Mechanisms of Disease

Cardiac PlasticityJoseph A. Hill, M.D., Ph.D., and Eric N. Olson, Ph.D.N Engl J Med 2008;358:1370-80.

Condizioni che provocano il rimodellamento del cuore e ne causano atrofia o ipertrofia. A seconda dei casi il rimodel-lamento può essere normale o patologico. Il rimodellamento patologico si associa alla tendenza allo scompenso, alla dilatazione ventricolare, alla disfunzione sistolica e a modificazioni elettrofisiologiche che provocano aritmie ventricolari maligne.

Limiti dell’atrofia e dell’ipertrofia

cardiaca: il cuore può andare

incontro ad aumento o riduzione

considerevole del volume, con un

ambito dinamico del 100%

L’ipertrofia di un organo è caratterizzata da un aumento delle dimensioni delle cellule.

Nell’accrescimento del cuore provocato dall’esercizio o dalla gravidanza, la struttura e

la funzione sono normali e non vi è associazione con l’insufficienza cardiaca.

Nell’ipertrofia che si verifica nell’ipertensione, nell’obesità, nelle malattie valvolari,

dopo un infarto o in seguito ad alterazioni geniche delle proteine contrattili, vi sono

alla base alterazioni metaboliche, strutturali e funzionali: il metabolismo vira verso la

glicolisi (normalmente prevale il consumo di acidi grassi), i sarcomeri si disorganizzano,

le correnti di calcio sono alterate, si riduce la contrattilità, si perdono miociti che

vengono sostituiti da fibroblasti, compare disfunzione sistolica e/o diastolica e un

“rimodellamento elettrico” (es. alterazioni dell’espressione e/o della funzione delle

pompe ioniche). Tutto ciò rappresenta una serie di condizioni derivanti dalla plasticità

miocardica.

L’accrescimento del cuore segue, classicamente, tre modelli morfologici:

Rimodellamento concentrico: aumento dello spessore (relativo) elle pareti senza

aumento della massa;

Ipertrofia concentrica: aumento dello spessore (relativo) e della massa con scarso

aumento di volume; aggiunta di sarcomeri in parallelo e accrescimento laterale delle

cellule: causa frequente l’ipertensione arteriosa e l’esercizio isometrico;

Ipertrofia eccentrica: aumento della massa e del volume delle camere; lo spessore

(relativo) può essere normale, aumentato o diminuito: cause esercizio isotonico,

sovraccarico di volume, perdita di tessuto funzionante per infarto; aggiunta di

sarcomeri in serie e allungamento dei miocardiociti.

Fra gli atleti, quelli che hanno il cuore più grande sono i rematori, i ciclisti e gli sciatori

di fondo; lo spessore di parete in genere non supera 1,3 cm (limite superiore per

sedentari 1,1 cm). Gli allenamenti stagionali provocano variazioni stagionali delle

dimensioni del cuore.

L’ipertrofia cardiaca da gravidanza

regredisce in alcuni mesi dopo il parto.

CURIOSITA’ INTERESSANTE: Nel Pitone

di Burma il consumo di un pasto

abbondante (vedi Piccolo Principe: il

pitone che ha mangiato un elefante) si

accompagna ad un aumento del

metabolismo di circa 7 volte ed uno

straordinario aumento del 40% della

massa cardiaca dopo sole 48 ore dal

pasto; tutto ritorna alla norma in 28

giorni.

Al contrario delle modificazioni fisiologiche del cuore, l’ipertrofia patologica è

stimolata da attivazione neuroumorale, da un sovraccarico emodinamico cronico o

altri fattori di stress per il cuore. Anche il rimodellamento patologico può essere

intenso e rapido: la sintesi di MHC (myosin heavy chain) aumenta del 35% poche ore

dopo l’esposizione ad un sovraccarico; l’iperespressione di un particolare gene (Akt1)

fa aumentare la massa cardiaca del 60% in sole 2 settimane.

Nell’ipertrofia cardiaca, le dimensioni dei miocardiociti aumentano e i sarcomeri sono

fortemente organizzati (grosse banda al microscopio ottico). L’ipertrofia da esercizio

tipicamente non comporta anche un aumento del collagene miocardico.

Confrontando l’ipertrofia da esercizio con quella indotta dall’ipertensione i recettori

dell’ormone tiroideo e le diverse isoforme della catena pesante della miosina sono

regolati in maniera opposta. Le isoforme della miosina sono diverse, e questo può

contribuire a ridurre la contrattilità nelle forme patologiche. In ratti sacrificati dopo un

allenamento fisico i markers dell’ipertrofia (geni che caratterizzano il fenotipo

ipertrofico) sono inibiti.

Gli stimoli di pressione e volume (aumentati) inducono un’espressione diversa di beta-

miosina, actina alfa scheletrica e ATPasi del Ca2+ del reticolo sarcoplasmico, anche con

simili livelli di ipertrofia. Si è inoltre dimostrato che quello che determina il fenotipo

ipertrofico è la natura dello stimolo, non il fatto che sia continuo o intermittente.

Visto che l’accrescimento del cuore ad un certo punto si arresta anche se gli stimoli

persistono e che regredisce quando gli stimoli vengono rimossi, vi devono essere

anche dei meccanismi che si oppongono all’aumento di volume delle cellule. È

improbabile che si tratti semplicemente della rimozione degli stimoli. Nel muscolo

scheletrico e cardiaco l’attivazione della cascata di segnali che attivano la crescita è

accompagnata dall’inibizione di vie che promuovono la proteolisi e il contrario accade

nelle condizioni che portano all’atrofia. La plasticità dei miocardiociti è spesso

accompagnata dalla reinduzione di un “programma genetico fetale”, nel quale

l’espressione genica assomiglia a quella che caratterizza lo sviluppo embrionale.

Quando il cuore si scompensa, le pareti ventricolari si assottigliano a causa di una

combinazione di proteolisi e morte cellulare. Si era pensato che l’irrorazione

sanguigna fosse insufficiente per il miocardio ipertrofico e quindi si sviluppassero

condizioni di ischemia, ma questa ipotesi non è stata confermata da tutti gli studi. Si

pensa anche all’alterazione delle proteine contrattili, rimodellamento della matrice

extracellulare e fibrosi e variazioni dell’attivazione dei recettori beta adrenergici. Più

recentemente si è parlato di autofagia, un fatto che riguarda il riciclo delle proteine e

degli organelli intracellulari, nella risposta dei miocardiociti allo stress e nella

transizione verso l’insufficienza.

Diminuzioni della massa cardiaca a livelli ben inferiori al normale si verificano in

condizioni di assenza di gravità, nell’allettamento prolungato ed in altre condizioni di

scarico ventricolare. In uno studio su soggetti sani allettati per 12 settimane la massa

del ventricolo sinistro diminuiva del 15%; in un altro studio, che probabilmente ha

raggiunto il limite minimo di atrofia cardiaca, si è documentata una riduzione del 25%

della massa in pazienti con lesioni spinali che non potevano muoversi

Lo stress meccanico induce segnali paracrini e autocrini regolando la sintesi e la

secrezioni di potenti fattori di crescita, fra cui il fattore insulino simile 1 (IGF 1),

angiotenina II ed endotelina 1, sia in colture cellulari, sia in pazienti con stenosi

aortica. Lo stress meccanico stimola direttamente i recettori per l’angiotensina II,

senza che vi sia un aumento della stessa.

Risposte cellulari alle alterazioni del carico.

Una complessa sequenza di risposte allo stress

neuroumorale e biochimico termina nella

regolazione di geni dell’ipertrofia e della

crescita cellulare

Segnali extracellulari che scatenano risposte intracellulari nel miocardiocita. Questi segnali attivano e sbloccano la trascrizione di geni che presiedono alla crescita cellulare e al rimodellamento. Nonostante la complessità, vi sono dei nodi comuni, sulla superficie cellulare, nel citoplasma e nel nucleo, che potrebbero essere oggetto di interventi terapeutici

L’ipertensione è il più importante fattore di rischio di insufficienza cardiaca, a causa

del ruolo fondamentale dell’accrescimento miocardico ipertrofico nello sviluppo

dell’insufficienza cardiaca. Lo schema prevalente della malattia cardiaca ipertensiva

vede prima l’ipertrofia concentrica del ventricolo sinistro, seguita da dilatazione

ventricolare e insufficienza contrattile. Vi è una relazione fra l’aumento quantitativo

della massa cardiaca e il manifestarsi di situazioni cliniche negative. Oltre alla massa, è

importante il tipo di rimodellamento cardiaco: con il rimodellamento concentrico

compare una lieve disfunzione sistolica, mentre il malfunzionamento è più rilevante

nell’ipertrofia eccentrica.

L’ipertrofia dei miocardiociti è la risposta cellulare allo stress biomeccanico, sia esso intrinseco come nell’ipertensione e nei vizi valvolari, o estrinseco come nella cardiomiopatia ipertrofica familiare. L’ipertrofia cardiaca ha l’effetto di normalizzare l’aumento della tensione di parete eliminando lo stimolo iniziale. Gli aspetti caratteristici sono un aumento delle dimensioni dei miocardiociti, un aumento della sintesi proteica e una migliore organizzazione dei sarcomeri. Queste modificazioni del fenotipo cellulare sono precedute e accompagnate dalla reintroduzione del cosiddetto programma genetico fetale.

L’ipertrofia in risposta a segnali patologici è di tipo adattativo per mantenere la gettata cardiaca a fronte delle condizioni alterate, ma alla lunga si associa ad un aumento significativo del rischio di morte improvvisa e ad una progressione verso l’insufficienza cardiaca.

Il processo ipertrofico non è completamente benefico. Si solleva il problema se l’ipertrofia da stress miocardico sia un bene oppure se sia di tipo adattativo soltanto in principio ma porti alla perdita funzionale del cuore nel lungo periodo. Altrettanto importante è la differenza fra ipertrofia fisiologica, quella che accompagna lo sviluppo post natale e quella indotta dall’esercizio, e l’ipertrofia patologica. Interventi per favorire la prima ed inibire la seconda potrebbero avere un ovvio valore terapeutico.

VIE MOLECOLARI DELL’IPERTROFIA MIOCARDICAIl sistema calcineurina-NFAT. La calcineurina è una fosfatasi serina-treonina, espressa in numerosi tessuti e composta da una subunità catalitica A e una regolatrice B. La calcineurina defosforila fattori di trascrizione della famiglia dei NFAT (nuclear factor of activate T cells), provocando la traslocazione del NFAT nei nuclei e l’attivazione dei geni della risposta immunitaria. Sembra accertato che questa via stia alla base anche dell’ipertrofia cardiaca. Il ruolo della calcineurina nell’ipertrofia dovuta alle cause più comuni sembra accertato. Inoltre, questa via si intreccia con altri importanti segnali che provocano ipertrofia, come quelli controllati dalla glicogeno sintetasi e dal MAPK.Il fatto che la calcineurina sia coinvolta in molti, se non tutti, i processi ipertrofici patologici del cuore ne fa un ovvio bersaglio terapeutico, ma non è chiaro se sia necessario un livello minimo di calcineurina per evitare l’atrofia, dato che essa è implicata anche nell’ipertrofia fisiologica da esercizio.

PI3K/Akt/GSK-3-Dependent Signaling. PI3Ks = fosfoinositide 3 chinasi. È una famiglia di enzimi che attivano chinasi proteiche e lipidiche e sono importanti nell’accrescimento, nella sopravvivenza e nella proliferazione delle cellule.

Il PI3K regola la risposta ipertrofica dei miociti piuttosto che la loro proliferazione. Non ha effetti negativi sulla contrattilità. Numerosi studi basati su ratti transgenici che esprimono in eccesso o in difetto questi enzimi. Uno dei bersagli principali di PI3K è la chinasi serina/treonina Akt, che è attivata attraverso vari stadi di fosforilazione. L’ipertrofia regolata da questi fattori è mediata da GSK-3 e dal “mammalian target of rapamycine (mTor). La rapamicina è un immunosoppressore e quando si lega a mTor blocca la sintesi proteica. Nel’insieme, risulta che GSK-3 integra i segnali di diverse vie ipertrofiche e dev’essere disattivata per la comparsa dell’ipertrofia.

Controllo trascrizionale dell’ipertrofia cardiaca mediante MEF2/HDAC. Molte molecole calcio dipendenti, comprese calcineurina, protein chinasi calcio/calmodulina dipendente (CaMK), e MAPKs bastano per produrre ipertrofia e riprogrammare l’espressione genica. Dato che vie diverse evocano simili risposte molecolari, è probabile che le vie ipertrofiche convergano su punti finali comuni. Un candidato probabile è MEF2 (myocyte enhancer factor-2), che rimane a livelli basali di attività trascrizionale nel miocardio adulto ma viene attivato su stimolazione. L’attività MEF2 è controllata dall’associazione diretta con un’istone deacetilasi (HDAC). Stimoli ipertrofici (sovraccarico di pressione) e l’attivazione della calcineurina attivano HDAC, che regola MEF2. Si può concludere che molti, se non tutti, gli stimoli ipertrofici convergono sul nucleo e che le HDAC insieme a MEF2 e forse altri fattori di trascrizione che interagiscono con MEF2, come GATA e NFAT, costituiscono gli integratori di questi segnali.

Segnali ipertrofici via G Protein–Coupled Receptors (GPCRs) giocano un ruolo importante nella regolazione della funzione cardiaca e negli adattamenti ai carichi emodinamici. I più importanti GPCRs sono i recettori adrenergici e muscarinici. Questi recettori a sette eliche si accoppiano a tre classi principali di proteine eterotrimetriche che legano GTP, che trasducono il segnale agonista o antagonista ad effettori intracellulari (enzimi e canali ionici). Le subunità dei recettori GTP, una volta attivate, si dissociano e attivano segnali intracellulari indipendenti.

I recettori di AngII, ET1, alfa-adrenergici si accoppiano all’unità Gq/11 (che a sua volta attiva la fosfolipasi C) e sono tutti sufficienti a provocare ipertrofia.

Il recettore adrenergico più abbondante nel cuore è il beta-1, accoppiato a Gs, che attiva l’adenilciclasi, provocando i noti effetti sul cuore (cronotropo, inotropo, lusitropo). La PKA (attivata dalla catena precedente) media le conseguenze negative dell’aumento cronico della stimolazione beta adrenergica, mentre l’adenilciclasi di per se può avere altri effetti protettivi. È stato recentemente dimostrato che il trattamento con beta bloccanti nell’insufficienza cardiaca congestizia è accompagnato anche da un salvataggio del fenotipo dei miocardiociti, con sottoregolazione dei geni dell’ipertrofia e sovraregolazione di geni che erano stati inibiti.

Piccole proteine G costituiscono un passaggio critico fra i recettori di membrana e diverse vie di segnalazione. Vi sono molti membri, che regolano diverse funzioni cellulari, fra cui la crescita, la divisione e la sopravvivenza, l’organizzazione del citoscheletro, i traffici transmembrana e la motilità cellulare. Hanno una massa molecolare simile (21 kDa) e si attivano legando il GTP che si idrolizza a GDP e viene disattivato.

La via MAPK. È un legame importante fra gli stimoli esterni e il nucleo mediante fosforilazione e regolazione di molteplici fattori di trascrizione. Le MAPKs si dividono in 3 sottofamiglie principali: extracellularly responsive kinases (ERKs), c-Jun N-terminal kinases (JNKs), and p38 MAPKs. Gli ultimi due gruppi sono anche chiamati MAPKs che rispondono agli stress perché sono attivati non solo da stimoli anabolici e dagli agonisti delle GPCRs, ma anche da stress patologici come l’ischemia e gli agenti citotossici.

PKC e ipertrofia cardiaca: è una chinasi serina/treonina ubiquitaria attivata da recettori accoppiati a proteine G. Varie isoforme sono coinvolte nella patogenesi dell’ipertrofia. L’attività PKC dipende dalla dislocazione spaziale e dall’associazione con proteine del citoscheletro (RACK e AKAPs).

Gp130/STAT3 Signaling: è un recettore promiscuo per diverse citochine fra cui interleukin 6/11, leukemia inhibitory factor (LIF), and cardiotrophin-1 (CT-1). CT-1 induce ipertrofia in vitro; ANG II aumenta LIF, CT-1 e IL-6.

Metabolismo lipidico e ipertrofia cardiaca. La generazione di combustibile nel cuore adulto si basa sull’ossidazione mitocondriale di acidi grassi a catena lunga per produrre ATP. L’ipertrofia invece si associa alla soppressione dell’ossidazione degli acidi grassi e alla deviazione verso il metabolismo glucidico, che caratterizza il cuore fetale. Questa deviazione si può interpretare come un adattamento perché diminuisce il consumo di ossigeno per mole di ATP generata. Non è però chiaro quali conseguenze metaboliche, come l’accumulo di acidi grassi nel cuore, comporti la soppressione cronica del metabolismo lipidico cardiaco.

I geni dell’ossidazione degli acidi grassi sono in primo luogo regolati da una famiglia di fattori di trascrizione chiamata peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs). I meccanismi della modulazione dipendente da PPAR dell’ipertrofia cardiaca non sono chiari; si indicano due possibilità: a) le alterazioni del metabolismo lipidico nel cuore sono un epifenomeno secondario alle cause della crescita del miocardio; b) le anomalie del metabolismo lipidico precedono e in qualche modo causano l’ipertrofia. La seconda ipotesi è sostenuta dall’osservazione che molte alterazioni ereditarie dell’ossidazione degli acidi grassi si accompagnano ad ipertrofia del ventricolo sinistro.

ALTRE VIA DELL’IPERTROFIA CARDIACAIl segnale MMP/TNF. Le MMPs sono enzimi della matrice extracellulare e aumentano nell’ipertrofia post infarto; l’aumento della loro attività contribuisce alla dilatazione progressiva del cuore scompensato, mentre l’inibizione farmacologica migliora l’ipertrofia sperimentale, compresa la funzione contrattile.

CHAMP and Cardiomyocyte Hypertrophy. Si tratta di un’elicasi dell’RNA specifica per il cuore, attivata da MEF2. Contribuisce all’ipertrofia.

Inibizione dello scambiatore Na/H (NHE). La sua attività aumenta in numerosi modelli di ipertrofia cardiaca e comporta un aumento della concentrazione intracellulare del sodio e, di conseguenza, del calcio perché rallenta lo scambiatorie Na/Ca. L’aumento del calcio intracellulare stimola molte cascate che producono ipertrofia come calcineurin-, CaMK-, PKC- and MAPK-dependent pathways. Quindi l’inibizione di NHE può migliorare molte forme di ipertrofia.

CARDIAC HYPERTROPHY: COMPENSATORY RESPONSE VERSUS MALADAPTATIONIs Cardiac Hypertrophy Good, Bad, or Ugly?

Si ritiene in genere che l’ipertrofia cardiaca possa essere adattativa in alcune situazioni, in particolare negli atleti. È però meno chiaro se la risposta ipertrofica a situazioni patologiche croniche, come l’ipertensione o l’infarto, inizi come risposta compensatoria (che diventa maladattativa solo in seguito) o se questo tipo di accrescimento del miocardio sia dannoso fin dall’inizio. In questo caso le vie molecolari alla base dei due tipi di ipertrofia dovrebbero essere diverse e in effetti ci sono differenze sia morfologiche sia a livello molecolare: l’ipertrofia da esercizio non è accompagnata da accumulo di collagene nel miocardio e in genere l’aumento dello spessore della parete ventricolare sinistra è di grado modesto. Nel confronto fra ratti spontaneamente ipertesi e ratti sottoposti ad esercizio, sono diversi alcuni geni ipertrofici come BNP e ET-1 e l’espressione delle MHCs. In conclusione, l’ipertrofia buona (esercizio) cattiva (patologica) e pessima (scompensata) sono diverse a livello molecolare ma non è escluso che alcune vie ipertrofiche partecipino a tutti i tipi di ipertrofia.

INIBIZIONE DELL’IPERTROFIA. Sono stati descritti diversi fattori genetici o esogeni che inibiscono l’ipertrofia: l’inizio e l’inibizione dell’ipertrofia cardiaca coinvolgono segnali multipli formando una specie di rete che si integra e modula una quantità di stimoli. Alcuni modelli di topi transgenici attenuano la risposta ipertrofica al sovraccarico di pressione mantenendo una funzione sistolica normale, mentre modelli diversi sono ugualmente protetti dall’ipertrofia ma hanno una funzione sistolica depressa e un aumento della mortalità. Quindi la risposta ipertrofica può essere dissociata dalla regolazione della contrattilità

Molti lavori sostengono che l’inibizione dell’ipertrofia cardiaca patologica possa avere effetti benefici anche se lo stimolo originale (aumento dello stress di parete) persiste, ma si tratta di osservazioni a breve termine, mentre è probabile che alla lunga l’inibizione dell’ipertrofia sfoci ugualmente nello scompenso. Qualunque sia l’efficacia di un intervento antiipertrofico, esso deve essere sostenuto nel tempo e non deve compromettere la contrattilità. Bisognerà anche associare strategie complementari, modulando il ciclo del calcio per sostenere la funzione contrattile e inibire le risposte neuroumorali, al fine di trattare con successo e prevenire lo scompenso cardiaco.

Antiremodeling Effect of Long-Term Exercise Training in Patients With Stable Chronic Heart FailureResults of the Exercise in Left Ventricular Dysfunction and Chronic Heart Failure (ELVD-CHF) TrialPantaleo Giannuzzi, MD; Pier Luigi Temporelli, MD; Ugo Corrà, MD; Luigi Tavazzi, MD;for the ELVD-CHF Study Group(Circulation. 2003;108:554-559.)

I volumi telesistolico e telediastolico erano aumentati del 6% e del 7% rispettivamente nel gruppo di controllo, mentre erano diminuiti del 5% e del 9% nel gruppo allenato, nel quale anche la frazione di eiezione era aumentata del 16%. Il tempo di esercizio aumentava nel gruppo allenato di 2,1 min (29%), la capacità di lavoro di 18 W (24%) e il consumo d’ossigeno alla soglia ventilatoria di 2 ml/kg/min (17%). Frequenza cardiaca, pressione sistolica e il prodotto pressione frequenza non cambiavano nei soggetti di controllo ma diminuivano significativamente negli allenati.

L’esercizio moderato a lungo termine in pazienti CHF con disfunzione diastolica grave ha un effetto antirimodellamento documentato da una riduzione modesta ma significativa dei volumi del ventricolo sinistro e da un miglioramento della frazione di eiezione.Meccanismi: riduzione della frequenza e della pressione a riposo e a parità di esercizio sottomassimale. Ridotta produzione di ROS nel muscolo scheletrico.

Aumento del flusso coronarico nel cuore sano e intorno all’infarto; controllo dell’infiammazione

Molecular remodeling of cardiac contractile functionJEANNE JAMES AND JEFFREY ROBBINSAm. J. Physiol. 273 (Heart Circ. Physiol. 42): H2105–H2118, 1997

Le proteine dell’apparato contrattile determinano e rispecchino diverse esigenze fisiologiche per ogni tipo di muscolo. Tutti i muscoli striati hanno un insieme di proteine comuni che sono molto conservate, ma diverse fibre si caratterizzano per particolari e spesso uniche isoforme proteiche complementari. L’esempio più tipico è la catena pesante della miosina (MHC), che appunto esiste in diverse isoforme, caratteristiche di vari fibre muscolari. Esistono isoforme anche della catena leggera della miosina (MLC), dell’actina, del complesso delle troponine, della proteina C che lega la miosina, della titina, della nebulina e della tropomiosina.

Nel cuore di mammifero, le diverse isoforme delle proteine contrattili possono essere espresse in risposta a stimoli esterni ed interni e si ritiene che siano responsabili di diversi aspetti funzionali. Per esempio vi sono due isoforme di actina alfa (scheletrica e cardiaca), prodotte da geni simili in cromosomi diversi e presenti entrambe nel cuore. La forma scheletrica è abbondante nel feto ma è sottoregolata nella vita adulta, quando viene sopraregolata l’actina cardiaca. Un forma di topo geneticamente modificato iperesprime l’actina scheletrica nel cuore da adulto e ha un cuore ipercontrattile.

La più evidente correlazione fra le proprietà contrattili e le proteine riguarda le MHC: ve ne sono tre isoforme cardiache (V1, V2, V3), in cui cambia la velocità dell’ATPasi e della contrazione.Sono stati studiati diversi tipi di topo transgenico per individuare la correlazione fra caratteristiche funzionali e profilo isomiosinico.

Il resto dell’articolo riguarda le diverse tecniche dell’ingegneria genetica, più che i risultati ottenuti. Si va dall’ablazione di geni specifici alla trasfettazione di porzioni di DNA anche diversi (es Drosofila) e si ottengono topi (tutte le ricerche di questo genere sono state effettuate su topi, per ragioni pratiche anche se sarebbero teoricamente estensibili ad altri animali) che esprimono in quantità aumentata le proteine di cui si vogliono studiare gli effetti. I pezzetti di DNA sono caricati su virus con i quali si infettano le cellule, che poi vengono iniettate su topi genitori, la cui prole sarà portatrice della mutazione.Particolarmente interessante la possibilità di produrre dei topi transgenici nei quali la proteina da studiare viene attivata in un momento voluto, per es tramite tetraciclina e può anche essere disattivata.

Per molti anni i cardiologi hanno sostenuto la necessità del riposo prolungato per i pazienti con malattia cardiaca ischemica. Negli ultimi trent’anni,invece, c’è stata una vera rivoluzione e oggi esercizio leggero o moderato è prescritto non solo per la prevenzione ma anche come trattamento fondamentale della malattia.

In questa rassegna ci interessiamo del rimodellamento cellulare e molecolare che ha luogo nel cuore in seguito ad allenamento di endurance. Ci riferiamo in particolare alle crescenti dimostrazioni del potenziale rigenerativo del cuore adulto, costituito da una riserva endogena di cellule staminali o progenitrici cardiache.

L’accrescimento del cuore (ipertrofia) è in genere definito come fisiologico (normale) o patologico (cattivo). L’ipertrofia cardiaca da esercizio è il prototipo dell’accrescimento fisiologico e si può grossolanamente distinguere in concentrico o eccentrico; la struttura cardiaca è normale e la funzione è normale o migliorata. L’ipertrofia patologica invece si associa alla perdita di miocardiociti (apoptosi e necrosi), sostituzione fibrosa, disfunzione cardiaca e aumento del rischio di insufficienza cardiaca e morte improvvisa.

La struttura miocardica è riformata dall’esercizio attraverso un aumento bilanciato della massa miocardica, che comprende l’ipertrofia e la neo angiogenesi (cuore d’atleta). Per esempio, 2 ore al giorno di esercizio su treadmill ad alta intensità (85-90% VO2max) per 5 giorni alla settimana per 8 settimane aumenta del 20-32% e del 17-23% la massa dei miocardiociti in topi maschi e femmine.

In genere, gli atleti di endurance (corridori, nuotatori) hanno un aumento di spessore e una notevole dilatazione del ventricolo sinistro (ipertrofia eccentrica), quelli di resistenza (pesisti, lottatori) un aumento notevole dello spessore e una modesta dilatazione (ipertrofia concentrica), mentre quelli “combinati”, che fanno allenamento di resistenza e di endurance (ciclisti, canoisti, rematori) hanno la maggiore ipertrofia.

Nonostante i comprovati effetti dell’allenamento nella riduzione del rischio cardiovascolare, in seguito ad episodi di esercizio intenso è stato documentato un aumento della troponina cardiaca, che indica danni miocardici, anche in soggetti sani. Un allenamento di endurance prolungato di alto livello può aumentare il rischio di aritmie e arresto cardiaco.

Per molto tempo si è considerato il cuore un organo post mitotico, privo di capacità rigenerativa, per cui i miocardiociti hanno la stessa età del loro proprietario. Questo non vale per il cuore dei neonati e dei bambini prepuberi: questi cuori giovani hanno una robusta capacità di crescere e di rigenerarsi attraverso la moltiplicazione delle cellule, l’ipertrofia cellulare e dei vasi. Si può raddoppiare la massa ventricolare nel neonato in circa una settimana aumentando il postcarico.

Ancora più interessante è il fatto che infarti massivi in soggetti giovani, come quelli che capitano quando una coronaria ha l’origine sbagliata nell’arteria polmonare, dopo correzione chirurgica, rigenerano un miocardio normale con segni minimi o assenti di cicatrice.

Negli ultimi dieci anni, fortunatamente, è sorta una nuova era della biologia miocardica e si è fatto spazio il concetto di un cuore di rimpiazzo nell’adulto. Il cuore adulto contiene una riserva di cellule staminali e progenitrici cardiache endogene (eCSC). Queste cellule si riconoscono in base ad uno specifico marcatore (c-kit) e si distinguono da quelle di origine emopoietica (identificate da CD45); hanno le proprietà delle cellule staminali (clonogeniche, auto rinnovanti e multipotenti) sia in vitro sia in vivo. Nell’uomo queste cellule sono attivate e indirizzate verso la linea miocardiocitica in risposta ad aumenti del carico. Utilizzando carbonio radioattivo, un gruppo di ricerca ha dimostrato che almeno metà dei miocardiociti si rigenerano nel corso della vita.

Nel ratto, abbiamo riscontrato un aumento della proliferazione, del numero e della differenziazione cardiogenica di eCSC con carichi fisiologici come nuoto o corsa.

Allenamento di endurance provoca anche adattamenti del letto coronarico, con aumento della distribuzione di ossigeno, dell’estrazione, del flusso coronarico, del diametro e del numero delle arterie e miglioramento della funzione endoteliale. I segnali che inducono questi adattamenti sono l’ischemia, fattori di crescita (VEGF e FGF-2) e forze fisiche ed emodinamiche. Inoltre, l’allenamento modifica il numero e le caratteristiche di cellule progenitrici dell’endotelio di origine midollare che contribuiscono alla neo vascolarizzazione. Infine, l’allenamento prolungato migliora la contrattilità dei miocardiociti influendo sul ciclo del calcio.

Si ritiene comunemente che stimoli e segnali che conducono all’ipertrofia patologica siano specifici: c’è la riattivazione o sopraregolazione del programma genico di tipo fetale dei cardiomiociti, che comprende aumento di ANP, BNP, actina scheletrica, MLC-1 atriale e b-MHC e diminuzione di geni normalmente espressi nell’adulto, come a-MHC e sarcoplasmic reticulum Ca2+ ATPase (SERCA2a). Tutto questo non avviene in modelli di ipertrofia fisiologica, nella quale agisce una complessa rete di fattori di attivazione, compresi GATA4, GATA6, Csx/Nkx2.5, MEF2, c-jun, c-fos, c-myc, nuclear factor k B and NFAT. La via IGF-1-fosfoinositide 3-chinasi (PI3K) è quella più accreditata per la crescita fisiologica del cuore, mentre recettori accoppiati a proteine G stanno alla base dell’ipertrofia patologica.

Con iniezioni intracoronariche di IGF-1 e HGF si è riusciti ad attivare le eCSC e a rigenerare miociti e vasi in una zona infartuata nel maiale, la cui morfologia cardiaca è particolarmente simile a quella dell’uomo. La rigenerazione ha migliorato la sopravvivenza delle cellule, ha ridotto la fibrosi e ha migliorato i parametri funzionali.

I miocardiociti sono le cellule principali del cuore e anche se sono solo il 20% della popolazione totale di cellule cardiache, costituiscono più del 90% della massa del cuore. Pertanto, la maggior parte delle modificazioni indotte nel cuore dall’allenamento (aerobico) deriva da adattamenti dei miocardiociti e questa plasticità del sistema è alla base di effetti dipendenti dall’intensità (dell’esercizio).

I miocardiociti rispondono all’esercizio in molti modi, cioè regolando le proprie dimensioni e la contrattilità e la risposta dipende dall’intensità: maggiore intensità, maggiore adattamento.

La crescita adattativa delle cellule in risposta all’esercizio, chiamata ipertrofia fisiologica, si esprime con un aumento proporzionale della sezione e della lunghezza delle cellule, e porta ad un aumento del peso e delle dimensioni dei ventricoli.

Con allenamento ad alta intensità (80-90% VO2max) abbiamo ottenuto una risposta ipertrofica proporzionale, già dopo poche settimane di esercizio, che raggiunge un limite dopo due mesi. Sono coinvolti fattori sia trascrizionali sia traslazionali. Queste vie possono avere diversi andamenti temporali e una diversa importanza biologica.

L’attivazione della via phosphoinositide-3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt)/mammalian target of rapamycin (mTOR) è cruciale per l’induzione dell’ipertrofia fisiologica. Tutto questo aumenta la biogenesi e l’attività dei ribosomi e porta ad un aumento di mRNA e di sintesi proteica. È dimostrato che l’attivazione di questa via fa la differenza fra l’ipertrofia fisiologica e quella patologica.

Allenamento aerobico di alta intensità (90% VO2max) per periodi prolungati aumenta la contrattilità di miocardiociti scarichi, con un aumento della frazione di accorciamento del 40-50% e della velocità di contrazione/rilasciamento del 20-40%. La potenza aumenta fino al 60%. L’effetto dipende dall’intensità dell’esercizio. Questi miglioramenti sono indipendenti dall’ipertrofia perché la risposta contrattile dipende da meccanismi subcellulari, come l’idrolisi dell’ATP e la formazione di ponti laterali stimolata dal calcio. La curva tensione/lunghezza diventa più ripida.

Dato che la gestione del calcio intracellulare controlla la contrazione, non meraviglia che l’allenamento modifichi soprattutto questa funzione. In effetti, il parallelismo fra le più rapidi fasi di salita e di discesa del transiente di calcio e le fasi della contrazione e del rilasciamento suggerisce che vi sia un legame causale. Oltre ad accelerare il ciclo del calcio, l’esercizio diminuisce la concentrazione intracellulare di calcio in diastole, riducendo il rischio di aritmie e la pressione di riempimento. Gli effetti smettono di aumentare dopo circa due mesi di allenamento (o per saturazione o perché bisognerebbe aumentare l’intensità) e si invertono in 2-4 settimane dopo che l’allenamento è terminato.

Molti studi dimostrano che l’allenamento aumenta l’mRNA e l’espressione proteica di SERCA2, ma non di fosfolambano (PLB). Quindi aumenta il rapporto SERCA2/PLB lasciando più attiva la pompa sarcoplasmica del calcio. Aumenta anche lo stato di fosforilazione e quindi l’attivazione cronica di CaMKII, che mantiene lo stato di fosforilazione di PLB, che non inibisce più SERCA2. Quindi il calcio sarcoplasmatico viene rimosso più rapidamente e questo spiega la variazione delle cinetiche descritta prima.

L’esercizio aumenta anche il ciclo intracellulare del calcio, che attiva CaMKII (Ca 2+ /calmodulin-dependent kinase II), che contribuisce a mantenere l’attivazione della sintesi proteica dell’ipertrofia.Molte passaggi dell’accoppiamento eccitazione-contrazione possono essere influenzati dall’esercizio, sia in condizioni normali che patologiche.

Al contrario, non c’è una chiara spiegazione dell’aumento della velocità di salita del calcio sarcoplasmatico durante l’attivazione. È possibile che l’allenamento porti ad un prolungamento cronico del potenziale d’azione e quindi dello stato di eccitamento, almeno in alcune parti del cuore oppure che aumenti la sensibilità dei recettori alla rianodina alla corrente di calcio attraverso i canali L, attivati dal potenziale d’azione. In ogni caso, più che la quantità di calcio durante l’attivazione, cambia la forma della curva della concentrazione, che diventa più stretta. Si suppone che questo indirizzi più efficacemente il calcio verso la troponina, aumentando la sincronizzazione dell’attivazione dei sarcomeri. E questa è una spiegazione più credibile dell’aumento di contrattilità. Vi è anche un miglior controllo del pH intracellulare e una trasformazione verso isoforme delle proteine contrattili più efficienti

Il modello animale più usato per studiare l’ipertrofia patologica è il ratto post infarto. Viene chiusa permanentemente una coronaria e a questo segue un infarto di dimensioni ripetibili, con conseguente perdita della funzione di pompa, ipertrofia e dilatazione.

I miocardiociti del ratto infartuato hanno le caratteristiche opposte a quelle dell’ipertrofia da esercizio. Minore velocità di accorciamento e rilasciamento, minore forza contrattile, alterata gestione del calcio intracellulare e aumento del calcio libero in diastole. Tutte queste alterazioni sono suscettibili di miglioramento in seguito all’allenamento.

Innanzitutto, è invertita la disfunzione arteriosa grazie al ripristino della produzione di NO da parte dell’endotelio, una modificazione facilitata da alterazioni adattative dell’eNOS, attivato da Akt e da una riduzione delle specie reattive dell’ossigeno, generate dalla NADPH ossidasi. Questo avviene nelle arterie, ma riduce il carico sul cuore e ne migliora la funzione. Ma ancora più importante è l’attenuazione della disfunzione cardiaca intrinseca. Nell’insieme, questi effetti riducono l’ipertrofia patologica. Giocano un effetto positivo tutti i meccanismi visti per l’ipertrofia fisiologica, dall’aumento della contrattilità e della fase di rilasciamento alla migliore gestione del calcio intracellulare. Infine, l’esercizio corregge i diversi difetti metabolici del cuore dilatato

Sono stati escogitati diversi modelli animali per simulare disfunzioni miocardiche non dipendenti dal post infarto. In particolare, un tipo di diabete e la sindrome metabolica. L’allenamento modula positivamente le funzioni contrattili intrinseche, riconducendole a livelli quasi normali. Il principale meccanismo è una normalizzazione del ciclo del calcio.

Tutti gli studi descritti indicano che la capacità di rispondere all’allenamento è mantenuta anche durante lo sviluppo di miopatie cardiache e insufficienza dovute all’infarto, al diabete o alla sindrome metabolica e che i meccanismi coinvolti restano simili a quelli del cuore normale. È importante notare che l’esercizio corregge i difetti di inotropismo e lusitropismo direttamente nei miocardiociti e che questo non dipende da fattori esterni alle cellule.

In realtà, le alterazioni geniche indotte da diversi tipi di malattia che portano all’ipertrofia patologica sono molteplici e diverse da quelle che stanno alla base della risposta fisiologica. Probabilmente è proprio per questo che tale risposta è conservata anche in condizioni patologiche.

IMPLICAZIONI CLINICHERecentemente è stato dimostrato che programmi d’esercizio ad alta intensità (90% VO2 max) possono essere adeguati per pazienti con ipertrofia post infarto, malattia coronarica o aumentato rischio cardiovascolare. Tutti questi programmi si basavano su una frequenza cardiaca pari al 95% del massimo teorico e hanno ottenuto effetti molto superiori a quelli di esercizi moderati, che aumentano la capacità d’esercizio ma fanno poco sul cuore.