Citogenetica e biologia … l astor id HER2...Citogenetica e biologia molecolare dei tumori mammari:...

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Citogenetica e biologia molecolare dei tumori mammari: implicazioni cliniche V. Martin 28 giugno 2011 … la storia di HER2 HER2: Human Epidermal Receptor alias c-erb, ERBB2, HER- 2/neu recettore transmembrana di tipo tirosin-kinasico appartiene alla famiglia dei recettori EGF induce una cascata di segnali responsabili di crescita e proliferazione cellulare il gene che lo codifica mappa in 17q12 HER2 e carcinoma mammario HER2 è deregolato in circa il 25% dei carcinomi mammari (HER2+) marcatore prognostico malattia aggressiva recidive precoci minore tempo di sopravvivenza libero da malattia marcatore predittivo HER2 è il bersaglio di un farmaco biologico HER2 e trastuzumab alias Herceptin, Erceptina anticorpo ricombinante umanizzato agisce identificando HER2 e bloccandolo impedisce la dimerizzazione tra recettori inibisce la cascata di segnali a valle attiva il sistema immunitario si somministra per infusione in vena il trattamento è attuato in day hospital (sei infusioni) trastuzumab e carcinoma mammario approvato nel 2000 per l’uso in pazienti affette da carcinoma avanzato/metastatico HER2+ approvato nel 2006 per l’uso in pazienti affette da tumori HER2+ in stadio precoce sia in monoterapia che in combinazione o dopo chemioterapia standard Vantaggi: riduce il rischio di recidive aumenta le percentuali di risposta aumenta la sopravvivenza libera da malattia migliora la sopravvivenza globale migliora la qualità della vita Effetti collaterali (minori quando usato in monoterapia): problemi cardiaci dolori in sede malattia astenia, anoressia cefalea

Transcript of Citogenetica e biologia … l astor id HER2...Citogenetica e biologia molecolare dei tumori mammari:...

  • Citogenetica e biologia molecolare dei tumori mammari: implicazioni cliniche

    V. Martin28 giugno 2011

    … la storia di HER2

    HER2: Human Epidermal Receptor

    � alias c-erb, ERBB2, HER-2/neu

    � recettore transmembrana di tipo tirosin-kinasico

    � appartiene alla famiglia dei recettori EGF

    � induce una cascata di segnali responsabili di crescita e proliferazione cellulare

    � il gene che lo codifica mappa in 17q12

    HER2 e carcinoma mammario

    � HER2 è deregolato in circa il 25% dei carcinomi mammari (HER2+)

    � marcatore prognostico� malattia aggressiva� recidive precoci� minore tempo di sopravvivenza

    libero da malattia

    � marcatore predittivo� HER2 è il bersaglio di un farmaco biologico

    HER2 e trastuzumab

    � alias Herceptin, Erceptina

    � anticorpo ricombinante umanizzato

    � agisce identificando HER2 e bloccandolo

    � impedisce la dimerizzazione tra recettori

    � inibisce la cascata di segnali a valle

    � attiva il sistema immunitario

    � si somministra per infusione in vena

    � il trattamento è attuato in day hospital

    (sei infusioni)

    trastuzumab e carcinoma mammario

    � approvato nel 2000 per l’uso in pazienti affette da carcinoma avanzato/metastaticoHER2+

    � approvato nel 2006 per l’uso in pazienti affette da tumori HER2+ in stadio precoce� sia in monoterapia che in combinazione o dopo chemioterapia standard

    � Vantaggi:� riduce il rischio di recidive� aumenta le percentuali di risposta� aumenta la sopravvivenza libera da malattia� migliora la sopravvivenza globale� migliora la qualità della vita

    � Effetti collaterali (minori quando usato in monoterapia):� problemi cardiaci� dolori in sede malattia� astenia, anoressia� cefalea

  • analisi di HER2

    � ANALISI DELLA PROTEINA → IHC

    � ANALISI DEL GENE → FISH

    HER2 IHC

    clone CB11 (Biosystems, Novocastra)

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    HER2 IHC

    VANTAGGI

    � facile da eseguire� veloce� interpretazione veloce al microscopio� correlazione con la morfologia� costa poco� buona correlazione con risposta a

    Herceptin

    SVANTAGGI

    � numerosi anticorpi con sensibilità e specificità differenti

    � risultato dipende da fattori preanalitici� interpretazione soggettiva con zona

    grigia (score 2+)

    HER2 FISH

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    interpretazione FISH

    R =numero di geni (segnali rossi)

    numero di cromosomi (segnali verdi)

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    HER2 FISH

    VANTAGGI

    � molto specifica� valutazione standardizzata� valore soglia definito� poco influenzata da fattori preanalitici� buona correlazione con risposta a

    Herceptin

    SVANTAGGI

    � non disponibile in tutti i laboratori� tecnicamente difficile� necessita di tempo� valutazione con microscopio a

    fluorescenza� cara

    correlazione gene-proteina

    � L’amplificazione genica di HER2 è

    strettamente correlata

    all’overespressione proteica

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    selezione pazienti

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    controllo di qualità - CQ

    � standardizzazione delle procedure� standardizzazione dei criteri di lettura� accuratezza e riproducibilità

    CQ esterni – UKNEQAS

    � IHC- colorazione e autovalutazione

    campione inviato dal NEQAS- colorazione e autovalutazione

    campione ICP- invio di entrambi i campioni e delle

    valutazioni al NEQAS- giudizio

    � FISH- linee cellulari (non sezioni istologiche!) - Il vetrino non viene rispedito al

    NEQAS x controllo metodo- viene assegnata una valutazione

    (punteggio da 1 a 3) sulla base del valore di R

    - es..

  • CQ interni - ICP

    � dal 2004-2010� costruzione mensile di array di tessuto

    � correlazione FISH e IHC

    realizzazione TMA

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    la nostra esperienza

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    risultati HER2 IHC

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    total

    IHC

    control series

    risultati HER2 FISH

    558 77% 13 2% 153 21% 724 100%total

    FISHnot amplified borderline amplified

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    70%

    80%

    90%

    non amplificato borderline amplificato

  • confronto IHC - FISH

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    total

    IHC

    FISHcontrol series not amplified borderline amplified

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    confronto IHC - FISH

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    total

    IHC

    FISHcontrol series not amplified borderline amplified

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    verifica delle discrepanze

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    score 0 score 1+ score 2+ score 3+

    controllo diagnosi

    IHC controllo diagnosiscore 0 1% 0%score 1+ 13% 10%score 2+ 25% 25%score 3+ 98% 100%

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    evidenza importante

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    selezione pazienti in TICINO

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    take home message

    � L’uso di controlli di qualità interni per l’analisi di HER2 ha permesso di:� selezionare con accuratezza e riproducibilità le pazienti� disegnare un algoritmo ottimizzato sulla nostra realtà� individuare nuove pazienti che possono beneficiare di trattamenti con

    trastuzumab