Replicazione delle estremità

•Replicone circolare

•Il replicone lineare può essere convertito in circolare

•Strutture specifiche all’estremità

•Intervento di una proteina che si lega all’estremità

•Estremità di lunghezza variabile

Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

AATTAGTATGTTGTAACTAAAGTTTAATCATACAACATTGATTTCA

Termineforca 2

Termineforca 1

Confluenzaforche

GATCTNTTNTTTT TTATNCANA

245 bp

Forca direplicazione 2

Forca direplicazione 1

Origine

Il cromosoma di E.coli è costituito da un unico replicone bidirezionale

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Replicazione di DNA circolari: il circolo rotante

5'3'

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ORGANISMO ORIGINE del DNA UNITA' RIPETITIVA 5'-3'

Tetrahymena, Paramecium macronucleo CCCCAA (Ciliati olotrichi)

Stylonichia, Oxytricha macronuclero CCCCAAAA (Ciliati ipotrichi)

Trypanosoma, Leishmania minichromosomi CCCTA (Flagellati)

Physarum, Dictyostelium rDNA CCCTA (Mixamoebae)

Saccharomyces cromosomi CCcACAcaca

Arabidopsis cromosomi CCCTAAA

Homo sapiens cromosomi CCCTAA

Sequenze ripetute in tandem nei telomeri

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La telomerasi estende l’estremita’sporgente

Quando e’ stato sintetizzato sufficienteDNA, puo’ essere innescato un nuovoFrammento di Okazaki

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Arthur Kornberg, 1970

5'5'3'

P

HO

P

OH

P P P

OH

3'

5'

5'

P

HO

P

OH

3'

5'

5'

3' + PP

L’attivita’ delle DNA polimerasi

Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

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Le tre DNA Polimerasi di E.coli

Struttura Dalton Composizione Numero/cellula

Attività enzimatiche Allungamento 5'-3' Esonucleasi 3'-5' Esonucleasi 5'-3'

Mutanti Loci mutanti Fenotipi dei mut. Letalità

109,000monomero400

sisisi

polAriparazione difet.vitalità ridottasolo quando difetta5'-3' esonucleasi

>250,000eteromultimero10-20

sisino

pplC, dnaN, dnaZX, dnaQ, dbaTpreviene replicazioneletale condizionale

120,000monomero?

sisino

polBriparazione difet.senza effetto

DNA Polimerasi I DNA Polimerasi II DNA Polimerasi III

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Fedeltà della replicazione

•Controllo presintetico

•Correzione di bozze

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3’

5’

5’

3’

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