HPV- mRNA, p16/ki-67 e regressione delle lesioni cervicali: Studio … · 2019. 6. 2. · HPV-...
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HPV- mRNA, p16/ki-67 e regressione delle lesioni cervicali:
Studio NTCC2
Simonetta Bisanzi
ISPRO Istituto per lo studio, la prevenzione e la rete oncologica
S.C. Laboratorio Regionale Prevenzione Oncologica Firenze
&
Gruppo di lavoro NTCC2
Dichiarazione conflitto di interessi
Il progetto è finanziato dal Ministero della Salute, proprietario dei dati. Hologic s.r.l. e Roche Diagnostics S.p.A. hanno fornito parte del materiale necessario a prezzo ridotto o gratis.
Ricerca Finalizzata Ministero della Salute 2009 “L'HPV come test primario di screening nella prevenzione del tumore cervicale: dal DNA all'mRNA? Un RCT double testing con follow up a lungo termine” Grant number RF-2009-1536040 Clinicaltrials.gov identifier NCT01837693
Obiettivi specifici
misurare l’accuratezza dei test HPV E6-E7 mRNA (APTIMA, Hologic) e test p16/Ki-67 (CINtec PLUS, Roche Diagnostic) e il loro valore predittivo negativo prospettico nei successivi 5 anni, misurando la detection rate cumulativa di CIN2+ nei cinque anni a seguito di un test HPV-DNA positivo e di un biomarker, p16/ki-67 o HPV-mRNA, negativo misurare la riduzione di sovradiagnosi data da un triage citologico, con p16/ki-67 e con HPV-mRNA rispetto all’invio diretto in colposcopia delle donne HPV DNA positive.
Necessità di biomarcatori specifici per CIN di alto grado
Il test HPV DNA può causare sovra diagnosi, con conseguente sovra trattamento, in particolare nelle donne giovani, di lesioni CIN2 e CIN3 destinate a regredire.
Razionale
There was evidence that approximately 40% of undiagnosed CIN-2 will regress over 2 years.
Un test che sia più specifico potrebbe almeno parzialmente ridurre il sovratrattamento.
Disegno dello studio
RANDOMIZZAZIONE 1:1
RANDOMIZZAZIONE
Given the randomized design for management of women that are HPV DNA positive/cytology negative, we might establish the ability of HPV E6-E7 mRNA test
and p16/ki-67 test to distinguish between progressive and regressive lesions.
Analisi biomarcatori HPV-mRNA e p16/ki-67: All’arruolamento sulle donne HPV-DNA positive Al richiamo a 1 anno su tutte le donne Al follow-up post colposcopia negativa (richiami precoci)
HPV-mRNA test Aptima
P16/ki67
HPV-mRNA test Aptima
P16/ki67
HPV-mRNA test Aptima
P16/ki67
Richiami precoci post colpo negativa
HPV-mRNA test Aptima
genpathdiagnostics.com
L’espressione degli oncogeni dell’HPV ed i suoi effetti sulla cellula ospite possono essere monitorati direttamente, attraverso l'individuazione di trascritti di mRNA virale E6/E7, o indirettamente, attraverso la rilevazione della proteina cellulare p16.
https://doi.org/10.1016/j.joms.2013.02.019
alterata regolazione trascrizionale di percorsi cellulari della cellula ospite
Trasformazione neoplastica
Il test Aptima HPV consente l’analisi qualitativa con amplificazione di mRNA degli oncogeni virali E6 e E7 di 14 tipi HPV ad alto rischio (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,66,68)
Validato su campioni per citologia in fase liquida → test sullo stesso prelievo del test primario di screening
APTIMA Specimen Transfer Kit
Test HPV E6-E7 mRNA Aptima (Hologic)
Panther Hologic
PreservCyt, Hologic
Cellula epiteliale cervicale positiva per p16INK4a (colorazione citoplasmatica marrone) e per Ki-67 (colorazione nucleare rossa)
TP 5000 autoloader Hologic BENCHMARK GX
Ventana Roche
CINtec PLUS Assay (Roche Diagnostics)
PreservCyt, Hologic
Il confronto tra tasso di rilevamento di lesioni CIN2+ nei due bracci (invio diretto in colposcopia vs follow up a un anno) in donne negative alla citologia darà la misura di quanto il triage citologico può ridurre la sovra-diagnosi in confronto con il DNA di HPV con immediato invio alla colposcopia.
Misure di esito ed esposizione
DESCRIZIONE DELLO STUDIO
Analisi - Dati relativi ai centri di Firenze, Torino, Veneto e Perugia. - Risultati ai primi 12 mesi di follow up, cioè considerati i test entro 2 anni dal reclutamento - Il valore delle CIN2+ adjusted è ottenuto aggiustando per la non compliance alla ripetizione ad un anno
HPV-DNA results
Cytology
+
Randomization
12 months HPV-DNA
1229
Recruited women 40509
22 Missing
37340 3147
Colpo 831
2306
Colpo 1077
10 Missing
-
+ -
Colpo performed 741
Colpo performed 951
HPV-DNA results
+
480 550
-
Colpo performed 490
Returned for 1y follow up
1030
115 CIN2+
34 CIN2+
25 CIN2+ (adj 29,8)
Overall detection: 4,4/1000
83,8%
88,3%
89,2%
89,1%
7.8%
26.4%
Tot 174 CIN2+ (78 CIN2, 95 CIN3 e 1 adenocarcinoma)
mRNA pos 66.5% P167ki67 pos 38.2%
HPV-DNA results
Cytology
+
Randomization 12 months HPV-DNA
1229
Recruited women 40509
22 Missing
37340 3147
Colpo 831
2306
Colpo 1077
10 Missing
-
+ -
Colpo performed 741
Colpo performed 951
HPV-DNA results
+
480 550
-
Colpo performed 490
Returned for 1y follow up
1030
115 CIN2+
34* CIN2+
25** CIN2+ (adj 29,8)
83,8% 88,3%
89,2%
89,1%
Detection 3,2%
Detection 2,4%
RR 0,77 95%CI 0,48-1,25
REGRESSIONE LESIONI IN DONNE CITO NEG
Nelle donne HPV pos/cito neg, circa 1/4 di lesioni CIN2+ potrebbe regredire in meno anno
*19 CIN2 + 15 CIN3
**13 CIN2 + 12 CIN3
La proporzione di CIN2+ HPV DNA positive e mRNA o p16/ki-67 negative che regrediscono in un anno sarà misurato attraverso il confronto del tasso di rilevamento nei due bracci (invio diretto alla colposcopia vs follow-up a un anno) nei casi mRNA o p16 negativi.
Misure di esito ed esposizione
DESCRIZIONE DELLO STUDIO
Randomization 12 months HPV-DNA
1229
Colpo 1077
Colpo performed 581
HPV-DNA results
+
211 406
-
Colpo performed 369
Returned for 1y follow up
617
30 CIN2+
mRNA + -
Colpo performed 366
24 CIN2+ (adj 28,6)
4* CIN2+
HPV-DNA results
+
268 141
-
Colpo performed 118
Returned for 1y follow up
409
1** CIN2+ (adj 1,2)
mRNA + -
HPVDNA+/Cyto-
Regression 17%
Regression 74%
REGRESSIONE LESIONI IN DONNE HPV-mRNA NEG
7 CIN2+ mRNA neg
*3 CIN2 + 1 CIN3
**1 CIN3
Randomization 12 months HPV-DNA
1229
Colpo 1077
Colpo performed 197
HPV-DNA results
+
58 141
-
Colpo performed 124
Returned for 1y follow up
199
18 CIN2+
p16 + -
Colpo performed 637
15 CIN2+ (adj 17,9)
12* CIN2+
HPV-DNA results
+
345 339
-
Colpo performed 305
Returned for 1y follow up
684
5** CIN2+ (adj 6)
p16 + -
HPVDNA+/Cyto-
Regression ~13%
Regression 56%
REGRESSIONE LESIONI IN DONNE p16/ki-67 NEG
28 CIN2+ p16/ki-67 neg
*7 CIN2 + 5 CIN3
*4 CIN2 + 1 CIN3
Entrambi i test, HPV-mRNA e p16/ki-67, se negativi, sembrano capaci di individuare lesioni CIN2+
con maggiore probabilità di regressione.
FOLLOW UP invece del TRATTAMENTO ?
CONCLUSIONI
utili come MARCATORI PROGNOSTICI per ridurre la sovradiagnosi e il conseguente sovratrattamento
Il test p16/ki-67 potrebbe permettere intervalli più lunghi in donne HPV DNA positive ma negative al test di triage
CONCLUSIONI
Sensibilità citologia 66.1%
115/174 IC95% 58,5-73,1
p16/ki-67 83.9% 146/174 IC95% 77,6-89,0
HPV-mRNA 96% 167/174 IC95% 91,9-98,4)
Test di triage? p16/ki-67negative lesions may be highly regressive +
Immediate colposcopy can be avoided in HPVpositive, p16-negative women, who can be safely managed with repeat screening after 2–3 year intervals
Retesting intervals in HPV16/18-negative women with negative DS results can be safely extended to 3 years.
Intervalli di follow up fino a 3 anni sono sufficientemente sicuri
Le lesioni HPV-mRNA negative sono clinicamente poco rilevanti, per cui il
test HPV-mRNA potrebbe essere un buon candidato per lo screening primario, con un intervallo di screening per le donne mRNA neg da valutare quando sarà completato il follow up a 5 anni dello studio.
CONCLUSIONI
Positività citologia 26,4%
p16/ki-67 38,2%
HPV-mRNA 66.5% Troppo elevata per essere utilizzato come test di triage
Regione Lazio: Alessandra Barca e Francesco Quadrino Istituto Nazionale Tumori Regina Elena, Roma: Maria Benevolo, Amina Vocaturo, e Francesca Rollo Reggio Emilia: Paolo Giorgi Rossi, Laura Bonvicini, Pamela Mancuso, Francesco Venturelli ISPRO Firenze: Francesca Maria Carozzi, Karin Andersson, Simonetta Bisanzi, Stefania Capassoni, Massimo Confortini, Carmelina Di Pierro, Giulia Fantacci, Anna Iossa, Marzia Matucci, Paola Mantellini, Alessandra Mongia, Giampaolo Pompeo, Donella Puliti, e Andrea Baldini CPO Torino: Guglielmo Ronco, Raffaella Rizzolo, Anna Gillio Tos, Laura De Marco, Elena Allia, e Bruno Ghiringhello Trento: Mattia Barbareschi, Paolo Dalla Palma, Salvatore Girlando, Enzo Polla, Teresa Pusiol, Sara Condini, e Emma Bragantini Umbria: Basilio Passamonti, Daniela Gustinucci, Simonetta Bulletti, Elena Cesarini, Nadia Martinelli, Gabriella Vinti, Graziella Principi, Arturo Fabra, Antonella Lucaccioni, Angela Carlani, e Maria Donata Giaimo ULSS 17 Este: Maria Gabriella Penon, Natalina Marchi, Angelo Farruggio, e Alessandra Bertazzo IOV: Annarosa Del Mistro, Helena Frayle, Martina Rizzi, e Silvia Gori Registro Tumori del Veneto: Manuel Zorzi Coordinamento Regionale Screening Oncologici Veneto: Chiara Fedato e Adriana Montaguti
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