Esercitazione 2: Respirazione

elaborazione dei dati

Costruzione delle rette di taratura

Posizione sulla piastra ATP (moli) Fotoni emessi 20

dicembre Fotoni emessi 19

dicembreB1 1E-14 14 16

B2 2E-14 8 6

B3 1E-13 64 50

B4 1E-12 458 474

B5 2E-12 934 654

B6 1E-11 4528 3374

Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte

Costruzione delle rette di taratura

Posizione sulla

piastraATP

(moli)Fotoni emessi 20 dicembre

Fotoni emessi 19 dicembre media

B1 1E-14 14 16 15

B2 2E-14 8 6 7

B3 1E-13 64 50 57

B4 1E-12 458 474 466

B5 2E-12 934 654 794

B6 1E-11 4528 3374 3951

Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte. Media dei valori ottenuti nei due giorni

Rappresentazione delle rette di taratura

0 2E-12 4E-12 6E-12 8E-12 1E-110

500

1000

1500

2000

2500

3000

3500

4000

4500

esercitatorori 2 Linear (esercitatorori 2 )esercitatori 1Linear (esercitatori 1)AVERAGELinear (AVERAGE)

ATP (moli)

inte

nsità

del

seg

nale

em

esso

(num

ero

di fo

toni

)taratura per la reazione con mix diluita

Costruzione delle rette di taratura

Posizione sulla piastra ATP (moli) Fotoni emessi 20

dicembre Fotoni emessi 19

dicembreA1 1.00E-16 152 194

A2 2.00E-16 102 198

A3 1.00E-15 126 178

A4 1.00E-14 274 392

A5 2.00E-14 392 426

A6 1.00E-13 1194 2408

Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione

Costruzione delle rette di taratura

Posizione sulla

piastraATP

(moli)Fotoni emessi 20 dicembre

Fotoni emessi 19 dicembre media

A1 1.00E-16 152 194 173

A2 2.00E-16 102 198 150

A3 1.00E-15 126 178 152

A4 1.00E-14 274 392 333

A5 2.00E-14 392 426 409

A6 1.00E-13 1194 2408 1801

Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione. Media dei valori ottenuti nei due giorni

Rappresentazione delle rette di taratura

taratura per la reazione con mix

0.00E+00 2.00E-14 4.00E-14 6.00E-14 8.00E-14 1.00E-130

300

600

900

1200

1500

1800

2100

2400

esercitatorori 2 Linear (esercitatorori 2 )esercitatori 1Linear (esercitatori 1)AVERAGELinear (AVERAGE)Linear (AVERAGE)

ATP (moli)

inte

nsit

à de

l seg

nale

em

esso

(n

umer

o di

foto

ni)

Costruzione delle rette di taratura

Posizione sulla

piastraATP

(moli)Fotoni

emessi 20 dicembre

Fotoni emessi 19 dicembre

media Deviazione standard

B1 1E-14 14 16 15 1

B2 2E-14 8 6 7 1

B3 1E-13 64 50 57 7

B4 1E-12 458 474 466 8

B5 2E-12 934 654 794 140

B6 1E-11 4528 3374 3951 577

Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte. Media dei valori ottenuti nei due giorni e deviazione standard

Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura

1 2 3 4 5 60

100

200

300

400

500

600

700

Errore su ciascun punto della retta

STDN DEV% error

Punti della retta di taratura

Erro

re c

alco

lato

Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte

1 2 3 4 5 602468

101214161820

% error

% error

Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura

Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte

Costruzione delle rette di taratura

Posizione sulla

piastraATP

(moli)Fotoni

emessi 20 dicembre

Fotoni emessi 19 dicembre

media Deviazione standard

A1 1.00E-16 152 194 173 21

A2 2.00E-16 102 198 150 48

A3 1.00E-15 126 178 152 26

A4 1.00E-14 274 392 333 59

A5 2.00E-14 392 426 409 17

A6 1.00E-13 1194 2408 1801 607

Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte. Media dei valori ottenuti nei due giorni e deviazione standard

Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura

1 2 3 4 5 60

100

200

300

400

500

600

700

Errore su ciascun punto della retta

STDN DEV% error

Punti della retta di taratura

Erro

re c

alco

lato

Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione

Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura

1 2 3 4 5 605

10152025303540

% error

% error

Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione

0 2E-12 4E-12 6E-12 8E-12 1E-110

500

1000

1500

2000

2500

3000

3500

4000

4500

esercitatorori 2 Linear (esercitatorori 2 )esercitatori 1Linear (esercitatori 1)AVERAGELinear (AVERAGE)

ATP (moli)

inte

nsità

del

seg

nale

em

esso

(num

ero

di fo

toni

)taratura per la reazione con mix diluita

y = 5e14x + 12.101R = 0.99996y = 4e14x + 21.176R = 0.99971y = 3e14x + 30.251R = 0.99819

Rappresentazione delle rette di taratura

taratura per la reazione con mix

Rappresentazione delle rette di taratura

0.00E+00 2.00E-14 4.00E-14 6.00E-14 8.00E-14 1.00E-130

300

600

900

1200

1500

1800

2100

2400

esercitatorori 2 Linear (esercitatorori 2 )esercitatori 1Linear (esercitatori 1)AVERAGELinear (AVERAGE)Linear (AVERAGE)

ATP (moli)

inte

nsit

à de

l seg

nale

em

esso

(n

umer

o di

foto

ni)

y = e16x + 140.6R = 0.99545

y = 2e16x + 142.19R = 0.99728

y = 2e16x + 143.78R = 0.99127

Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati

ATP (moli)Ricostruita

equazione 19 dicembre

Ricostruita equazione 20

dicembre1.00E-16 1.80E-16 1.14E-152.00E-16 2.71E-15 -3.86E-151.00E-15 1.71E-15 -1.46E-151.00E-14 1.24E-14 1.33E-142.00E-14 1.41E-14 2.51E-141.00E-13 1.13E-13 1.05E-13

Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazione

ATP (moli)

Ricostruita

equazione 19

dicembre

Ricostruita equazione 20

dicembre

1E-14 -4.75E-14 3.80E-152E-14 -8.08E-14 -8.20E-151E-13 6.58E-14 1.04E-131E-12 1.48E-12 8.92E-132E-12 2.08E-12 1.84E-121E-11 1.11E-11 9.03E-12

Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazione diluita 25 volte

Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolatimitocondri 1 ATP

mito1 mitocondri 2 ATP mito 2

3.61E+06 1.80E-10 2.94E+06 2.94E-105.23E+06 2.61E-10 2.55E+07 2.55E-094.38E+06 2.19E-10 5.29E+06 5.29E-105.15E+06 2.58E-10 4.11E+07 4.11E-094.53E+07 2.27E-09 6.57E+06 6.57E-104.83E+07 2.41E-09 5.37E+06 5.37E-10

Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazionemitocondri 1 ATP

mito1 mitocondri 2 ATP mito 2

2.21E+05 7.36E-10 1.74E+05 3.48E-101.47E+05 4.90E-10 1.14E+06 2.29E-092.02E+05 6.72E-10 2.75E+05 5.50E-103.00E+05 1.00E-09 1.16E+06 2.33E-098.39E+05 2.80E-09 1.89E+05 3.79E-101.17E+06 3.91E-09 2.45E+05 4.90E-10

Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazione diluita 25 volte

Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati

1 2 3 4 5 61.00E-115.10E-101.01E-091.51E-092.01E-092.51E-093.01E-093.51E-094.01E-094.51E-09

ATP prodotta turno 2

mixmix diluita

1 2 3 4 5 61.00E-115.10E-101.01E-091.51E-092.01E-092.51E-093.01E-093.51E-094.01E-094.51E-09

ATP prodotta turno 1

mixmix diluita

Mappa del segnale ottenuto sulle piastre di misura