La CandidosiLa Candidosi

L’infezione da candida è provocata dal lievito Candida albicans che è un parassita unicellulare appartenente al regno dei funghi. Candida è l’unico lievito ad essere patogeno per l’uomo ed è un

organismo dimorfico, cioè che si manifesta in due forme metaboliche distinte. Normalmente è un simbionte che si

instaura nell’intestino di tutti gli esseri umani in genere poco dopo la nascita e vi rimane sempre presente partecipando alla digestione degli zuccheri. Nella forma patologica diventa un

parassita, crea una struttura molecolare molto lunga ed entra nel flusso sanguigno tramite la mucosa intestinale.

Farmaci utilizzati nelle Farmaci utilizzati nelle terapie antimicoticheterapie antimicotiche

In contrasto con il gran numero di antibiotici e chemioterapici rivelatisi efficaci nel trattamento

delle infezioni batteriche, la realizzazione di farmaci antifungini utilizzabili per via generale ha incontrato grandi difficoltà riferibili alla comune

struttura eucariotica delle cellule fungine ed animali, che rende difficile l’individuazione di

bersagli metabolici o strutturali sufficientemente specifici.

Il bersaglio: la chitina.Il bersaglio: la chitina.Lo strumento: la chitinasiLo strumento: la chitinasi..

Il ruolo cruciale della chitina nella cellula fungina e la sua assenza nelle cellule umane rendono i processi di sintesi di chitinasi e di idrolisi della chitina oggetti ideali per una potenziale terapia antimicotica a tossicità selettiva molto elevata.

La chitina rappresenta la sostanza protettiva degli insetti e di altri antropoidi.

La chitinasi è un complesso di enzimi idrolitici che partecipano alla demolizione totale della chitina.

Preparazione di una libreria Preparazione di una libreria genomica per identificare genomica per identificare l’enzima chitinasi nel Dna l’enzima chitinasi nel Dna

delle coccinelle.delle coccinelle. La coccinella è uno dei tanti insetti che hanno un esoscheletro che ricopre il corpo, all’interno del quale,

appunto si trova la chitina. Questa struttura fisica implica che gli insetti come la coccinella possa agire per idrolizzare la chitina durante il processo di muta.

Per poter identificare quale sia la sequenza genica all’interno del Dna, che corrisponde all’enzima chitinasi e

quindi clonarla, dobbiamo servirci di una libreria genomica.

Clonaggio del gene nel Clonaggio del gene nel plasmide e trasformazione plasmide e trasformazione dei batteri in fabbriche di dei batteri in fabbriche di

chitinasi chitinasi Una volta estratto il segmento di

Dna che codifica per la proteina che idrolizza la chitina mediante enzimi di restrizione, i quali vanno a tagliare la porzione interessata in quei determinati siti ad essi complementari, occorre che questo entri all’interno di un batterio il quale poi, una volta assimilata la nuova sequenza, comincerà a sintetizzare la sostanza necessaria a combattere le micosi.

Per far ciò è opportuno ricorrere alle biotecnologie.

Purificazione della chitinasiPurificazione della chitinasi

Dopo aver coltivati i batteri ingegnerizzati in appositi contenitori denominati

bioreattori, si dovrà procedere alla fase di recupero e purificazione del prodotto mediante la cromatografia di affinità.

Valentina PasturaValentina PasturaSara Dotta Sara Dotta

Arianna DelpianoArianna Delpiano

Liceo ScienLiceo Scienttifico “L. Cocito” ifico “L. Cocito” AlbAlbaa

Classe IV Classe IV CCA.S 2005/ 20A.S 2005/ 200606