Fisiologia del Sangue

Eritrociti o globuli rossi Funzioni – trasporto O2 e CO2

Eritrociti nel sangue

Genesi degli eritrociti

Fetale –sacco vitellino- fegato Adulto- midollo osseo

Stem cells- Precursori eritrociti Proeritroblasto- eritroblasto basofilo- reticolocita – eritrocita maturo

Regolazione ematopoiesi –

Eritropoietina O2 Kidneys 90%, the rest liver

Eritrociti delle principali specie di interesse veterinario

Cane Gatto

Cavallo Bovino Cammello

Pecora Capra

Capra –Angora

fL=0,000000000000001 litri

Metabolismo globuli rossi

1)   Mantenere integrità funzionale membrana

2)   Trasporto ioni di membrana

3)   Mantenere il Fe emoglobina in forma ferrosa

4)   Impedire ossidazione proteine

ATP unico metabolita usato dal globulo rosso …..no nucleo…..

Anemie - ematocrito

1)   Post-emorragica 2)   Aplastica

3) Megaloblastica 4) Emolitica Effetti dell’anemia -

Emopoiesi

Cofattori: Say you need proteins for hemoglobin

Vitamine gruppo B- B12, cianocobalamina, Vit B 1, Tiamina, Vit. B6, Piridossina, PP, A. Folico, Biotina Oligoelementi: Fe++, Cu, Co,

Eritropoietina

Metabolismo del ferro

Fe 3+

HCl

Fe 2+

Fe 2+

Enterocita

Fe 2+

Apoferritina

Ferritina

Sangue

Fe 2+

Fe 3+

Fe 2+

Transerrina Ferrico

Fe 2+ferroso

Emosiderina

Sangue

Policitemia

Policitemia secondaria

Policitemia vera

Effetti

Emolisi

Resistenza osmotica eritrocitaria

Vita media eritrocitaria

Velocità di eritrosedimentazione (VES)

Globuli bianchi o leucociti

Neutrofili Eosinofili Basofili Linfociti

Linfociti T

Linfociti B

Monociti Macrofagi

Piastrine

Il sangue PLASMA

Residuo Solido 10%

Proteine plasmatiche Sostanze inorganiche Sostanze organiche gas

Albumine Globuline Fibrinogeno Ormoni – enzimi Na, K, Ca, Mg, Cl, Fe, Mn, Cu, Zn, I, Co Metaboliti:A.A. Glucosio, Grassi, colesterolo etc. Cataboliti: urea, a. urico, creatina Creatinina, Sali di ammonio O2, CO2 N

Ematocrito

Frazioni proteiche del Plasma

Albumine – riserva aminoacidi- (150/200 mg/Kg pv)- a.grassi NE,trasporto ormoni α-globuline (α1fast α 2slow) - ceruloplasmina, eritropoietina, ormoni β-globuline (β1 as above β2)- β lipoproteine, transferrina, fattori coagulazione γ-Globuline Fibrinogeno

Frazioni proteiche del Plasma

Tracciato elettroforetico proteine del Plasma

Albumina α β γ

Enzimi plasmatici Plasma-specifici

Esogeni

Enzimi della coagulazione colinesterasi

Cellulari: Transaminasi Fosfatasi Creatinchinasi Lattatodeidrogenasi sorbitoldeidrogenasi

Di secrezione: Amilasi Lipasi Fosfatasi

Emostasi – Coagulazione del sangue

1) Spasmo muscolare 2) Formazione di un tappo piastrinico 3) Coagulazione del sangue 4) a-Sviluppo di tessuto fibroso nel coagulo-chiusura della lesione- b-dissoluzione del coagulo

Emostasi – Coagulazione del sangue

Caratteristiche delle piastrine

1)  Filamenti di actina, miosina e trombostenina

2)  Reticolo endoplasmico- Golgi-proteine leganti Ca++

3)  Mitocondri – ATP sintesi

4)  Fattore stabilizzante la fibrina

5)  Fattore di crescita endoteliale

6)  Trombossano A2

Meccanismo di formazione del tappo piastrinico Say what happens when no platelets

La coagulazione del sangue nelle rotture vascolari Summarize the all events

Meccanismo della coagulazione

1)   Attivazione della protrombina (alfa2 globulina), 15mg/100 ml

2)   Conversione protrombina in trombina

3)   Scissione del fibrinogeno (100-700 mg/100ML) in fibrina

Schema dei principali eventi della coagulazione

Protrombina

Attivatore protrombina (intrinseco o intrinseco) Ca++

Trombina

Fibrinogemo Monomero di Fibrina

Ca++

Filamenti di fibrina Insolubile

Fattore stabilizzante le fibrina

Il coagulo sanguigno

Retrazione del coagulo

Siero

Avvio della coagulazione Via intrinseca ed estrinseca

Via estrinseca

1)  Liberazione di tromboplastina tessutale (fosfolipidi di membrane- lipoproteine ad azione proteolitica)

1)   (Bis)Legame fattore X con fattore VII (attivazione fattore X)

2) Attivazione fattore X (fattore V + fosfolipidi + piastrine)

Attivatore protrombinico

Via estrinseca Avvio della coagulazione

Trauma tissutale

tromboplastina tessutale fosfolipidi di membrane- lipoproteine ad

azione proteolitica

Fattore X Fatttore X attivo

Attivatore della protrombina

Ca++ + Fattore V

Protrombina Trombina

Ca++

Vie

Tessuto lesionato

Coagulazione - vie -

Prevenzione della coagulazione vasale I: Prostaciclina e NO

Prevenzione della coagulazione intravasale II: Fattori vasali e Plasmatici

1)  Levigatezza superficie endoteliale

2)  Glicocalice + Trombociclina local endothelial factor

3)  Trombomodulina – legame con trombina –

4)  Filamenti di fibrina – adsorbimento trombina

5)  Antitrombina III

6)  Eparina (legame antitrombina III) Say were it is produced mastcells, or basophyle granulocytes alone very weak!!!!!

Rimozione Fattori XII, XI IX e X

7) Alfa 2 macroglobulina - legame fattori coagulazione

Destino del coagulo

1)  Organizzazione del coagulo 2)  Lisi del coagulo (plasmina + urochinasi)

Plasminogeno (fibrinolisina)

Attivatore del plasminogeno

Plasmina Digestione fibrina e fattori coagulazione

Inibita da: Alfa2 antiplasmina

Sindrome emorragiche

Diminuzione protrombina e fattori coagulazione Carenza vitamina K Avvelenamenti da anticoagulanti (warfarin – cumarinici)

Emofilia – carenza genetica fattore VIII Say something about transgenic animals carrying clotting factors

Test di coagulabilità del sangue

1) Tempo di emorragia

2) Tempo di coagulazione 3) Tempo di protrombina

Gruppi sanguigni

Molteplicità di antigeni nelle cellule del sangue

Gruppi di antigeni principali:

O-A-B e Rh

Agglutinogeni ed agglutinine

Antigeni A e B = agglutinogeni

Anticorpi anti A e B = agglutinine

Gruppi sanguigni: O-A- B O = 47% A = 41% B = 9% A B = 3%

Gruppi sanguigni, agglutinogeni ed agglutinine

Gruppo

O _

A A B B

A B A -B

Agglutinogeni Agglutinine

Anti A e B

Anti B Anti A

Antigeni Rh

C D E c d e

D Rh positivo D Rh negativo

Risposta immunitaria al fattore Rh Eritroblastosi

DEA = Dog Erytrocyte Antigens

Gruppi sanguigni nel gatto

Soggetti gruppo A – anticorpi anti B – blandi

Soggetti gruppo B – anticorpi anti A – agglutinazione!

Soggetti AB- nessun anticorpo

Anemia emolitica neonatale frequente nei gattini

Determinazione gruppi sanguigni agglutinazione su gel + centrifugazione

Gruppi sanguigni Bovini

A, B, C, F, J, L, M, S, and Z

Gruppi sanguigni Felini A, B, or AB.

Gruppi sanguigni Equini A, C, D, K, P, Q, T, and U.

Gruppi sanguigni Ovini A, C, D and M

Gruppi sanguigni caprini A, B, C, R, E (diversi polimorfismi, es. C =21)

Gruppi sanguigni Suini A-E, F, G, H, I, J, K, L

Gruppi sanguigni nelle principali specie di interesse veterinario

Cenni sulle transfusioni

Collect 2ml of EDTA-anticoagulated blood from donor and recipient. Centrifuge blood samples for 1 minute in bench top centrifuge at approximately 1,000rpm (ie same speed as for plasma/serum separation) and remove plasma to prelabelled 75 x 10 mm test tubes. Make a 2% red cell suspension of each specimen in physiological saline (0.85% NaCl) solution. T his can be done by placing 0.02ml of concentrated red cells in 0.98ml of saline solution contained in a 75 x 10mm test tube; mixing, centrifuging, and washing three times; and resuspending washed red cells in a equal volume of saline solution. Place two drops of the donor’s cell suspension in a 10 x 75mm test tube and mix. In a second tube similarly place equal volumes of donor’s plasma and recipient’s cell suspension. To check for autoagglutination, set up controls in the manner by mixing donor’s red cells with its own plasma and follow the same procedure with the recipient’s red cells and plasma. Shake rack of tubes and incubate for 30 minutes at room temperature, then centrifuge for 1 minute at 1,000 rpm. Examine the supernatant for haemolysis. Shake the tubes gently by tapping with finger to detect grossly visible agglutination of red cells. If no agglutination is observed, transfer a small amount to a glass slide and examine under the low power of the microscope. A slight haemolysis in canine blood is non-specific. Significant haemolysis and/or agglutination in one or both of the cross-matched tubes but not in the controls indicates and incompatibility and the need to choose a new donor.

Blood cross matching for transfusion

Trapianti di organi

1) Isotrapianto 2) Allotrapianto 3) Xenotrapianto

Antigeni complesso HLA HLA 1 HLA 2 HLA 3

Tipizzazione del tessuto Say something about cloning pigs for xenotransplantation

Determinazione del gruppo sanguigno Say how do it

Incidenti trasfusionali 1)  Agglutinazione 2)  Emolisi

Conseguenze delle reazioni trasfusionali Ittero Blocco renale Shock cardiocircolatorio