Download - Citogenetica e biologia … l astor id HER2...Citogenetica e biologia molecolare dei tumori mammari: implicazioni cliniche V. Martin 28 giugno 2011 … l astor id HER2 HER2: Human

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  • Citogenetica e biologia molecolare dei tumori mammari: implicazioni cliniche

    V. Martin28 giugno 2011

    … la storia di HER2

    HER2: Human Epidermal Receptor

    � alias c-erb, ERBB2, HER-2/neu

    � recettore transmembrana di tipo tirosin-kinasico

    � appartiene alla famiglia dei recettori EGF

    � induce una cascata di segnali responsabili di crescita e proliferazione cellulare

    � il gene che lo codifica mappa in 17q12

    HER2 e carcinoma mammario

    � HER2 è deregolato in circa il 25% dei carcinomi mammari (HER2+)

    � marcatore prognostico� malattia aggressiva� recidive precoci� minore tempo di sopravvivenza

    libero da malattia

    � marcatore predittivo� HER2 è il bersaglio di un farmaco biologico

    HER2 e trastuzumab

    � alias Herceptin, Erceptina

    � anticorpo ricombinante umanizzato

    � agisce identificando HER2 e bloccandolo

    � impedisce la dimerizzazione tra recettori

    � inibisce la cascata di segnali a valle

    � attiva il sistema immunitario

    � si somministra per infusione in vena

    � il trattamento è attuato in day hospital

    (sei infusioni)

    trastuzumab e carcinoma mammario

    � approvato nel 2000 per l’uso in pazienti affette da carcinoma avanzato/metastaticoHER2+

    � approvato nel 2006 per l’uso in pazienti affette da tumori HER2+ in stadio precoce� sia in monoterapia che in combinazione o dopo chemioterapia standard

    � Vantaggi:� riduce il rischio di recidive� aumenta le percentuali di risposta� aumenta la sopravvivenza libera da malattia� migliora la sopravvivenza globale� migliora la qualità della vita

    � Effetti collaterali (minori quando usato in monoterapia):� problemi cardiaci� dolori in sede malattia� astenia, anoressia� cefalea

  • analisi di HER2

    � ANALISI DELLA PROTEINA → IHC

    � ANALISI DEL GENE → FISH

    HER2 IHC

    clone CB11 (Biosystems, Novocastra)

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    HER2 IHC

    VANTAGGI

    � facile da eseguire� veloce� interpretazione veloce al microscopio� correlazione con la morfologia� costa poco� buona correlazione con risposta a

    Herceptin

    SVANTAGGI

    � numerosi anticorpi con sensibilità e specificità differenti

    � risultato dipende da fattori preanalitici� interpretazione soggettiva con zona

    grigia (score 2+)

    HER2 FISH

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    interpretazione FISH

    R =numero di geni (segnali rossi)

    numero di cromosomi (segnali verdi)

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    HER2 FISH

    VANTAGGI

    � molto specifica� valutazione standardizzata� valore soglia definito� poco influenzata da fattori preanalitici� buona correlazione con risposta a

    Herceptin

    SVANTAGGI

    � non disponibile in tutti i laboratori� tecnicamente difficile� necessita di tempo� valutazione con microscopio a

    fluorescenza� cara

    correlazione gene-proteina

    � L’amplificazione genica di HER2 è

    strettamente correlata

    all’overespressione proteica

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    selezione pazienti

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    controllo di qualità - CQ

    � standardizzazione delle procedure� standardizzazione dei criteri di lettura� accuratezza e riproducibilità

    CQ esterni – UKNEQAS

    � IHC- colorazione e autovalutazione

    campione inviato dal NEQAS- colorazione e autovalutazione

    campione ICP- invio di entrambi i campioni e delle

    valutazioni al NEQAS- giudizio

    � FISH- linee cellulari (non sezioni istologiche!) - Il vetrino non viene rispedito al

    NEQAS x controllo metodo- viene assegnata una valutazione

    (punteggio da 1 a 3) sulla base del valore di R

    - es..

  • CQ interni - ICP

    � dal 2004-2010� costruzione mensile di array di tessuto

    � correlazione FISH e IHC

    realizzazione TMA

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    la nostra esperienza

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    risultati HER2 IHC

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    total

    IHC

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    risultati HER2 FISH

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    FISHnot amplified borderline amplified

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    80%

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    non amplificato borderline amplificato

  • confronto IHC - FISH

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    verifica delle discrepanze

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    score 0 score 1+ score 2+ score 3+

    controllo diagnosi

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    evidenza importante

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    selezione pazienti in TICINO

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    take home message

    � L’uso di controlli di qualità interni per l’analisi di HER2 ha permesso di:� selezionare con accuratezza e riproducibilità le pazienti� disegnare un algoritmo ottimizzato sulla nostra realtà� individuare nuove pazienti che possono beneficiare di trattamenti con

    trastuzumab