Hacia dónde vamos en el laboratorio de embriología
Jose Antonio Castilla Alcalá
UGC Laboratorio Clinico y UGC de Obstetricia y Ginecologia
HU Virgen de las Nieves, Granada
MasVida Reproducción, Sevilla
CEIFER, Granada
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Un futuro impresionante
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Un Futuro decepcionante
Ron & Go VisteCheap
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Objetivo
¿Hacia
donde
vamos?
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Objetivos • Sistemas de Calidad
– Formación, competencia certificación
– Indicadores
– Trazabilidad
• Automatización – Cultivo
– Evaluación embrionaria
– Vitrificación
• Estandarización
• Seguridad – Transferencia de embrion únio
– DGP: CGH y Blasto
– Screening genetico donantes y parejas
• Globalizacion
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
DIRECTIVA 2006/17/CE DE LA COMISIÓN de 8 de febrero de 2006 por la que se aplica la Directiva 2004/23/CE del Parlamento Europeo y del Consejo en lo relativo a determinados requisitos técnicos para la donación, la obtención y la evaluación de células y tejidos humanos
RD 1301/2006
Ley 14/2006
SISTEMAS DE GESTION DE CALIDAD EN EL LRHA
Norma PNE 179007
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
http://www.boe.es/
PNE 179007: Servicios Sanitarios. Sistema de
gestión de la calidad para laboratorios de
reproducción asistida.
Publicación oficial de la norma UNE:
año 2013
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
NORMATIVA UNE: Sistema de gestión de la calidad para
laboratorios de reproducción humana asistida.
UNIDADES DE RHA
NORMA UNE 179007:2013
• Normativa específica del laboratorio de RHA
• Amplia la Norma ISO 9001.
• Recoge las inquietudes manifestadas por los profesionales
dedicados al LRHA
• Avales: Sociedades Científicas, Unidades de RHA,
administración, universidades…
Documento final, fruto del consenso
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
http://www.google.es/url?sa=i&rct=j&q=iso+9001&source=images&cd=&cad=rja&docid=-q-JzPmCLxOk8M&tbnid=if19t9Kcf1tYjM:&ved=0CAUQjRw&url=http://www.softexpert.es/noticias.php?nid=498&ei=LrduUb2eA6bI0QXnlICQDA&bvm=bv.45368065,d.d2k&psig=AFQjCNF_G6MVsMaaPmTCbZc8bOsRfFZYew&ust=1366296683017734
GT9 ASEBIR: Manuel Ardoy (Coordinador)
AENOR: Cristina Hernán (Secretario)
AENOR: Luis Enrique Carretero y Anselmo Martín (Dirección Técnica de Certificación)
ASEBIR-SEF: Nereyda Ortiz (Coordinador)
ASEBIR: Antonia Expósito
ASEBIR: Antonio González Utor
ASESA. Luis Bassas
CEIFER Control y Calidad: Abel Carmona
CEIFER Control y Calidad: Sandra Ortiz
Centro Médico Téknon: Mark Grossmann
Clínica Tambre: Marta Gago
Colegio Biólogos de Cataluña: Marta Luna García
Grupo Anacer: Fernando Marina y Pedro Delgado
Grupo Hospitalario Quirón: Eva López
Grupo IVI: María José de los Santos
Centro de Medicina Embrionaria: Silvia Fernández
Instituto Bernabéu: Jorge Ten
Instituto Universitario de Evaluación Sanitaria: José Simón
Instituto Universitario Dexeus: Montserrat Boada
SEF: Isabel Pons
SEF: José Antonio Castilla
SEF: Nagore Uriarte
Soc. Española de Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Carmen Mar
Soc. Española de Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Silvia Izquierdo
Universidad Politécnica de Valencia: Inmaculada Molina
NORMA UNE 179007:2013 Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
• Definir y establecer indicadores de calidad, para los procesos
operativos.
8.2 Seguimiento y medición
8.2.3 Seguimiento y medición de los procesos
La organización (el laboratorio) DEBE:
Sistema de Gestión y Medición del Proceso:
Indicadores Comunes de Calidad
NORMA UNE
179007:2013 Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Sistema de Gestión y Medición del Proceso:
Indicadores Comunes de Calidad
FIV/ICSI:
• Porcentaje de fecundación ovocitaria.
• Tasa de implantación.
Ovocitos propios/donados y fresco/descrioconservados
• Número preembriones transferidos por embarazo.
• Porcentaje de embriones utilizados.
Ovocitos propios/donados
Transferencia preembriones descrioconservados:
• Porcentaje de supervivencia.
Ovocitos propios/donados y preembriones/blastocistos
• Porcentaje de gestación clínica por transferencia.
• Tasa de implantación.
Ovocitos propios/donados
Porcentaje de supervivencia ovocitos descrioconservados.
Ovocitos propios/donados
LRHA debe establecer, como mínimo, los siguientes indicadores de proceso:
NORMA UNE
179007:2013 Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
UGC Laboratorio Clínico, HU Virgen de las Nieves, Granada Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
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ESPECIFICACIONES DE CALIDAD Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
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Registro SEF y MSPSI
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Con ovocitos propios
Porcentaje fecundación normal (ICSI) SEF 2009
Nivel
Deseable
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Con ovoc.donados
Porcentaje fecundación normal (ICSI) SEF 2009 Nivel
Deseable
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Especificacion calidad: nivel deseable
% Fecundacion ovocitaria 2009-2012
ESTABLE
Cambios técnicos NO significativos
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Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Especificacion calidad: nivel deseable
Supervivencia embrionaria crioconservacion
2009-2012
NO ESTABLE
Cambios tecnicos significativos:
vitrificacion
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DIRECTIVA 2006/17/CE DE LA COMISIÓN de 8 de febrero de 2006 por la que se aplica la Directiva 2004/23/CE del Parlamento Europeo y del Consejo en lo relativo a determinados requisitos técnicos para la donación, la obtención y la evaluación de células y tejidos humanos
RD 1301/2006
Ley 14/2006
SISTEMAS DE GESTION DE CALIDAD EN EL LRHA
Norma PNE 179007
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http://www.boe.es/
EUROCET
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Futuras Directivas Europeas Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Codigo Unico Europeo (40 digitos)
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Codigo Unico Europeo (40 digitos)
SEMEN
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Sistema de etiquetado en Embriología
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Sistema de etiquetado en Embriología
Etiqueta Radiofrecuencia
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Sistema de etiquetado en Embriología
Etiqueta Radiofrecuencia
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
RFID a -196°C
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Sistema de etiquetado en Embriología
Chip de sílice
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
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Seguridad crioconservación: esterilización Nitrogeno líquido
Vitrificación
Tanques
almacenamiento
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Futuro: Medios de cultivo
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Futuro: Sistemas de cultivo
Presente
Futuro
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Microfluidos:
FIV Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Microfluidos:
Cultivo embrionario Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
AUTOMATIZACION: selección embrionaria Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
¿Qué hacíamos antes?
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Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
¿Qué hace la morfocinética embrionaria?
40
> 1500 imágenes en 3 dias de cultivo
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Sistemas time-lapse para evaluar la calidad de los embriones
EmbryoScope® de Unisense Fertilitech
Primo Vision de Vitrolife Eeva™ de Auxogyn
http://www.fertilitech.com/ http://www.vitrolife.com/en/Fertility/Products/Primo-Vision-Time-Lapse-System/
http://www.auxogyn.com/eeva.php
41
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Montag et al., 2014
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Montag et al., 2014
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UTILIDAD MORFOCINETICA
ESGRE
• Gestación espontánea (n= 9)
• 2 ciclos cancelados (n= 1)
• Riesgo de SHO (n= 3)
• Sólo 1 embrión para TE (n=
12)
• No ovocitos maduros (n= 1)
• Motivos personales (n= 1)
Analizadas
Grupo
control
Pérdidas
57 pacientes que se
realizaron eSET con
criterios de selección
morfológicos
n= 27
Elegidas según criterios de
inclusión (n = 90)
Rechazan eSET
(n=6)
eSET (n=84)
n= 57
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
RESULTADOS ESGRE
Aumento relativo en fresco (eSET)= 20,3%
¿Elegimos mejor el primer embrión?
43,836,4
17,623,7
0
10
20
30
40
50
% ge
st/fre
sco
% ge
stac/
crio
TE
Morfocinética Morfología
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
RESULTADOS ESGRE
52,9 50
0
10
20
30
40
50
60
Tasa gestación
acumulada/punción
Grupo Morfocinética Grupo Morfología
No
significativo
Aumento relativo en tasa de gestación acumulada = 5,8%
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Automatización selección embrionaria
Técnica
•Genómica
•Transcriptómica
•Proteómica
•Metabolómica
Donde aplicarlo
• Liquido folicular
• Célula Granulosa
• Medio de cultivo
embrionaria
Bioinformática
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Automatización: selección embrionaria
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
AUTOMATIZACION: congelación semen
• Rellena
• Sella
• Etiqueta
Pajuela Semen
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
AUTOMATIZACION: ICSI Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Automatización ICSI Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Automatización ICSI Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
AUTOMATIZACION: ICSI Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
AUTOMATIZACION: vitrificación embrionaria Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Diagnóstico genetico
Preimplantacional (DGP)
• Momento de Biopsia embrionaria
• Técnica de análisis genético
• Material a estudiar
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Momento de Biopsia embrionaria
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Momento de Biopsia embrionaria
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Diagnóstico genetico
Preimplantacional (DGP)
• Momento de Biopsia embrionaria
• Técnica de análisis genético
• Material a estudiar
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Hibridación Genómica comparada
(CGH)
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
CGH elimina el efecto adverso de la edad materna
Munné et la., 2013
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Bar-coding + Secuenciación genomica completa (NGS)
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Different platforms Secuenciacion genómica completa
1º generación
2º generac.
3º
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Nanopore sequencing Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Diagnóstico genetico
Preimplantacional (DGP)
• Momento de Biopsia embrionaria
• Técnica de análisis genético
• Material a estudiar
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
DGP sin biopsia (no invasivo) Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Globalización: Donantes Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Globalización: Donantes • Numero máximo de hijos por donante
• ¿Dónde esta el limite?
0 50 100 150 200 250
We
igh
t
Number of offspring for a sperm donor
Availability of donors
Operationalconsiderations
Ethical considerations
Psychologicalconsiderations
Genetics
Legal considerations
Janssens et al., 2015
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Globalización: Ètica
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
70
www.ivf-worldwide.com/ivf-directory/
www.nightearth.com
Globalización: Laboratorio FIV en paises en desarrollo
Pero ¿y Africa?
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Infection-related tubal block Asia
Latin America Africa
39 %
44 % 65 - 85 %
Tubal factor : why ?
Sexually transmitted diseases
Post-partum infections
Illegal abortions Urbanisation - mobility
Polygamy
Resistant micro-organisms …
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Compton Foundation
http://nnadofoundation.webs.com/
What about funding ?? Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
http://www.macfound.org/http://www.ippf.org/en/http://www.packard.org/http://www.gatesfoundation.org/Pages/home.aspxhttp://www.cadefoundation.org/index.phphttp://www.hewlett.org/http://www.facebook.com/album.php?profile=1&id=113222279814
Step 1: Set-up and equilibration
Citric acid + sodium bicarbonate + water
produces carbondioxide to equilibrate
culture medium to pH 7.25- 7.35
6.3 - 7.1 % CO2 12 - 13% O2
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Step 2: Insemination
QuickTime™ en een-decompressor
zijn vereist om deze afbeelding weer te geven.
Insertion of oocytes and sperm cells: 1 oocyte per
tube with 1000-5000 good motile sperm cells
Day 0
QuickTime™ en een-decompressor
zijn vereist om deze afbeelding weer te geven.
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Step 3: Fertilisation check
Fertilisation check through
the glass tube wall
Day 1
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Step 4: Embryo visualisation
Day 2 Day 3
Embryo transfer
Day 2 Day 3
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Conclusiones
• Calidad
• Seguridad
• Estandarizacion
• Innovación
• Globalización
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Futuro: Profesionales
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014
Ron & Go VisteCheap
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