D'Ugo SIC 2008

Domenico D’UgoDomenico D’Ugo

110°110° Congresso Nazionale Congresso Nazionale della Società Italiana di Chirurgiadella Società Italiana di Chirurgia

Roma, 19 – 22 ottobre 2008Roma, 19 – 22 ottobre 2008

Fattori prognostici biomolecolariFattori prognostici biomolecolari

Cancro gastricoCancro gastrico

Tecnologie di indagine genicaTecnologie di indagine genica

- Staging molecolare

- “Targeted therapy”

Eventi biomolecolariEventi biomolecolari

- Modificazione genetica – “DNA changes”

Carcinogenesi

- Alterata trasmissione segnale – “Pathways”

Progressione

Medicina traslazionaleMedicina traslazionale

- Fattori genetici e risposta alla chemioterapia

IntroduzioneIntroduzione

Resezione “R0”: davvero curativa ?Sopravvivenza attuariale

Casistica personale (1990-2008)

38%


IntroduzioneIntroduzioneResezione “R0”: davvero curativa ?

Rischio di recidivaCasistica personale (1990-2008)

66%

22.4%

20.4%

39.8%

13.3% Peritoneale

Linfonodale

Ematogena Locoregionale

pT3-4pT3-4

pN3pN3

Istotipo diffuso

Diametro

Sede prossimale

Recidiva doporesezione “curativa”

Fattori prognosticitradizionali


Sola chirurgia

Sola chirurgia


s



Carcinogenesi

- Alterata trasmissione di segnale – “Pathways”

Progressione


“DNA changes”


Instabilità genetica Microsatelliti (MSI)

Ipoacetilazione degli istoni Es. H3 H4 p21

Ipermetilazione del DNA CpG islands

Polimorfismi Es. Single-nucleotide polymorphism (SNP)

Yasui W , Gastric Cancer 2005Yasui W , Gastric Cancer 2005

“DNA changes”


“DNA changes”


Carcinogenesi

- Alterata trasmissione di segnale – “Pathways”

Progressione

“Pathways”


Fattori di crescitaEGF, TGF-alpha, EGF receptor, c-met, K-sam, HER-2, IL-8, VEGF, Ki-67, EZH2

Regolatori del ciclo cellulareCyclin E, p16, p21, p27, p53, RB, CDC25B

Telomeri POT1

Molecole di adesione E-cadherin, dysadherin, CD44v6, CD44v9

Metalloproteinasi della matrice MMP-1, MMP-2, MT1-MMP, TIMP-1

G

“Pathways”



Telomeri POT1



G

“Pathways”


Telomeri POT1



G

Adherence molecules

“Pathways”




G

Adherence molecules

“Pathways”


Fattori di crescitaEGF, TGF-alpha, EGF receptor, c-met, K-sam, HER-2, IL-8, VEGF, Ki-67, EZH2


Telomeri POT1



Yasui W , Gastric Cancer 2005Yasui W , Gastric Cancer 2005

“Pathways”


Fattori genetici

e risposta alla chemioterapia


Fattori genetici erisposta alla CHT


• 5-Fluorouracile (5FU) - relati

• Cisplatino - relati

TS

dUMP dTMP

FdUMP

5 FU

5-Fluorouracile

Inibitore della Timidilato Sintasi (TS)Fattori genetici erisposta alla CHT


Polimorfismo del Gene TS

Promoter enhancer region

2R/2R 2R/3R 2R/2R 3R/3R 116bp 116bp 144bp

28bp 28bp 28bp G/C

Espressione di TS

5` 3`



CTx

P=0.001

OP

P=0.002CTx

OP

Genotype 2rpt/2rpt

Genotype 2rpt/3rpt

CTx

P=0.004

OP

Genotype 3rpt/3rpt

CTx

OP

P=0.93

Gene TS e Chemioterapia NeoadiuvanteFattori genetici erisposta alla CHT


+ DNA

ERCC1

GADD45A

Detoxification:Glutathion-

S-transferases (GST)

Cisplatino

Multipli meccanismiFattori genetici erisposta alla CHT


Gene Terapia # Correlazione

Bibliografia

ERCC1

NAD 38 < espressione > risposta > sopravvivenza

Metzger et al. 1998

NAD 61Nessuna correlazione

Napieralski et al. 2005

palliativa 64 < espressione > risposta > sopravvivenza

Known et al. 2007

GSTP1palliativa 39 < espressione

> rispostaBoku et al.

1998

palliativa 64 < espressione > risposta > sopravvivenza

Known et al. 2007

GADD45A NAD 61 < espressione > risposta > sopravvivenza

Napieralski et al. 2005

Geni Cisplatino – relati e Chemioterapia NeoadiuvanteFattori genetici e

risposta alla CHT


Gene GADD45 e Chemioterapia Neoadiuvante



Discovering molecular pathwaysDiscovering molecular pathwaysFattori genetici erisposta alla CHT


Tecnologie diTecnologie di

indagine genicaindagine genica



Tecnologie di Tecnologie di


Staging molecolare

Tecniche tradizionali

“Northern blot”

Clonaggio di espressione

“Polymerase Chain Reaction” (PCR)

Elettroforesi su gel

“Southern blot”

Immuno-istochimica

cDNA-MicroarrayTecnologie diTecnologie di


Staging molecolare

D’Ugo D , Persiani R, Rausei S, et al EJSO 2008 D’Ugo D , Persiani R, Rausei S, et al EJSO 2008



Staging molecolare

Autore N Metodo Campioni Geni

Hippo2002

26

cDNA-ma (oligo)

chip’s genes (Affymetrix): 6936Cotrol Test: PCR +

IHC

ct / nm(22 / 8)

ct N+ / ct N- / nm(15 / 7 / 8)

Total identified : 9 Tested :

POU Trascription factor*Insuline-like growth factor 2

FibronectinaProcollagen c-endopepidace enhancer

Terashima2005

21

cDNA-ma (oligo)

chip’s genes (Affymetrix): ~12000

Control Test: PCR + IHC

ct / nm(21 / 6)

ctN+ / ctN- / nm(16/5/6)

Total identified : 3 Tested :Maspin*

Nonspecific crossreacting antigenCarcinoembryonic antigen

Teramoto2005

54

cDNA-ma (oligo)

chip’s genes (in house): 1289

Control Test: PCR

ct better surv / ct worse surv

(27 / 27)ctN+ / ctN-

(35 / 18)

Total identified : 99Tested :

Clusterin*Survivin*

Marchet2007

32

cDNA-ma

chip’s genes (Amersham): 5541

Control Test: PCR

ct N+ / rs(21)

ct N- / rs(11)

Total identified : 136Tested :

Bcl2-interacting killer*Eukaryotic translation initiation factor 5A2

Aurora kinase B/serine-hreonine kinase-12

D’Ugo2008

30

cDNA-ma

chip’s genes (Affymetrix): 8793

Control Test:

PCR

ctN+ / ctN-

(22 / 8)

Total identified : 35

Tested :

Claudin 4*

Matrix metalloproteinase 2Transforming growth factor beta BP

Chemokine (C-C motif) ligand 21

Serial Analysis of Gene Expression (SAGE)



Staging molecolare





Staging molecolare“Targeted therapy”



“Targeted therapy”

SAGE



“Targeted therapy”

Prospettive futureProspettive future

Prospettive futureProspettive future ““A new paradigm proposed

for epithelial cancer””

Task Force per lo studio delle cellule staminali

nei tumori solidi

Azzena Gian Battista Barone Carlo Antonio Mario Bassi Pier Francesco Capelli Arnaldo Cittadini Achille Renato Maria Costamagna Guido D’Ugo Domenico Galeotti TommasoGasbarrini Giovanni Battista Gasbarrini Antonio Magistrelli Paolo Maira Giulio Masetti Riccardo Michetti Fabrizio Nuzzo Gennaro Paludetti Gaetano Riccardi Riccardo Tonali Pietro Attilio Dipartimento di NeuroscienzeDipartimento di Neuroscienze

Istituto di Fisiologia Istituto di Fisiologia

Unità Operativa di Oncologia MedicaUnità Operativa di Oncologia Medica

Unità Operativa di UrologiaUnità Operativa di Urologia

Istituto di Anatomia PatologicaIstituto di Anatomia Patologica

Istituto di Patologia Generale - Centro Giovanni XXIIIIstituto di Patologia Generale - Centro Giovanni XXIII

Unità Operativa di Endoscopia Digestiva ChirurgicaUnità Operativa di Endoscopia Digestiva Chirurgica

Unità Operativa di Chirurgia Generale 1 Unità Operativa di Chirurgia Generale 1

Istituto di Patologia GeneraleIstituto di Patologia Generale

Istituto di Medicina Interna e Geriatria Istituto di Medicina Interna e Geriatria

Istituto di Patologia Speciale Medica e Semeiotica Medica Istituto di Patologia Speciale Medica e Semeiotica Medica

Unità Operativa di Chirurgia Generale 2Unità Operativa di Chirurgia Generale 2

Istituto di NeurochirurgiaIstituto di Neurochirurgia

Unità Operativa di Chirurgia SenologicaUnità Operativa di Chirurgia Senologica

Istituto di Anatomia Umana e Biologia CellulareIstituto di Anatomia Umana e Biologia Cellulare

Unità Operativa di Chirurgia EpatobiliareUnità Operativa di Chirurgia Epatobiliare

Istituto di OtorinolaringoiatriaIstituto di Otorinolaringoiatria

Divisione di Oncologia PediatricaDivisione di Oncologia Pediatrica

Sica Gigliola (coordinatore)(coordinatore) Istituto di Istologia ed EmbriologiaIstituto di Istologia ed Embriologia

D'Ugo SIC 2008

Health & Medicine

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