Diapositiva 1

CINETICA ENZIMATICA

2 k1 k2 E +S ES P + E k-1

d[P]V = = k2 [ES] dt

d[ES] = k1 [E][S] k-1 [ES] - k2 [ES] dt

k1 [E][S] KS = = k-1 [ES]

Ipotesi dellequilibrio:k-1 molto maggiore di k2:la prima tappa raggiunge lequilibrioKsEquazione di Michaelis-MentenMa, [ES] non sperimentalmente misurabile; quindi bisogna esprimere la conc. di questa specie in funzione di specie misurabili.

E necessario introdurre alcune semplificazioni3d[ES] = 0 dt

[E]T = [E] + [ES]

k1 [E][S] = k-1 [ES] + k2 [ES]

[E] = [E]T -[ES]

([E]T -[ES] [S] (k-1 + k2) = [ES] k1KM Costante di Michaelis-MentenKM [ES] = ([E]T -[ES] [S]

[E]T [S] [ES] = KM + [S]

d[P] k2 [E]T [S]V0 = () t=0 =k2 [ES] = dt KM + [S]

vmax = k2[E]T

(per elevate conc. di substrato, molto superiori rispetto a quelle dellenzima) Ipotesi dello stato stazionario. Il complesso [ES] costantemente formato e scisso: la velocit della sua sintesi equivalente a quella del suo consumo.d[ES] = k1 [E][S] k-1 [ES] - k2 [ES] dt4 vmax [S]V0 = ----------- KM + [S]1 KM 1 1------ = (------) ------ + -----V0 vmax [S] vmax d[P] k2 [E]T [S]V0 = () t=0 =k2 [ES] = dt KM + [S]

vmax = k2[E]T

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6Per basse concentrazioni di substrato: [S]