Le amminoacil-tRNA sintetasi Il caricamento dei tRNA.

Le amminoacil-tRNA sintetasi

Il caricamento dei tRNA


Il riconoscimento dell’a.a. corretto da parte della a.a.-tRNA sintetasi è verificato con un meccanismo di “correzione di bozze” innescato dal legame con il giusto tRNA:

• un cambiamento conformazionale può causare l’idrolisi dell’ a.a.-adenilato

• il trasferimento dell’a.a. sul tRNA può essere seguito da idrolisi


La accuratezza del caricamento del tRNAIle da parte della corrispondente sintetasi dipende da un meccanismo di controllo degli errori che agisce in due diverse fasi

Soppressione


Mutazioni non-senso possonoessere “soppresse” da un tRNA con una mutazione nell’anticodoneche inserisce un a.a. in corrispondenza del codone mutato, producendo così una proteina completa. Nell’esempio la Leu originale è stata sostituita da una Tyr.


I soppressori non-senso continuano la lettura attraverso i codoni di terminazione naturali,sintetizzando proteine che sono più lunghe del normale


La soppressione “di senso” avvienequando l’anticodone di un tRNA è mutato in modo da “rispondere” al codone sbagliato.

Ricodifica

Il ribosoma

EUCARIOTI

80S

60S

40S

PROCARIOTI

70S

50S

30S

28S rRNA (4718 nt)5,8S rRNA (160 nt)5S rRNA (120 nt)

50 proteine

23S rRNA (2904 nt)5S rRNA (120 nt)

34 proteine

18S rRNA (1874 nt)

33 proteine

16S rRNA (1541 nt)

21 proteine

Origine del ribosoma

Mitocondrio di Tripanosoma

Mitocondrio di mammifero

Mitocondrio di lievito

Cloroplasto di Tabacco

Batterio

Citosol di Lievito

Citosol di Anfibio

Citosol di Mammifero

rRNA grande rRNA piccolo

597 bp

954 bp

1686 bp

1485 bp

1542 bp

1799 bp

1825 bp

1874 bp

1152 bp

1559 bp

3273 bp

2904 bp

2904 bp

3392 bp

4110 bp

4718 bp

The ribosome of Escherichia coli at 25 A resolution as obtained by cryo-electron microscopy of single ribosomes

and reconstruction using 4300 projections(Frank et al., Nature 376 (1995) 441-444).

Yellow: 30S subunit, blue: 50S subunit.

Risoluzione della struttura del

ribosoma

Cristalli della subunità 50S di Deinococcus radiodurans

Le subunità 30S e 50S del ribosoma procariotico

Le amminoacil-tRNA sintetasi Il caricamento dei tRNA.

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