RICERCA DI INIBENTI NEL LATTE VACCINO 6°Ring Test Specialistico Novembre 2009 Continanza...

RICERICERRCA DI INIBENTI NEL CA DI INIBENTI NEL LATTE VACCINOLATTE VACCINO

6°Ring Test Specialistico Novembre 2009

Continanza R.,Castellano L.

10° Meeting AIA-LSL Montegrotto Terme (PD)

Associazione Italiana Allevatori

Laboratorio Standard Latte

Ricerca degli inibenti nel latteRicerca degli inibenti nel latte 20002000 Il “Laboratorio Standard Latte” inizia Il “Laboratorio Standard Latte” inizia a produrre campioni di Latte Vaccino a produrre campioni di Latte Vaccino Liofilizzato contenenti ANTIBIOTICI Liofilizzato contenenti ANTIBIOTICI inseriti nel Ring Test “Routine”inseriti nel Ring Test “Routine”

NOVEMBRE 2002 Il LSL organizza il 1° RING TEST NOVEMBRE 2002 Il LSL organizza il 1° RING TEST SPECIALISTICO per la ricerca degli Inibenti nel SPECIALISTICO per la ricerca degli Inibenti nel latte vaccinolatte vaccino

MAGGIO 2003MAGGIO 2003 2° RING TEST SPECIALISTICO2° RING TEST SPECIALISTICO

SETTEMBRE 2004SETTEMBRE 2004 3° RING TEST SPECIALISTICO3° RING TEST SPECIALISTICO

GIUGNO 2005GIUGNO 2005 4° RING TEST SPECIALISTICO4° RING TEST SPECIALISTICO

MAGGIO 2007MAGGIO 2007 5° RING TEST SPECIALISTICO5° RING TEST SPECIALISTICO

NOVEMBRE 2009NOVEMBRE 2009 6° RING TEST SPECIALISTICO6° RING TEST SPECIALISTICO

Ricerca Inibenti nel latte vaccino10° Meeting AIA-LSL

Perché partecipare ?Perché partecipare ?


Valutare le performance analitiche dei singoli partecipanti in Valutare le performance analitiche dei singoli partecipanti in un contesto più ampio sia di campioni, sia di antibiotici.un contesto più ampio sia di campioni, sia di antibiotici.

Confrontare le performance di diversi kit disponibili in Confrontare le performance di diversi kit disponibili in commercio per la ricerca di inibenti nel latte.commercio per la ricerca di inibenti nel latte.

RT RT SpecialisticoSpecialistico

LaboratoriLaboratori

Valutare le performance analitiche dei propri prodotti in un Valutare le performance analitiche dei propri prodotti in un ampio contesto di operatori del settore.ampio contesto di operatori del settore.

ProduttoriProduttori

Organizzazione del Ring TestOrganizzazione del Ring Test

Progettazione Progettazione Invito ai clienti Invito ai clienti Raccolta delle adesioniRaccolta delle adesioni AllestimentoAllestimento Elaborazione datiElaborazione dati Comunicazione risultati ai partecipantiComunicazione risultati ai partecipanti


6° RT Specialistico6° RT Specialistico

Nell’ambito della nostra abituale Nell’ambito della nostra abituale programmazione dei “RT Specialistici” la programmazione dei “RT Specialistici” la ditta ditta Charm Sciences,IncCharm Sciences,Inc si è resa si è resa disponibile a fornire gratuitamente ai disponibile a fornire gratuitamente ai Laboratori partecipanti un loro kit di nuova Laboratori partecipanti un loro kit di nuova produzione.produzione.

LSL essendo un organizzazione”Super LSL essendo un organizzazione”Super Partes” ha informato dell’evento le altre Partes” ha informato dell’evento le altre ditte produttrici di kit analoghi invitandole a ditte produttrici di kit analoghi invitandole a mettere a disposizione i loro prodotti.mettere a disposizione i loro prodotti.

Ha aderito all’invito,nei tempi prestabiliti, Ha aderito all’invito,nei tempi prestabiliti, solo la ditta solo la ditta DSM.DSM.


Progettazione-scelta degli Progettazione-scelta degli InibentiInibenti--LATTAMICILATTAMICI AmoxicillinAmoxicillin

CeftiofurCeftiofur

SULFAMIDICISULFAMIDICI SulfadiazineSulfadiazine

TETRACICLINETETRACICLINE OxytetracyclineOxytetracycline

AMINOGLICOSIDIAMINOGLICOSIDI NeomycinNeomycin


Progettazione del Ring TestProgettazione del Ring Test

MOLECOLE UTILIZZATEMOLECOLE UTILIZZATE: 5 diversi Antibiotici: 5 diversi Antibiotici

CAMPIONI DI LATTECAMPIONI DI LATTE: 6 campioni di latte vaccino: 6 campioni di latte vaccino

KITKIT : :

- Cow Side II Test - Charm Sciences,Inc (inviato - Cow Side II Test - Charm Sciences,Inc (inviato da LSL)da LSL)

- Delvotest SP 5 Pack-NT – DSM (inviato da LSL)- Delvotest SP 5 Pack-NT – DSM (inviato da LSL)

- kit in uso presso i singoli partecipanti- kit in uso presso i singoli partecipanti


Progettazione-campioni Progettazione-campioni

Preparazione di 5 campioni con Preparazione di 5 campioni con concentrazione di antibiotico prossimo concentrazione di antibiotico prossimo al MRLal MRL

Preparazione di 1 campione di Preparazione di 1 campione di controllo con una concentrazione di controllo con una concentrazione di antibiotico circa 10 MRLantibiotico circa 10 MRL

Diversamente dai precedenti non è Diversamente dai precedenti non è stato inserito nel set di campioni del stato inserito nel set di campioni del RT un campione NEGATIVORT un campione NEGATIVO

Preparazione dei campioniPreparazione dei campioni

Latte scremato UHT addizionato con quantità note di Latte scremato UHT addizionato con quantità note di antibiotico tali da raggiungere i rispettivi livelli MRL antibiotico tali da raggiungere i rispettivi livelli MRL (Limite di Residuo Massimo)(Limite di Residuo Massimo)

Amoxicillin Amoxicillin MRL 4 ppbMRL 4 ppb CeftiofurCeftiofur MRL 100 ppbMRL 100 ppb SulfadiazineSulfadiazine MRL 100 ppbMRL 100 ppb OxytetracyclineOxytetracycline MRL 100 ppbMRL 100 ppb NeomycinNeomycin MRL 500 ppbMRL 500 ppb

Campione di controllo Positivo (Campione di controllo Positivo (lattamico ~10 MRL)lattamico ~10 MRL)


Distribuzione di 5 ml di latte in provette da 10 mlDistribuzione di 5 ml di latte in provette da 10 ml Prove di omogeneità del campione (10%)Prove di omogeneità del campione (10%)

Liofilizzazione Liofilizzazione Test di conformità del prodotto finitoTest di conformità del prodotto finito Test finale di stabilità 27/11/2009Test finale di stabilità 27/11/2009

Preparazione dei campioniPreparazione dei campioni


CAMPIONE CHARM COW SIDE II TEST

DELVOTEST SP5 PACK-NT

SULFADIAZINA + +

AMOXICILLINA + +

OXITETRACICLINA + -

NEOMICIN + +

CEFTIOFUR + +

BETA LATTAMICO + +

Spedizione campioni e Raccolta datiSpedizione campioni e Raccolta dati Protocollo operativoProtocollo operativoMateriali:Materiali:

Campioni Di Latte Liofilizzato; Campioni Di Latte Liofilizzato;

1 Kit Charm Cow Side Ii Con Relative Istruzioni; 1 Kit Charm Cow Side Ii Con Relative Istruzioni; 1 Kit Delvotest Sp5 Pack-nt Con Relative Istruzioni.1 Kit Delvotest Sp5 Pack-nt Con Relative Istruzioni.

Modalita’ Operative:Modalita’ Operative: Ricostituire Tutti I Campioni Con 4,5 G ± 0,1 G Di Acqua Deionizzata Agitando Vigorosamente Fino A Completa Dispersione Del Ricostituire Tutti I Campioni Con 4,5 G ± 0,1 G Di Acqua Deionizzata Agitando Vigorosamente Fino A Completa Dispersione Del Liofilizzato.Liofilizzato.Eseguire Le Analisi Utilizzando I Due Kit Da Noi Forniti Oltre Al Kit Normalmente Usato Nel Proprio Laboratorio.Eseguire Le Analisi Utilizzando I Due Kit Da Noi Forniti Oltre Al Kit Normalmente Usato Nel Proprio Laboratorio.Riportare I Risultati Nella Tabella Allegata Ed Inviarli Al Laboratorio Standard Latte Tramite Fax Entro Il Giorno Riportare I Risultati Nella Tabella Allegata Ed Inviarli Al Laboratorio Standard Latte Tramite Fax Entro Il Giorno 26-11-200926-11-2009 I Campioni Vanno Conservati A 4°c ± 2 °C Fino Al Momento Dell’uso.I Campioni Vanno Conservati A 4°c ± 2 °C Fino Al Momento Dell’uso.

ESPRIMERE I RISULTATI UTILIZZANDO LA SEGUENTE LEGENDA:ESPRIMERE I RISULTATI UTILIZZANDO LA SEGUENTE LEGENDA:

+ = POSITIVO+ = POSITIVO - - = NEGATIVO +/- = DUBBIO, PREVALENTE POSITIVO -/+ = DUBBIO, PREVALANTE NEGATIVO= NEGATIVO +/- = DUBBIO, PREVALENTE POSITIVO -/+ = DUBBIO, PREVALANTE NEGATIVO

Assemblaggio dei campioni e dei 2 kit e spedizione il Assemblaggio dei campioni e dei 2 kit e spedizione il 17 Novembre 200917 Novembre 2009


Campioni CHARM COW SIDE II DELVO TEST SP5 PACK-NT

METODO IN USO

1

2

3

4

5

6

Laboratori partecipantiLaboratori partecipanti

LABORATORI LABORATORI

PARTECIPANTI PARTECIPANTI n° 70n° 70

RISULTATI ALRISULTATI AL

30 novembre 2009 30 novembre 2009 n° 62n° 62


RisultatiRisultati


A = CHARM

B = DELVO SP5 PACK-NT

C = KIT IN USO (45 LAB. - DELVOTEST ; 7 LAB. - COPAN TEST ; 5 LAB - ECLIPSE)

+ - +/ - -/ + + - +/ - -/ + + - +/ - -/ +

1 SULF 25% 33% 38% 3% 9% 54% 18% 19% 27% 49% 15% 9%

2 AMOX 95% 3% 2% 0% 91% 4% 5% 0% 98% 2% 0% 0%

3 OXIT 27% 27% 35% 12% 7% 79% 4% 11% 5% 82% 0% 13%

4 NEO 83% 10% 7% 0% 16% 33% 32% 19% 33% 27% 24% 16%

5 CEFT 91% 5% 2% 2% 75% 5% 20% 0% 73% 7% 18% 2%

6 CTRL + 93% 5% 2% 0% 96% 2% 2% 0% 96% 4% 0% 0%

CA B

RisultatiRisultati


0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

A B C A B C A B C

+ +/ - -/ + -

Amoxicillina Ceftiofur Ctrl +

A - Cow Side II

B - Delvotest

C - Metodo in uso

RisultatiRisultati


0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

A B C A B C A B C

+ +/ - -/ + -

Sulfadiazina Oxitetraciclina Neomicina

A - Cow Side II

B - Delvotest

C - Metodo in uso

Considerazioni finali Considerazioni finali

L’analisi approfondita dei risultati sarà effettuataL’analisi approfondita dei risultati sarà effettuatadopo la completa elaborazione dei risultati e la dopo la completa elaborazione dei risultati e la preparazione e invio del Report.preparazione e invio del Report.

Dalla “lettura” dei moduli contenenti i risultati siDalla “lettura” dei moduli contenenti i risultati sisi può ipotizzare che in alcuni laboratori non ci si può ipotizzare che in alcuni laboratori non ci sia un uso sistematico, ad ogni sessione di sia un uso sistematico, ad ogni sessione di lavoro, dei campioni di controllo POSITIVO e lavoro, dei campioni di controllo POSITIVO e NEGATIVO.NEGATIVO.

L’assenza del campione sicuramente negativo, L’assenza del campione sicuramente negativo, contrariamente a quanto atteso dai laboratori, contrariamente a quanto atteso dai laboratori, ha aumentato la percentuale di risultati errati ha aumentato la percentuale di risultati errati rispetto ai precedenti RT specialistici.rispetto ai precedenti RT specialistici.


GRAZIE PER LA VOSTRA GRAZIE PER LA VOSTRA ATTENZIONE ATTENZIONE


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