Università degli studi di TorinoLaurea specialistica in biotecnologie molecolari

Corso di immunologiaProf. G.Forni

CD20: RUOLO NEI TUMORI EMATOLOGICI

Viola Bigatto

CD20 RITUXIMAB AZIONI TERAPEUTICHE MECCANISMO D’AZIONE PROBLEMI

CD20: RUOLO NEI TUMORI EMATOLOGICI

CD20

1

Caratteristiche:

- presente sui linfociti B

- 35kDa

- non glicosilata

- 4 domini transmembrana

- N e C terminale sono intracellulari

Funzioni:

- Differenzazione e attivazione dei linfociti, sebbene il KO x CD20 ha uno sviluppo e numero normale di linfociti B

- regolazione del ciclo cellulare

- canale del calcio

Pescovitz et Al.

ESPRESSIONE DEL CD20 NELLA MATURAZIONE DEI LINFOCITI B

CARATTERISTICHE CD20

espresso su oltre il 95% di tutti i linfomi non-Hodgkin a cellule B (NHLs).si trova anche nelle cellule B normalinon viene internalizzato dopo il legame anticorpalenon circola nel sangue come antigene libero e quindi non compete con il legame degli anticorpi

Non Hodgkin Lymphomas (NHLs)comprendono un gruppo eterogeneo di neoplasie al

sistema linfatico, tra cui: linfomi a basso grado di malignità o indolenti

(follicolari) linfomi ad alto grado di malignità (linfoma a

grandi cellule B)Terapie

ChemioterapiaRituximab, approvato dalla FDA nel 1997 come farmaco per la cura di pazienti con linfoma follicolare ricaduto/refrattario, come agente singolo o in associazione a chemio terapici (CHOP)

Rituximab

Smith et Al.

Generazione dell’anticorpo

L’anticorpo è stato generato immunizzando un coniglio con linfociti umani presentanti CD20

L’anticorpo è stato ingenierizzato combinando le regioni variabili della catena pesante e leggera (murine) con la

regione costante IgG1 (umana)

Produzione

tramite ibridomi, fondendo splenociti con cellule di mieloma, ma..scarsa produzione e genoma instabile (5pg/cell day-1)

trasfettando il gene codificante per l’anticorpo in colture di cellule di mammifero Ovariche di Hamster Cinese (CHO) in sospensione (stabili) ed effettuando una purificazione con una cromatografia affine a scambio ionico, incluse procedure specifiche di inattivazione e rimozione virale (50pg/cell day-1).

QUALCHE CIFRA…

Usato in oltre 78 paesiPiù di 300 000 di pazienti trattati10 ml -> 568 $50 ml -> 2840 $ 1 infusione ->3976 $Ciclo di 4 infusioni -> 15904 $ !!!!!!!!!Vendite per oltre 2 miliardi di dollari nel 2006

Come si presenta?Rituximab è un’infusione

endovenosa (375mg/m2)Somministrata 1 volta alla

settimana per 4 settimane

Prodotto da:Genentech – RITUXAN (San Francisco)Roche – MabThera (Basel)

Brevetto fino al 2013 ma è già stato scoperto il generico (Reditux)

www.usrecallnews.com

Rituximab ha moltissime applicazioni..

Porpora trombocitopenica idiopaticaLupus eritematoso sistemicoMiastenia graveArtrite reumatoideDisturbi post trapianto (PTLD)PemfigoAnemia emoliticaEmofilia AEcc..

Effetti collaterali

FebbreIpotensioneBroncospasmoEmicraniaVomitoNauseaRash

Qual’è il meccanismo molecolare alla base?

RITUXIMAB AGISCE ELIMINANDO I LINFOCITI B

CIRCOLANTI CHE ESPRIMONO CD20…

Smith et Al.

VIE DI SEGNALAZIONE

Pescovitz et Al.

ADCC

Smith et Al.

CDC

Smith et Al.

APOPTOSI

Smith et Al.

Vantaggi

il target CD20 è limitato ai linfociti B

Rituximab non colpisce le staminali

Rituximab ha lunga emivita (205 h dopo la 4a perfusione)

Svantaggi

circa il 50% dei pazienti con NHL non rispondono al solo trattamento con rituximab.

Rituximab non è in grado di eliminare tutti i linfociti B presentanti CD20 e ha diversa efficacia a seconda del sottotipo di NHL.

RESISTENZE

Alterazioni dell’espressione/via di segnalazione di CD20

Elevata soglia apoptotica

Modulazione dell’attività del complemento

Diminuita citotossicità cellulare

Bibliografia• Pescovitz MD., Rituximab, an anti-cd20 monoclonal antibody: history and mechanism of action, Am J Transplant,

6:859, 2006.

• Smith MR., Rituximab (monoclonal anti-CD20 antibody): mechanisms of action and resistance, Oncogene, 20:7359, 2003 (Fig..3 – 5 - 7 – 8 - 9).

• Chinn P. et Al, Antibody therapy of non-Hodgkin's B-cell lymphoma, Cancer Immunol Immunother, 52:257, 2003.

• Rastetter W et Al, Rituximab: expanding role in therapy for lymphomas and autoimmune diseases, Annu Rev Med., 55:477, 2004.

• Reff ME. Et Al, Depletion of B cells in vivo by a chimeric mouse human monoclonal antibody to CD20. Blood 83:435, 1994.

• Jazirehi AR., Rituximab (Chimeric Anti-CD20 Monoclonal Antibody) Inhibits the Constitutive Nuclear Factor-KB Signaling Pathway in Non-Hodgkin’s Lymphoma B-Cell Lines: Role in Sensitization to Chemotherapeutic Drug induced Apoptosis, Cancer Res., 65:264, 2005.

• Jazirehi AR., Cellular and molecular signal transduction pathways modulated by rituximab (rituxan, anti-CD20mAb) in non-Hodgkin’s lymphoma: implications in chemosensitization and therapeutic intervention, Oncogene, 24:2121, 2005.

• Bonavida B., Rituximab-induced inhibition of antiapoptotic cell survival pathways: implications in chemo/immunoresistance, rituximab unresponsiveness, prognostic and novel therapeutic interventions, Oncogene, 26:3629, 2007.

• Coiffier B., Rituximab therapy in malignant lymphoma, Oncogene, 26:3603, 2007.

• http://www.usrecallnews.com/2006/12/rituxan-rituximab-urgent.html