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Studio della metabolismo ossidativo della Dopamina

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Neuromelanin formation

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LOCALIZZAZIONE ATTIVITA DOPAMINO PEROSSIDASICA IN CERVELLO DI RATTO E UMANO * * *

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Studio in vitro della formazione del dopaminocromo La formazione di dopaminocromo catalizzata in maniera simile da perossidasi purificate (lattoperossidasi, mieloperossidasi, perossidasi di rafano) e da una frazione di cervello di ratto, in presenza di perossido didrogeno. Biochim Biophys ActaLa formazione di un intermedio radicalico, dopamino-o-semichinone, comune nelle reazioni catalizzate da ciascuna delle perossidasi e dalla frazione di cervello di ratto. (Galzigna et al. Biochim Biophys Acta 1999)

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Procedures The midbrain fractions were homogenized and centrifuged. The supernatant, obtained after two successive centrifugations, was spectrophotometrically assayed for enzymatic activity. Preparation of protein mixture: Assay of peroxidizing activity Dopamine peroxidizing activity was in vitro followed spectrophometrically, as increasing absorbance at 475nm, corresponding to the peak of maximum absorption of the dopaminochrome formed from dopamine and hydrogen peroxyde. striato s.nigra

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Come si determina lattivit enzimatica Attivit enzimatica A 475 rappresenta la variazione di assorbanza misurata a 475 nm; il coefficiente di estinzione molare del substrato cromoforo = 1175 M -1 cm -1 La determinazione stata effettuata in un il volume totale della miscela (omogenato e tampone di lettura) di 10 -3 L (Galzigna et al., 1999)

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*Significativamente differente dai controlli, p