"La sorveglianza sanitaria degli ex-

esposti ad amianto: criteri nella

scelta degli accertamenti

necessari“

Alfonso CristaudoAzienda Ospedaliero Universitaria Pisana

Sorveglianza sanitaria ex esposti ad amianto

Con “sorveglianza sanitaria degli ex-esposti” non si intende “screening”.

Per sorveglianza sanitaria si intende l’effettuazione di quell’insieme di procedure sanitarie periodiche e longitudinali nel tempo, finalizzate alla prevenzione e alla tutela della salute di coloro a cui vengono ad essere offerte ed attuate. In ultima analisi le procedure di sorveglianza sanitaria dovrebbero avere un impatto sulla storia sanitaria dei singoli individui coinvolti (L.I. Regione Toscana).

Sorveglianza sanitaria ex esposti ad amianto

Quali sono le finalità?

Quali gli strumenti?

Quali i benefici?

E’ opportuna?

Opportunità della Sorveglianza sanitaria degli ex-esposti ad amianto

Finalità

Placche pleuriche

Versamenti pleurici

Asbestosi Carcinoma bronchiale

Mesotelioma

Disponibilità metodologie diagnostiche

Possibilità diagnosi precoce ? ? ?

Prognosi favorevole/modif storia naturale

?? ?

Terapie efficaci ?

Counselling

Riconoscibilità Inail

Finalità della sorveglianza sanitaria di ex esposti ad

amianto1. Diagnosi

1. Diagnosi precoce patologie benigne amianto correlate

2. No attualmente diagnosi precoce patologie tumorali

2. Assicurative e medico-legali

3. Epidemiologiche

4. Counseling

5. Legislative :Art 242 c.6 D.Lgs 81/2008 Il medico competente fornisce ai lavoratori ....adeguate informazioni ..... sulla opportunità di sottoporsi ad accertamenti sanitari anche dopo la cessazione dell'attività lavorativa

FinalitàDiagnosi precoce patologie benigne amianto correlate

Placche ed ispessimenti

pleurici

Atelettasie Rotonde

Asbestosi

Versamenti Pleurici

Patologie neoplastiche

Mesotelioma pleurico Mesotelioma peritoneale Mesotelioma della tunica vaginale

del testicolo, Mesotelioma del pericardio

• Tumore polmonare• Carcinoma del colon (?)• Carcinoma della laringe (?)• Carcinoma della vescica (?)

Tumore polmone Mesotelioma Pleurico

Finalità della sorveglianza sanitaria degli ex esposti ad amianto:

Counselling per i lavoratori

1. sulle patologie legate alla esposizione ad asbesto

2. sulla possibile attività di prevenzione primaria: fumo,

esposizione a irritanti delle vie respiratorie, stili di vita,

abitudini alimentari

3. sul possibile riconoscimento medico-legale

4. sulla necessità di controlli nel caso di comparsa di sintomi

respiratori

5. per consigliare eventuali vaccinazioni per patologie

polmonari

Quali Strumenti per le diagnosi?

Molto pochi sono ad oggi gli strumenti ipotizzabili per la diagnosi.

Indagini radiologiche

Indagini di funzionalità respiratoria

Indicatori biologici/Markers tumorali

Contrary to this cartoon, there is no

simple medical test

other than clinical suspicion to determine

the of work-relatedness of disease, and

that depends primarily on a careful

occupational history

From LEVY BS, WEGMAN DH. Occupational health (3d

ed), p.60

Strumenti per la sorveglianza sanitaria

Debbono essere

Affidabili (alte specificità e sensibilità)

Economici

Non invasivi

Non dannosi

Buona accettabilità

Pratici per un impiego su larga scala

Strumenti:Indagine radiologica

Tac torace (HRCT) dose di radiazioni equivalente acirca 100-400 Rx torace

Rischio addizionale di tumori (fatali e non fatali) indotti dalleTac torace circa 1 ogni 2500 esami circa

TAC spirale standard 7.0 mSv

TAC spirale a basso dosaggio m.s. 0.7 mSv

Rx torace 2 p 0.07 mSv

Costi Benefici

Screening radiologici

Istituto Italiano Tumori di Milano, Mayo Clinic di Rochester e Moffit Cancer Center di Tampa hanno riscontrato un aumento di 3 voltedel n. dei casi ma non una riduzione delle morti per tumorepolmonare nella popolazione studiata (38 osservate v/s 38,8 aspettate)

Bach PB, Jett JR, Pastorino U et al. Computed tomography screening and lung cancer outcomes. JAMA 2007; 297:953-961

International Early Action Lung Cancer Program (I-ELCAP) l’88% dei pazienti in stadio I sopravvive a dieci anni dal riscontro della neoplasia e lo screening di individui ad alto rischio potrebbe prevenire l’80% delle morti per tumore polmonare

Henschke CI, Yankelevitz DF, Libby DM et al. International Early Lung Cancer Action Program Investigators. Survival of patient with stage I lung cancer detected on CT screening. N.Engl J Med 2006; 355: 1763:1771

American Society Thoracic Radiology: ammissibile la effettuazione di studi per gruppi selezionati ad alto rischio di esposti a cancerogeni in ambiente di lavoro con metodi radiologici.

Eticità degli strumenti di diagnosi precoce

T0

Inizio

esposizione

T1

Inizio

istologia

T2

Diagnosi

precoce

T3

Diagnosi clinica

comune

T4

Esito malattia

Storia naturale malattia

Allungamento durata malattia

Terapie inefficaci

T4

T4

Esito malattia

Terapie efficaci

Aumento sopravvivenza, senza peggioramento qualità della vita, o riduzione mortalità

T0

Inizio

esposizione

T1

Inizio

istologia

T3

Diagnosi clinica

comune

T0

Inizio

esposizione

T1

Inizio

istologia

T2

Diagnosi

precoce

T3

Diagnosi clinica

comune

sopravvivenza

Attori della sorveglianza

sanitaria• Medici competenti

• Medici di medicina generale (?)

• Servizi sanitari del SSN (ASL, Azienda Ospedaliero-Universitarie) l'effettuazione della sorveglianza sanitaria (LEA ?)

• Inail (?)

• Linee di indirizzo della Regione Toscana fanno assumere un ruolo specifico al SSR

Ambulatorio Medicina del Lavoro AOUP

Protocollo accertamenti ex esposti

Approccio multi-disciplinare integrato

Clinico

Radiologico

Monitoraggio biologico

Ambulatorio Medicina del Lavoro AOUP : Attività integrata nell’ambito del CESME

Comitato Scientifico

UO Med. Preventiva del Lavoro

Dr. A. CristaudoDr. R. FoddisDr. G. Guglielmi

UO Chirurgia ToracicaProf. A. Mussi

Dr. M. Lucchi

UO Pneumologia II

Dr. N. AmbrosinoDr. A. Chella

UO Pneumologia IProf. A. PallaDr.ssa L. Tavanti

SOD Fisiopatologia RespiratoriaProf. P.L. Paggiaro

UO Radiodiagnostica IIDr. F. Falaschi

Dr.ssa A.De Liperi

UO Anatomia Pat. III

Prof.ssa G. FontaniniDr.ssa G. Alì

Dip. Biologia – Sez. GeneticaProf. BaraleProf.. S. Landi

Prof.ssa F. Gemignani

UO Medicina Nucleare

Prof. G. MarianiDr. P. Erba

UO Oncologia MedicaProf A. FalconeDr. S. Ricci

Dr. E. Vasile

UO Radioterapia

Prof C. GrecoDr. S. SpagnesiDr. M. Panicchi

Cosa fa?

Protocolli comuni di gestione del paziente affetto da neoplasie amianto-correlate. Diagnosi, terapia

Raccordo per l’invio all’ISPO e agli Spisll delle informazioni sui casi di mesotelioma

Supporto alle attività di Sorveglianza Sanitaria degli ex-esposti all’amianto

Progettazione linee di ricerca condivise mirate agli aspetti preventivi, diagnostici e terapeutici del mesotelioma maligno della pleura e del tumore del polmone

Tutte le altre iniziative assistenziali e scientifiche previste dalla delibera istitutiva del Centro stesso.

Cos’è? :

Centro Polidisciplinare per la Ricerca, la Prevenzione, la Diagnosi e il Trattamento del Mesotelioma Pleurico Maligno e delle altre Neoplasie Amianto Correlate

AS

BE

ST

OS

EX

PO

SU

RE

AS

BE

ST

OS

RE

LA

TE

D D

ISE

AS

E

Target: risk assesment Target: early and/or late diagnosis

Latency

Asynt.

Pathol

Sint.

Pathol.Pauci

Path.

- Asbestos exposure evaluation

- Markers of SV40 and genetic factors

+/- 15-40 years

Chest-R, LDTC, Bal

Hyaluronic ac

Telomerase

Osteopontin

Thoracoscoy

Biopsy

HRCT-PET

Mesothelin

Strategies in health surveillance of asbestos ex-exposed workers. A.Cristaudo ICOH 2006

19

1^ accesso

•Visita medica•PFR, Rx Torace•Marcatori•Counseling

Accertamenti tutti negativi

Accessi successivi triennali

•Visita medica•PFR, Rx Torace•Marcatori •Counseling

Marcatori ed agg.

Anamn. semestrale

“Negativi”

Marcatori ed agg.

Anamn. semestralmente

Accertamenti clinico-funzionali positivi/marcatori “positivi”/Rx torace suggestiva di Pat. Pleurico-Polmonari

TAC Torace Low Dose

Negativa

Pos. per Pat. Pleu-Polm. Benigne

Pos. per Pat. Pleu-Polm.Maligne

Marcatori ed agg.

Anamn. semestralmente

Accessi successivi annuali

•Visita medica•PFR/Rx Torace/TC torace•Marcatori •Counseling

“Negativi”

“Positivi”Iter specialistico

•Pneumologico / chirurgia toracica

•HRCT

•PET

•Ecc.

Popolazione ex-esposti 847 (2002-2011)

F/M 20/627

Età media 56,69 aa (+/- 8,07)

Anzianità lavorativa media 33,49 aa

Anzianità media di esposizione 18,54 aa

Fumo di sigaretta 96 fumatori

237 ex-fumatori

164 non fumatori

PRINCIPALI DATI RIGUARDANTI

LA POPOLAZIONE IN ESAME

Diagnosi di neoplasie asbesto-correlate

• 2 casi di Cancro polmonare

• 2 casi di Mesotelioma

Patologia pleurica correlabile a pregressa

esposizione: (18,4% )

22

46

24

direttamente con Rx

con TC dopo Rx valutata "erroneamente" come completamente

negativa

con TC dopo Rx valutata "erroneamente" negativa per alterazioni

pleuriche amianto correlate

82 casi con noduli polmonari con dimensioni < 1 cm

16,4% popolazione studiata

36,12% rispetto agli esami TC effettuati

Problema del follow-up

Noduli polmonari

Low Dose MDCT

Non calcified nodulesNo Nodule/Only calcified

nodules

10 mm6 - 10 mm3 5 mm

3,6,12 months follow up

No growth Growth

Annual Low Dose MDCT Biopsy

M.Das et al. Asbestos Surveillance Program Aachen (ASPA): intial results from baseline screening for lung cancer in asbestos-exposed high-risk individuals using low-dose multidetector-row CT Eur Radiol (2007) 17: 1193-1199

Attività di ricerca

Le nostre attuali ricerche comprendono:

Studi su possibili marcatori biomolecolari (mesotelina, osteopontina,

fibulina 3 ecc.)

studio di specifici profili di miRNA predittivi per il MPM (Taqman o

Array)

studi di proteomica volti ad individuare un pattern proteico

riconducibile al MPM

indagini molecolari su SV40

analisi sulla combinazioni di vari marcatori (stress ossidativo) da

utilizzare nella diagnosi e nella prognosi del MPM

COLLABORAZIONE CON CESME, BIOLOGIA MOLECOLARE

(PROF. BARALE, LANDI), FARMACOLOGIA (PROF. LUCACCHINI)

Fra le altre ricerche si ricorda la seguente :Nuovi bio-marcatori per la

sorveglianza clinica di lavoratori ex-esposti ad amianto, finanziata dal

Ministero della Salute nell'ambito del "Bando Ricerca Finalizzata 2009"

Negli ultimi anni vari autori hanno studiato il ruolo potenziale di alcuni marcatori biologici come indicatori di rischio e/o di diagnosi precoce del MPM:

• MESOTELINA SIERICA (SMRP)• OSTEOPONTINA SIERICA (sOPN) • OSTEOPONTINA PLASMATICA

(pOPN)

27

MESOTELINA SIERICA

Alte concentrazioni in

•37 (84%) dei 44 pazienti con MM

•3 (2%) di 160 pazienti con altri

tumori o processi infiammatori

polmonari o patologie pleuriche

benigne

•7 dei 40 esposti ad asbesto

•3 dei 7 hanno sviluppato MM e 1

LC entro 1-5 anni

•Concentrazioni correlavano con

la dimensione del tumore ed

aumentavano con la

progressione neoplastica

• Elevati livelli sierici di mesotelina

associati con Mesotelioma e

Cancro Polmonare e non con

patologie benigne dell’apparato

respiratorio

• La sopravvivenza dei pazienti con

MM risulta correlata con i livelli di

mesotelina serica

• La mesotelina è un buon

indicatore di risposta terapeutica

Cut off (1 nM) MM vs. Controls:

•Sensitivity 68.2%

•Specificity 80.5%

M.V.: maschio, 60 aa, MPM epiteliomorfo

0

2

4

6

8

10

12

nov-

03

mag

-04

nov-

04

mag

-05

nov-

05

mag

-06

nov-

06

mag

-07

nov-

07

Mesotelina (nM)

CH+RT

(STADIO II)

CT+IL2

RIPRESA MALATTIA

(STADIO III)

CT

CT A CICLI CONTINUI

TC Riduzione del

50% delle

lesioni

IL2 IN CORSO

TC IN PROGRESSIONE

B.E.: maschio, 49 aa, MPM epiteliomorfo

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

lug-

07

dic-

07

gen-

08

Mesotelina (nM)

DIAGNOSI

STADIO II

CT

Buona risposta alla

terapia.

Miglioramento clinico

M.F.: maschio, 70 aa, MPM epiteliomorfo

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

1,4

Giu

-07

Lug-

07

Ott-0

7

Gen

-08

Mesotelina (nM)

CH + CT

(STADIO II)

QUADRO CLINICO STABILE

Istruzioni per l’interpretazione dei valori di mesotelina

Valori dei marcatori al di sotto del cut-off non escludono affatto la presenza di un tumore, specie in fase iniziale

Valori dei marcatori in zona “intermedia” o moderatamente elevati non comportano necessariamente la presenza di un tumore

Il valore dei marcatori tumorali è un dato in più a disposizione del Clinico: può essere utile solo se richiesto e interpretato tenendo conto delle altre informazioni a disposizione del contesto clinico

Una interpretazione non corretta può scatenare una serie di approfondimenti diagnostici, anche a carattere invasivo, con stress e spese che possono non essere giustificati

Da considerare soprattutto i valori che tendono a crescere nel tempo

Cut-off nel monitoraggio di ex esposti

Cut-off TP FN FP TN Se Sp PPV PNV

0.600 91 16 155 107 85.1 40.8 0.14 99.96

0.800 77 30 91 171 72.0 65.3 0,21 99.96

1.000 73 34 51 211 68.2 80.5 0.35 99.96

1.200 60 47 37 225 56.1 85.9 0.40 99.95

1.400 54 53 26 236 50.5 90.1 0.51 99.94

1.600 49 58 15 247 45.8 94.2 0.79 99.94

1.800 43 64 9 253 40.2 96.6 1.16 99.94

1.900 41 66 8 254 38.2 96.9 1.24 99.94

2.000 39 68 5 257 36.4 98.1 1.88 99.94

2.100 34 73 4 258 31.8 98.5 2.04 99.93

2.200 32 75 4 258 29.9 99.2 3.77 99.93

2.300 31 76 1 261 28.9 99.6 7.06 99.93

2.400 29 78 0 262 27.1 100.0 100.0 99.93

Cut off (1 nM) MM vs. Controls:•Sensitivity 68.2%•Specificity 80.5%

Cut off (1 nM) LC vs. Controls:•Sensitivity 38.0%•Specificity 80.8%

34

OSTEOPONTINA SIERICA

Pass HI, Lott D, Lonardo F, Harbut M, Liu Z, Tang N, et al. Asbestos exposure, pleural

mesothelioma, and serum osteopontin levels. N. Engl. J. Med. 2005 Ott 13;

353(15):1564-1573.

Grigoriu B, Scherpereel A, Devos P, Chahine B, Letourneux M, Lebailly P, et al. Utility

of osteopontin and serum mesothelin in malignant pleural mesothelioma diagnosis and

prognosis assessment. Clin. Cancer Res. 2007 Mag 15;13(10):2928-2935.

Park E, Thomas PS, Johnson AR, Yates DH. Osteopontin levels in an asbestos-

exposed population. Clin. Cancer Res. 2009 Feb 15;15(4):1362-1366.

Alti livelli di sOPN nei MPM rispetto ai soggetti sani…

…ma anche in soggetti con patologie benigne asbesto-correlate

OSTEOPONTINA PLASMATICAPlasma Osteopontin Levels are Significantly Increased in Patients

with Epithelial MPM

N° of cases Mean±SD (ng/ml) Median

(ng/ml)

Range

(ng/ml)p

ALL SAMPLES 239 630.54±562.28 428.30 25.64-4288.36 Controls vs MPM p<0.0001

BRDs vs MPM p<0.0001

Controls vs BRD p=0.212HEALTHYCONTROLS

94 549.36±387.28 418.45 81.60-1828.32

BRD 113 512.08±355.92 410.60 25.64-2283.74

MPM 32 1287.31±1002.76 1154.00 123.20-4288.36

•The application of a ROC curve for pOPN resulted in an AUC value of 0.780 with a

best cut-off of 878.65 ng/ml, with a sensitivity of 68.8% and a specificity of 84.5%.

•Within the control group no significant correlation was observed between age, duration

of asbestos exposure, pack-years in current smokers, lung function or imaging

parameters and pOPN.

pOPN + SMRP

Age Gender (M/F) Asbestos Exposure

Healthy subjects (n=93) 57.2±7.2 92/1 93 (100%)

BRD (n=111) 60.1±8.7 108/3 111 (100%)

MPM (n=31) 67.4±7.9 24/7 20 (64.5%)

235 pazienti afferenti per diagnosi e cura all’AOUP

•Dosaggi di SMRP: Mesomark (Cisbio International)

•Dosaggi di pOPN: Human Osteopontin Assay Kit (IBL, Gunma, Japan),

Metodo

ROC curve: Calcolo AUC per singolo marcatore

Calcolo AUC derivante da dosaggio combinato di SMRP e pOPN, tramite:

The probability of the risk to develop ephitelial MPM was calculated by the formula:

P = exp (-4.648 + 0.002X1 + 0.975X2) / (1 + exp (-4.65 + 0.002X1 + 0.975X2))

X1 = pOPN level X2 = SMPR level

AUC = 0.795 ± 0.05 AUC = 0.762 ±

0.05

A B

Mean SMRP values:

•Epithelial MPM patients (2.52±4.10 nM)

•Healthy subjects (0.71±0.45 nM)

•BRD (0.82±0.51 nM)

•MPM vs HS p<0.0001

•MPM vs BRD p<0.0001

•BRD vs HS n.s.

Mean pOPN values:

•Epithelial MPM patients (1322.56±998.98 ng/ml)

•Healthy subjects (553.10±387.67 ng/ml)

•BRD (533.77±394.63 ng/ml )

•MPM vs HS p<0.0001

•MPM vs BRD p<0.0001

•BRD vs HS n.s.

AUC = 0.795 ± 0.05 (pOPN)

AUC = 0.762 ± 0.05 (SMRP)

AUC = 0.873 ± 0.04

(pOPN+SMRP)

Risultati

39

Pass HI.

2005

(sOPN)

Creaney

2008

(sOPN)

Cristaudo

2009

(pOPN)

Robinson

2003

(SMRP)

Creaney

2007

(SMRP)

Cristaudo

2007

(SMRP)

Iwahori K.

2008

(MPF)

Cristaudo

2009

(pOPN+

SMRP)

N°of cases 190 167 239 272 233 620 121 235

AUC 0.888 0.757 0.780 - 0.790 0.770 0.879 0.873

SPEC. % 85.5 85.0 84.50 83.0 98.0 80.5 90.4 91.2

SENS. % 77.6 55.0 68.75 84.0 49.0 68.2 74.1 80.0

BEST

CUT-OFF48.3

ng/ml

- 878.6

ng/ml

- 2.5

nM

1.0

nM

19.1

ng/ml

0.165

Combinando due marcatori

40

Confronto con la sensibilità e specificità di altri esami e markers

Test Tumore Sensibilità% Specificità%

SMRP+pOPN Mesotelioma 80,0 91,2

Mesotelina Mesotelioma 68,2-80 80,5-82,3

Mesotelina Ca polmone 38 80,8

Espl.rettale Ca colon 80 50

Rx torace Ca polmone 40-50

Escreato Ca polmone 20-40

TPA Ca polmonare 42

PSA Ca prostata 84 65

Mammografia Ca mammario 66,7 28,6

Citologia urin.

Hrct

Ca vescica

Asbestosi

15-17

65-70

85-100

RX torace Ca polmone 33 95

Hrct Ca polmone 83 78

Occup Environ Med. 2009 Oct 26. [Epub ahead of print]Polymorphisms within the putative micro-RNA binding sites ofmesothelin gene are associated with the serum levels of the

mesothelin-related protein.Cristaudo A, Foddis R, Bonotti A, Simonini S, Vivaldi A, Guglielmi G, Bruno R,

Landi D, Gemignani F, Landi S.Department of Endocrinology, Orthopaedics, Occupational Medicine, University

of Pisa, Italy;

Genomica:

-Identificazione geni de-regolati riportati in letteratura

-Allestimento database con più di 100 geni up- e down-regolati

-Estrazione dell’RNA da tessuti di pazienti con MPM e pleure sane

-Real-time PCR con sonde specifiche per ogni gene

Proteomica:

-Estrazione di proteine da tessuti di pazienti con MPM e da pleure sane

-Allestimento di gel bidimensionali per evidenziare spot proteici differenzialmente espressi nei MPM e nei sani

-Analisi degli spot per risalire alle proteine

Identificazione di un panel di proteine da utilizzare nella diagnosi del MPM

Non sempre livelli elevati di mesotelina sierica nei soggetti ex-esposti

ad asbesto si traducono in MPM (Cristaudo et al., 2007).

Polimorfismi nelle regioni regolatrici 3’UTR, 5’UTR e promotore,

potrebbero alterare la regolazione trascrizionale e traduzionale. In

particolare, il 5’ e il 3’UTR sono i principali responsabili della

regolazione post-trascrizionale e traduzionale degli RNA

messaggeri, dal momento che modulano il trasporto dell’mRNA al

di fuori del nucleo, e influenzano l’efficienza della traduzione e la

localizzazione subcellulare (Meijer et al., 2002).

Caratteristiche Controlli (n=59)

MPM (n=28)

Età (mean ± SD) 56 ± 6,4 69 ± 8,5

Esposizione ad asbesto,n (%)

SiNo

59 (100%) 24 (85,7%)4 (14,3%)

- DOSAGGIO SIERICO di SMRP con metodica ELISA (Mesomark)

- ESTRAZIONE DEL DNA da sangue intero(“Puregene DNA Purification

Kit” prodotto da Gentra).

- AMPLIFICAZIONE DELLE REGIONI promotore, 5’UTR e 3’UTR, con

l’utilizzo di primers specifici da noi disegnati (5 ampliconi da 600bp circa).

- SEQUENZIAMENTO CON METODO BECKMAN e PERKIN ELMER

-VERIFICA DEGLI SNPs CON ALTRE TECNICHE DI

GENOTIPIZZAZIONE (ASO-PCR e RFLP)

- L’analisi statistica è stata effettuata con il programma SPSS.

Polymorphisms in the putative micro-RNA binding sites of mesothelin

gene are associated with serum levels of mesothelin-related protein

Cristaudo et al, OEM 2009

Presenza dello SNP rs1057147

G>A

Media mesotelina ±

SD

Range P

Tutti i casi (87)63 wild-type GG24 eterozigoti GA

1,58 ± 3,141,17 ± 0,73

0,21 – 24,140,37 – 1,96

Ns

Soggetti ex-esposti ad asbesto (59)

41 wild-type GG18 eterozigoti GA

0,80 ± 0,421,11 ± 0,47

0,26 – 2,010,37 – 1,96

P=0,016

Pazienti conMPM (28)

22 wild-type GG6 eterozigoti GA

3,03 ± 51,19 ± 0,49

0,21 – 24,140,39 – 1,82

Ns

Cristaudo et al, OEM 2009

Nella regione 3’UTR sono stati trovati due polimorfismi già riportati in letteratura:

rs1057147 G>A e rs57272256 C>T

SMRP ≤ 1.0nMN. pazienti

SMRP >1.0nMN. pazienti

GG rs1057147 31 (81,6%) 10 (47,6%) Total=41

GA rs1057147 7 (18,4%) 11 (52,4%) Total=18

Total=38 Total=21 P= 0,008

I polimorfismi noti del promotore registrati su dbSNP erano 15:

3 non sono stati rilevati nei soggetti studiati

7 hanno mostrato una frequenza <1%

5 sono stati considerati ai fini dell’analisi statistica

Abbiamo inoltre identificato 2 nuovi SNPs (sottomessi a dbSNP), codificati

provvisoriamente come New1 e New2.

Tutte le frequenze genotipiche osservate erano in equilibrio di

Hardy-Weinberg

Cristaudo et al, Int J Biol Marker 2011

Glicofosfoproteina espressa da diversi tipicellulari, normalmente presente nel tessutoosseo, nei denti e nei reni.

Coinvolta nello sviluppo di: angiogenesi,apoptosi, infiammazione e metastasi.

OSTEOPONTINA

Recentemente è stato dimostrato che:

L’osteopontina è sovraespressa nei tumori

indotti dall’asbesto in modelli animali e nelle

cellule esposte all’amianto in vitro.

I livelli sierici di osteopontina sono strettamente

associati col mesotelioma pleurico.

Comparison between Plasma and Serum Osteopontin Levels:

Usefulness in Diagnosis of Epithelial Malignant Pleural Mesothelioma

Although the most important data regarding the role of osteopontin (OPN) in MPMs

derive from the marker dosage in serum samples, most commercial laboratory kits

for OPN assay are suitable only for measuring plasma OPN levels, as reported by

the manufacturer.

Our study aimed to evaluate the influence of pre-analytic variables on serum (sOPN)

and plasmatic OPN (pOPN), to compare serum and plasmatic OPN in the same

population and to assess whether OPN levels can aid in the diagnosis of patients

with MPM vs Benign Respiratory Disease (BRD) and healthy subjects exposed to

asbestos.

Variabili pre-analitiche:

- Tempo del campione di sangue a RT

- Tempo del campione di sangue in frigo

- Tempo del siero e del plasma nel congelatore

- quanti scongelamenti prima del dosaggiopOPN e sOPN

sOPN

Cristaudo, Int J Biol Markers 2010

Combined Serum Mesothelin-Related Protein and Plasma

Osteopontin Measurements in Malignant Pleural Mesothelioma

This study aimed to evaluate whether a combination of these two

markers could increase sensitivity in diagnosis of epithelioid MPM.

Age Gender (M/F) Asbestos

Exposure

Stage

Healthy subjects

(n = 93)

57.2 ± 7.2 92/1 93 (100%)-

BRD (n = 111) 60.1 ± 8.7 108/3 111 (100%) -

MPM (n = 31) 67.4 ± 7.9 24/7 20 (64.5) II (n=19)

III (n=12)

P = exp (-4.648 + 0.002X1 + 0.975X2) / (1 + exp (-4.65 + 0.002X1 + 0.975X2))

X1 = pOPN level and X2 = SMPR level

Cristaudo, J Thorac Oncol 2011

Valutare l’effetto dell’RNA-interference contro potenziali geni target

implicati nei processi di cancerogenesi del mesotelioma pleurico

maligno.

Gene Expression in Malignant Pleural Mesothelioma

Il primo obiettivo e’ stato quello di identificare i geni de-regolati nell’MPM. E’ stata

così effettuata una estesa ricerca bibliografica mirante a raccogliere tutti i lavori

di trascrittomica pubblicati.

Tutti i geni individuati sono stati classificati sulla base di quanto spesso

sono stati presi in analisi tramite microarray e real time PCR e quindi in base a

quanto sono stati citati negli articoli in esame.

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Organizzazione e Atti dei Convegni Nazionali

“ Le Patologie correlate all’amianto e la sorveglianza sanitaria degli ex esposti”. Pisa, 21-22 Aprile 2005

“La sorveglianza sanitaria degli ex –esposti e le patologie correlate all’amianto:up-date sui marcatori biologici e le novità

diagnostico-teraputiche”. Pisa, 11 Aprile 2008.