%39.4%24.2%9.1%6.1%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%

20041Sarda7461590263751721400000000

%21.3%0.0%3.5%50.3%23.1%1.9%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%


199811

19990

20000

200144

2002325

20030

200411

200511


00

00

00

00

00

00

00

00

attiva

passiva

fig1-2










20020.034.734.027.120021090173623585171420020.174.67.54.72002236033010067533362527945130

20030.00.00.00.0200326801002040482020030.442.61.83.920033891616391816771601349994196

20040.031.310.26.6200446109631972754520040.045.00.85.0200418864928201276539528223141


Risultati (dati al 4/11/05)61 domande di adesione pervenute;700 ovini di 64 aziende tipizzati nellanno corrente.Frequenze alleliche in Emilia-Romagna nel 2005Riproduttori classificati in Emilia-Romagna

tab.3 razze ovine


Sarda4344616,77617,22267.8%

Massese11439931,0364.1%


Appenninica291251,2381,3635.4%





Biellese24567277833.1%



Suffolk462531,4951,7486.9%



Texel194130.1%

Totale2021,10924,29725,406100.0%

tab.4 razze capra


Saanen5711912630.7%




Meticcia4019194.6%

Totale1425386411100.0%

tabb.5-6

OVINI



2002209901716184845614

200360252016904270

2004460090314826985

Totale8081102619501101,58119

CAPRINI



2002100510610

200340160350550

20046010490560

Totale1002700013501720



200218485102003000-

200316903502004132330.9%

20041482490200512114.8%


tab.8 Macelli





Totale495203069530801,1454800


Genotipi casi






Totale31305223100.0%




20011Sarda332513832

%6.1%0.0%15.2%39.4%24.2%9.1%6.1%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%

20041Sarda7461590263751721400000000

%21.3%0.0%3.5%50.3%23.1%1.9%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%


199811

19990

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attiva

passiva

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20020.034.734.027.120021090173623585171420020.174.67.54.72002236033010067533362527945130

20030.00.00.00.0200326801002040482020030.442.61.83.920033891616391816771601349994196

20040.031.310.26.6200446109631972754520040.045.00.85.0200418864928201276539528223141


18 mesiAbbattimenti per estinzione focolaiMorti in aziendaTotale


2002100510610

200340160350550

20046010490560

Totale1002700013501720



200218485102003000-

200316903502004132330.9%

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tab.8 Macelli





Totale495203069530801,1454800


Genotipi casi






Totale31305223100.0%




20011Sarda332513832

%6.1%0.0%15.2%39.4%24.2%9.1%6.1%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%

20041Sarda7461590263751721400000000

%21.3%0.0%3.5%50.3%23.1%1.9%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%0.0%


199811

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20020.034.734.027.120021090173623585171420020.174.67.54.72002236033010067533362527945130

20030.00.00.00.0200326801002040482020030.442.61.83.920033891616391816771601349994196

20040.031.310.26.6200446109631972754520040.045.00.85.0200418864928201276539528223141


Punti criticiLa formazione e linformazione di allevatori e veterinari;La motivazione e la collaborazione degli allevatori e delle loro Associazioni;Lidentificazione degli animali;Il ruolo del veterinario aziendale.

Conclusioni 1La scrapie una malattia trasmissibile fortemente influenzata dalla genetica;I genotipi che controllano la suscettibilit e la resistenza alla malattia sono LA cosa pi importante da sapere sul controllo con la genetica della scrapie

Conclusioni 2Alla tipizzazione genetica non consegue una diagnosi di scrapie;Il successo del piano deriver dal numero di adesioni da parte di allevatori motivati;Risultati apprezzabili in tempi medio-lunghi (5-7 anni).

Semen and seminal fluids are not known to carry scrapie. New studies are warranted as new technologies for detecting the scrapie agent (PrPsc) are developed. As scientific information is incomplete, all goats on scrapie infected farms are depopulated.For the benefit of this presentation genotyping is defined as DNA testing. DNA/Genotyping of an individual sheep does not change over time. The genotype (genetic foundation/DNA) the sheep is born with will always be the same. It is advisable to use duplicate ear tags in case the sheep loses one ear tag prior to receiving genotyping results.Test results are less like to be questioned by recipients if the blood is drawn and submitted by an objective third party. The blood needs to be drawn into purple top tubes. Immediately after the blood is drawn the tubes need to be gently rocked back and forth 3 times to prevent the blood from coagulating. Then the tubes need to be placed in a cooler and transferred to a refrigerator. The blood should be shipped in a cooler with ice packs or ice. The lab should receive the sample within 48-72 hours of sample collection. Practically speaking, the blood should be drawn on a Sunday or Monday and shipped by Tuesday via 2nd-day or next day delivery.

Please read and follow each labs sampling and handling instructionsHandling the sample, in general: The blood needs to be drawn into purple top tubes. Immediately after the blood is drawn the tubes need to be gently rocked back and forth 3 times to prevent the blood from coagulating. Then the tubes need to be placed in a cooler and transferred to a refrigerator. The blood should be shipped in a cooler with ice packs or ice. The lab should receive the sample within 48-72 hours of sample collection. Practically speaking, the blood should be drawn on a Sunday or Monday and shipped by Tuesday via 2nd-day or next day delivery.

Why two blood tests? human error could be mislabeling tube at farm, in lab, quality control in lab, or quality of sample submitted. The two samples are taken at 2 different times not in the same visit and sent to 2 different labs. If the results are different a third test is completed.Genotype testing is NOT testing for SCRAPIE infection only for genetic susceptibility.Later in the presentation what genotype of exposed sheep can be sold will be indicated.This slide might be one that is difficult to explain. The intent is to explain that there is only one pair of genes (two copies) that affect scrapie susceptibility. The slide then explains, genetically, the basis of how each sheep receives that gene with one copy coming from each parent.Normal prion protein is all folded the same way. The abnormal prion protein molecule is misfolded from the normal protein. The abnormal prion protein makes more abnormal prion protein by causing the normal prion proteins to be misfolded.

Normal prion protein is species dependent.Amino acids are building blocks of proteins. The DNA is the engineer. The codon is the construction manager. The cell is the laborer and the amino acids are the building blocks. The prion is a functional finished product. If the finished product is not constructed correctly it will not work the way the engineer intended. The PrPsc is what causes subsequent lesions in the brain.The following information is intended to be helpful to the presenter in understanding, if needed, the above slide. It was not intended for the audience. Codons are composed of 3 bases, that in combination instructs the cell which specific amino acid is placed in each particular position. The combination of amino acids creates the specific protein. The PrPc protein in sheep is composed of 254 amino acids.

For a more detailed discussion please refer to the USDA, APHIS, VS scrapie website: http://www.aphis.usda.gov/vs/nahps/scrapie/ click on Genetic Resistance to Scrapie to read the paper entitled The Genetics of Scrapie Susceptibility. While there are 254 codons that build the PRNP gene, only three of these codons are known to affect the scrapie susceptibility. Susceptibility to different strains of scrapie is determined in part by different codons. In the U.S. susceptibility to most strains is determined by codon 171. In the U.K. susceptibility is determined primarily by codon 136. The codon we will concentrate on is 171 since this codon is the primary determinant of susceptibility in U.S. sheep.There have been 3 cases in U.S. flocks where codon 136 has been important in determining susceptibility in those sheep. Codon 154 only provides partial resistance to scrapie and is therefore not used in U.S. regulatory programs.

For the remainder of the presentation sheep that have K or H at codon 171 will be considered the same as sheep that are Q at 171. So, when Q is used it will represent sheep that are Q, K or H at codon 171.

If both parents contribute an AQ gene then the lamb will be AA QQ. If one parent contributes an AR gene and the other contributes an AQ gene then the lamb will be AA QR. If both parents contribute an AR gene then the lamb will be AA RRIf one parent contributes an AQ gene and the other contributes a VQ gene then the lamb will be AV QQIf one parent contributes an AR gene and the other contributes a VQ gene then the lamb will be AV QRIf both parents contribute a VQ gene then the lamb will be VV QQ. The VR gene combination has not been observed in nature. For a more detailed discussion please refer to the USDA, APHIS, VS scrapie website: http://www.aphis.usda.gov/vs/nahps/scrapie/ click on Genetic Resistance to Scrapie to read the paper entitled The Genetics of Scrapie Susceptibility.In anticipation of producers questions, much less susceptible is further explained as follows. A few cases of scrapie have been found in U.S. sheep with the AVQR genotype. These cases are thought to be infected with a strain of scrapie susceptibility determined by codon 136. This recent finding is UNLIKE the vast majority of U.S. scrapie cases which are determined by codon 171.

This will become relevant with the following slide. This is background information for the next slide.This section has a dark green background and is for producers who do not have a known scrapie infection and would like to use genetics to increase resistance in their flock.It is not our goal to rid flocks of all QQ sheep. QQ sheep may have other specific traits that the producer would like to continue.

This slide and the following slide are self-explanatory. They compare the outcomes of using genotyped rams versus ewes. This slide should be preceded by the ram genotype slide. Using genotype testing in a ram is more cost-effective because of the large number of lambs that are affected.

Refer to slide 5 regarding the interaction between susceptible genetics and transmission.If maintaining a closed flock is not practical or has not been done because of flock management style:Reduce the risk of introducing scrapie by purchasing ewes only from fully monitored flocks in the Scrapie Flock Certification program: or by the addition of only 171QR and 171RR ewes(resistant genotypes); orReduce the risk of transmission from undiagnosed ewes in your flock by using 171 RR rams.

Il piano nazionale e regionale di selezione genetica per la resistenza alle TSE ovine

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