PROGETTO DI UNIFORMAZIONE DELLA CURVA PROGETTO DI UNIFORMAZIONE DELLA CURVA DI CONVERSIONE DEL BACTOSCAN FC DI CONVERSIONE DEL BACTOSCAN FC

PER IL LATTE OVINO: RISULTATI PRELIMINARIPER IL LATTE OVINO: RISULTATI PRELIMINARI

Montegrotto Terme 3-4 Dicembre 2009 Gilberto Giangolini

-ISTITUTO ZOOPROFILATTICO SPERIMENTALE DELLE REGIONI LAZIO E TOSCANA-CENTRO NAZIONALE DI REFERENZA PER LA QUALITA’ DEL LATTE E DEI PRODOTTI DERIVATI DEGLI OVINI E DEI CAPRINI (CRELDOC)

A.I.A. Laboratorio Standard Latte

X Meeting di aggiornamento per responsabili e tecnici di laboratorio del settore lattiero caseario

Partecipanti

Istituto Zooprofilattico Lazio e Toscana – Lab. Roma

Istituto Zooprofilattico Lazio e Toscana – Lab. Grosseto

Istituto Zooprofilattico Sicilia – Lab. Palermo

Istituto Zooprofilattico Sardegna – Lab. Sassari

Istituto Zooprofilattico Umbria e Marche – Lab. Perugia

Il lavoro è iniziato ad ottobre 2008 e proseguirà fino a marzo 2010

I risultati esposti derivano da campioni di 3 laboratori

NORME DI RIFERIMENTO

ISO 4833: 2003 Horizontal method for the enumeration of microorganisms - Colony-count technique at 30 degrees C

ISO 16140:2003 Microbiology of food and animal feeding stuffs – Protocol for the validation of alternative methods

ISO 21187:2004 Milk – Quantitative determination of bacteriological quality --Guidance for establishing and verifying a conversion relationship between routine method results and anchor method results

NORME DI RIFERIMENTO

ISO 21187:2004 Milk – Quantitative determination of bacteriological quality --Guidance for establishing and verifying a conversion relationship between routine method results and anchor method results

- Prevede anche una organizzazione dove ambedue i metodi siano eseguiti in laboratori diversi

- Stabilisce il numero dei campioni di prova necessari

il loro numero deve essere sufficiente per considerare i fattori che determinano variabilità : la diversa composizione batterica, l’origine geografica, la distribuzione durante l’anno, l’esecuzione da parte di differenti laboratori.

- Range dei campioni: i livelli devono essere all’interno dei valori necessari per coprire il range di interesse del metodo di routine

- Lavorare con campioni di prova naturali

- Evitare l’uso di sub campioni

LATTE DI PECORA

ALTA PERCENTUALE DI GRASSO e PROTEINE

NUMERO ELEVATO DI CELLULE SOMATICHE

LIMITE DI LEGGE C.B.T. 1.500.000 ufc/ml

LIMITE DI LEGGE C.B.T. 500.000 ufc/ml (per la produzione di formaggi a latte crudo)

LATTE DI PIU’ MUNGITURE

SITUAZIONE ATTUALE

REGRESSIONE ELABORATA DALL’ ISTITUTO ZOOTECNICO E CASEARIO PER LA SARDEGNA – Bonassai (Sassari)

(Lavoro eseguito nel 1999)

Log UFC/ml = 1,25 * log impulsi BFC – 1,96

Sy/x = 0.32

R2 = 85,6

N° Campioni = 219

CBT metodo di riferimento = FIL-IDF 100B:1991

Diluizioni effettuate utilizzando 10ml di latte e 90ml di soluzione salina-peptone per cercare di aumentare la precisione e l’accuratezza.

Classi campioni: <100.000 – 30%

100.000-1.000.000 – 42%

1.000.000 – 10.000.000 – 23%

>10.000.000 – 5%

•Campioni esaminati senza riscaldamento e senza conservante

•Prove eseguite entro 24 ore dal prelievo

•Scelta dei campioni mediante BFC e successiva determinazione con i due metodi

•Prove eseguite in doppio, mediati i valori, trasformazione in logaritmo

PUNTI PRINCIPALI DEL PROTOCOLLO DI LAVORO

Distribuzioni in classi di ufc/ml dei campioni di latte ovino analizzati

<100 ufc/mlx1000

40%

500-1000 ufc/mlx1000

8%

>1.000 ufc/mlx1000

16%

100-500 ufc/mlx1000

36%Campioni = 214

Campioni = 214 R2 = 0.76 Intercetta (Err.Std.)= 0.1194

r = 0.87 Sy/x = 0.37 Slope (Err.Std.)= 0.0409

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

4,5

5

0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5

Log CBT = 1,0557 * log BFC – 0,8512

log BFC

log UFC

RETTA DI REGRESSIONE

log BFC

-1,5

-1

-0,5

0

0,5

1

1,5

0 50 100 150 200 250

RESIDUI DELLA REGRESSIONE

DISTRIBUZIONE IN CLASSI DI CELLULLE SOMATICHE DEI CAMPIONI DI LATTE DI PECORA

CELLULE SOMATICHE/ml x 1000 PERCENTUALE CAMPIONI

<500 15,2 %

500 – 1.000 24,2 %

1.000- 1.500 27,5 %

1.500 – 2.000 16,9 %

> 2.000 16,3 %

CONFRONTO DELLA RETTA COMUNE CON LA RETTA ELABORATA DA IST. ZOOT. CAS. SARDEGNA

UFC/ml

Impulsi

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

10 50 100 200 300 500 1000 1500 2000 3000 4000 5000

IZCS

Comune

RISULTATORISULTATO

Temperatura del campione(% elevata di grasso)

Performance operatore(in particolare CBT metodo di

riferimento)

Tipologia microrganismi presenti

(formazione della colonia, lettura del Bactoscan FC )

Numero batteri

ELEMENTI DA CONSIDERARE

Cellule somatiche

RING TEST

LA CONVERSIONE UNICA PUO’ AIUTARE?

Stesse condizioni rispetto all’ente di accreditamento

Per chi volesse contribuire al lavoro

Contatti

Gilberto Giangolini

gilberto.giangolini@izslt.it

Simonetta Amatiste

simonetta.amatiste@izslt.it