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  • Un Test Cutaneo negativo pu essere : Realmente negativo; Falsamente negativo per cause: * inerenti allindividuo : - cute atrofica o poco irrorata o edematosa, - iporesponsivit da recente reazione allergica, - somministrazione di farmaci interferenti (anti-h1, ecc), - iporesponsivit da pregresse prove cutanee, - alterazione del circolo, * inerenti allallergene: - mancato impiego dellallergene specifico, - estratto troppo diluito o inattivo, Da sindrome clinica non immunologica: - alimenti, farmaci e prodotti del loro metabolismo, Da allergia recente : * sensibilizzazione temporaneamente limitata alle mucose delle vie respiratorie, ecc., Da allergia localizzata : * sensibilizzazione esclusiva delle vie respiratorie, ecc.
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  • Un Test Cutaneo positivo pu : Avere significato etiologico in rapporto alla manifestazioni cliniche del paziente; Non avere significato etiologico rispetto alla sindrome in atto ; Essere falsamente positivo.
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  • PRICK TEST Un test cutaneo positivo non implica necessariamente una allergia clinicamente manifesta verso un allergene La negativit del test in presenza di una anamnesi sospetta per una rinite o asma allergica, impone un ulteriore approfondimento diagnostico
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  • Determinazione IgE totali e specifiche Determinazione di anticorpi non-IgE verso allergeni Dosaggio di mediatori chimici flogogeni Dosaggio di immunocomplessi Dosaggio di frazioni complementari Eosinofili su secreto nasale TEST IN VITRO
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  • Ricerca delle IgE IgE Totali IgE Specifiche
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  • Le IgE totali costituiscono lo 0,004% di tutte le immunoglobuline. le immunoglobuline. Concentrazione sierica : Adulti non atopici: 10 - 100 KU/l Neonati: alcune KU/l (aumenta con gli anni fino a raggiungere con gli anni fino a raggiungere i valori dell'adulto verso i 10 anni i valori dell'adulto verso i 10 anni di et). di et).
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  • Dosaggio delle IgE Totali Tecnica Immunoenzimatica: analogo principio, unica differenza consiste nel marcatore che in questo caso un enzima e non un isotopo radioattivo. Tecnica Radioimmunologica (es. PRIST= Paper Radio Immuno Sorbent Test):
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  • Il Dosaggio delle IgE Totali va attentamente e criticamente attentamente e criticamente valutato valutato
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  • Valori aumentati di IgE totali Valori aumentati di IgE totali si possono riscontrare: nelle sindromi allergiche IgE-mediate, senza distinguere: - le diverse malattie allergiche, - il tipo di allergene, - il numero di allergeni coinvolti, - la presenza o meno nell ambiente dell'allergene, -l'aver praticato o meno immunoterapia specifica, in condizioni morbose non allergiche quali: - Plasmocitoma-IgE, - Connettiviti; - Sindromi da deficienza immunologica congenita (S. da Iper-IgE, Deficit di IgA,S. di Wiskott-Aldrich, S. di Di Gorge, S. di Nezelof); - AIDS, - Parassitosi intestinali, in condizioni fisiologiche (es. fumatori) Valori normali di IgE totali Valori normali di IgE totali tuttavia non permettono di escludere la diagnosi di allergopatia.
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  • Il dosaggio delle IgE totali non consente di formulare una diagnosi patogenetica di formulare una diagnosi patogenetica di sindrome allergica sindrome allergica Il dosaggio delle IgE totali pu risultare utile in studi familiari di tipo prospettico, in quanto nei studi familiari di tipo prospettico, in quanto nei primi anni di vita fornisce informazioni circa primi anni di vita fornisce informazioni circa la predizione di atopia la predizione di atopia Quindi:
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  • Ricerca delle IgEs IgE Specifiche
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  • D Dosaggio delle IgE specifiche Tecnica basata sulla marcatura delle IgE( es.RAST; ELISA) Tecnica basata sulla marcatura dellallergene ( es.Metodica a Cattura)
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  • Il dosaggio delle IgE specifiche riservato a reazioni allergiche IgE mediate: Si pu eseguire, dopo aver effettuato le cutireazioni, per ottenere conferma diagnostica Possono essere eseguite, al posto dei test cutanei, quando questi risultino poco affidabili per: iporeattivit cutanea legata a: - et (primi anni di vita, et avanzata) - farmaci (anti h-1, steroidi, ecc.) - precedenti reazioni cutanee intensamente positive - recenti reazioni allergiche alterata reattivit cutanea (ipo o iperreattivit) legata a: - malattia allergica o extraallergica in fase acuta e grave - affezioni cutanee estese
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  • Il Dosaggio delle IgE Specifiche va attentamente e criticamente attentamente e criticamente valutato valutato
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  • Il livello di IgE specifiche non sempre correlato con la gravit della sindrome clinica correlato con la gravit della sindrome clinica la positivit delle IgE specifiche pu non rivestire significato eziologico nei confronti della malattia in atto (es. significato eziologico nei confronti della malattia in atto (es. Cross-reattivit con alimenti vegetali, che si riscontra spesso nei Cross-reattivit con alimenti vegetali, che si riscontra spesso nei pollinosici, senza che vi sia alcuna manifestazione clinica dopo pollinosici, senza che vi sia alcuna manifestazione clinica dopo ingestione di quegli alimenti). ingestione di quegli alimenti). Il dosaggio di IgE specifiche ha sensibilit e specificit inferiori rispetto ai test cutanei specificit inferiori rispetto ai test cutanei
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  • Le tecniche di dosaggio delle IgE specifiche misurano il legame tra le IgE e lallergene, che condizionato misurano il legame tra le IgE e lallergene, che condizionato da: da: quantit di allergene disponibile quantit e avidit degli anticorpi specifici (anche non-IgE) presenti presenti Ci comporta alcuni problemi : Legame aspecifico tra IgE e allergene in fase solida : - impiego di allergeni scarsamente purificati (es. alimentari), - impiego di allergeni scarsamente purificati (es. alimentari), - sieri con alti livelli di IgE totali; - sieri con alti livelli di IgE totali; con valori delle IgE specifiche pi elevati del reale o con false con valori delle IgE specifiche pi elevati del reale o con false positivit; positivit; Interferenza di anticorpi specifici non-IgE (es. IgG- specifici ) che competono con le IgE nei confronti dellallergene specifici ) che competono con le IgE nei confronti dellallergene in fase solida (es. soggetti in immunoterapia), con valori delle IgE in fase solida (es. soggetti in immunoterapia), con valori delle IgE specifiche meno elevati del reale o con false negativit. specifiche meno elevati del reale o con false negativit.
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  • Nel complesso i Test Sierologici per la determinazione delle IgE specifiche sono determinazione delle IgE specifiche sono affidabili affidabili La loro concordanza con i test cutanei elevata, soprattutto per gli allergeni da elevata, soprattutto per gli allergeni da inalazione (circa 89,5% per i pollini). inalazione (circa 89,5% per i pollini). I casi discordanti con negativit dei test cutanei e positivit dei test sierologici sono cutanei e positivit dei test sierologici sono rari, ci accade per: rari, ci accade per: errori di esecuzione o di valutazione (false positivit), ruolo delle IgG-STS.
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  • Ricerca delle IgEs IgE Specifiche verso singole molecole
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  • PRODUZIONE DI MOLECOLE ALLERGENICHE RICOMBINANTI
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  • PRODUZIONE DI MOLECOLE ALLERGENICHE RICOMBINANTI
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  • NOMENCLATURA Fel d 1 Genere SpecieCronologia Isoallergeni IDENTICHE FUNZIONI BIOLOGICHE PESO MOLECOLARE SIMILE >67% IDENTITA DELLA SEQUENZA AA..01 varianti 02
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  • ALLERGENI RICOMBINANTI NELLA DIAGNOSTICA Discrepanza tra reattivit IgE sieriche e attivit biologica Capacit di legame con IgE sieriche Attivit allergenica Espressione degli epitopi E. lineari (continui) E. conformazionali (discontinui)
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