fecondazione

ØÈ il processo biologico mediante il quale lo spermatozoo e l’oocito interagiscono per dare luogo alla riproduzione sessualeØInizia quando gli spermatozoi vengono deposti nelle vie genitali femminili e termina quando l’oocito avvia i processi di attivazione

fasi che precedono la fecondazione: nelle vie genitali maschili

• gli spermatozoi, dopo la spermatogenesi, non sono ancora in grado di determinare la fecondazione

• durante il passaggio nelle vie genitali maschili (epididimo) acquisiscono la motilità

• la motilità degli spermatozoi viene favorita dalle sostanze (zuccheri, lipidi, proteine, ioni, ormoni) contenute nel liquido seminale e prodotte dalle ghiandole annesse alle vie genitali maschili

• gli spermatozoi e il liquido seminale costituiscono lo sperma (20 milioni di spermatozoi per ml)

fasi che precedono la fecondazione: nelle vie genitali femminili

• una volta deposti nella vagina gli spermatozoi percorrono (canale vaginale, utero, tuba) circa 20 cm per raggiungere l’oocito nella zona ampollare

• sono attratti verso la cellula uovo da sostanze chimiche (chemotassi) e da un gradiente termico (termotassi)

• nelle vie genitali femminili gli spermatozoi acquisiscono la capacità di fecondare la cellula uovo: capacitazione

= aumento dei recettori di membrana per membrana pellucida e per membrana dell’oocita

= aumento dell’attività di movimento

interazioni spermatozoo-oocito• in prossimità della cellula uovo

giungono alcune centinaia di spermatozoi , ma solo uno entrerà nella cellula uovo

• lo spermatozoo deve attraversare le cellule del cumulo ooforo (alcune migliaia) e la matrice dove abbonda acido ialuronico

• l’attraversamento avviene mediante la spinta dovuta al movimento della coda e grazie alla ialorunidasi che digerisce l’acido ialuronico

interazioni spermatozoo-oocito

• lo spermatozoo si lega alla membrana pellucida e ha luogo la reazione acrosomiale :– Fusione membrana acrosomiale esterna con membrana cellulare– Rilascio degli enzimi e apertura di un varco nella membrana pellucida

interazioni spermatozoo-oocito

•gli enzimi digeriscono localmente le glicoproteinedella membrana pellucida•si apre un passaggio nella m.p.e lo spermatozoo aderisce tangenzialmente ai microvilli dell’oocito•le membrane si fondono e lo spermatozoo cessa di muoversi

l’interazione tra membrana dello spermatozoo e:– membrana pellucida- avviene grazie a legami tra molecole di

adesione espresse dallo spermatozoo (Zona Adesine) e oligosaccaridi (glicoproteine ZP1, ZP2 e ZP3)

– membrana dell’oocita-avviene grazie a legami tra molecole dello spermatozoo (fertilina o PH-30, izumo) e molecole di adesione della membrana dell’oocito (integrina a6b1,CD9=tetraspanine)

meccanismo di attivazione dell’oocito• la reazione della membrana pellucida si

estende• l’attivazione è legata all’aumento del Ca++

nel citoplasma dell’oocito• il rilascio del Ca++ sarebbe dovuto a una

fosfolipasi che genera IP3 (inositide trifosfato) fattore che causa apertura dei canali del CA++

modificazioni dell’oocito e dello spermatozoo• la membrana dell’oocita si solleva e ingloba lo spermatozoo• nucleo e un centriolo sono accolti nella cellula uovo• i mitocondri dello spermatozoo sono eliminati• si verifica attivazione dell’oocita e conseguente reazione

corticale (esocitosi granuli corticali) • la membrana pellucida si modifica: – i granuli corticali contengono enzimi che rompono le

connessioni tra l'uovo e la zona pellucida – i recettori per gli spermatozoi vengono rimossi dalla

superficie dell'uovo– sostanze contenute nei granuli corticali fanno entrare acqua

per osmosi al di sotto della zona pellucida – la membrana pellucida si stacca dalla membrana plasmatica

e si indurisce, impedendo l'ingresso di altri spermatozoi (polispermia)

altre conseguenze dell’attivazione dell’oocito•attivazione di MPF dovuta ad aumento di Ca++•completamento della meiosi II•emissione del secondo globulo polare (e del terzo)•decondensazione della cromatina •formazione dei due pronuclei, maschile e femminile•Duplicazione del DNA e messa in posizione dei cromosomi paterni e materni •dissoluzione membrane dei pronuclei•inizio della prima divisione mitotica

tecniche di fecondazione assistita

tecniche di fecondazione assistita