Alfafetoproteina nellAlfafetoproteina nell’’epatocarcinoma:ruolo epatocarcinoma:ruolo diagnostico e prognostico, predittori clinici e diagnostico e prognostico, predittori clinici e

biologici. Analisi di 1099 pazientibiologici. Analisi di 1099 pazienti

Prof. FABIO FARINATIProf. FABIO FARINATI

UNIVERSITAUNIVERSITA’’ DEGLI STUDI DI PADOVADEGLI STUDI DI PADOVA

AFPAFP

Introduzione: lIntroduzione: l’’epatocarcinoma (HCC)epatocarcinoma (HCC)

EpidemiologiaEpidemiologia•• Quinta neoplasia per Quinta neoplasia per frequenza nel mondofrequenza nel mondo

•• 500.000 decessi500.000 decessi

Fattori di rischioFattori di rischio•• Cirrosi epaticaCirrosi epatica

•• Epatopatie croniche viraliEpatopatie croniche virali

•• Abuso alcolicoAbuso alcolico

•• Malattie metaboliche Malattie metaboliche (emocromatosi, M. di (emocromatosi, M. di Wilson)Wilson)

PrognosiPrognosi•• di difficile previsionedi difficile previsione•• dipendente dal grado di dipendente dal grado di epatopatiaepatopatia, dallo , dallo stagingstaging del del tumore e da fattori biologici.tumore e da fattori biologici.

Immagine di epatocarcinomaImmagine di epatocarcinoma

Epatocarcinoma: diagnosi e stadiazioneEpatocarcinoma: diagnosi e stadiazione

Ecografia epaticaEcografia epatica

Dosaggio dellDosaggio dell’’AlfaAlfa--fetoproteinafetoproteina (AFP) (AFP) ((AISF 2001)AISF 2001)

Immagini strumentaliImmagini strumentali

Biopsia EpaticaBiopsia Epatica

TNMTNMOKUDAOKUDA

BCLC BCLC CLIPCLIP

UtilitUtilitàà clinica dellclinica dell’’AlfafetoproteinaAlfafetoproteina

AFPAFP

Prognosi Prognosi

Follow upFollow up

DiagnosiDiagnosi

??

Fattori predittiviFattori predittivi

??

ScreeningScreening

Scopi Scopi

Rivalutare in una serie di oltre 1000 casi di Rivalutare in una serie di oltre 1000 casi di HCCHCC…………

•• Quale sia lQuale sia l’’ affidabilitaffidabilit àà diagnosticadiagnostica e e prognosticaprognostica delldell’’ AFP AFP

•• Quali siano i Quali siano i fattori predittivi clinici fattori predittivi clinici di elevati livelli di AFPdi elevati livelli di AFP

•• Quale sia la relazione tra AFP e Quale sia la relazione tra AFP e citoproliferazione, citoproliferazione, apoptosiapoptosi, molecole di adesione e mutazione di geni , molecole di adesione e mutazione di geni oncosopressorioncosopressori..

Materiali e MetodiMateriali e Metodi

•• sessosesso•• eziologia delleziologia dell’’ epatopatiaepatopatia•• albuminaalbumina•• ASTAST•• ALTALT•• piastrinepiastrine•• ChildChild --PughPugh

•• stadio della neoplasia (Okuda, stadio della neoplasia (Okuda, TNM)TNM)

•• istotipoistotipo•• dimensione massima dimensione massima •• metastasi a distanzametastasi a distanza•• trombosi venosatrombosi venosa•• sopravvivenzasopravvivenza•• dolore addominaledolore addominale•• calo ponderalecalo ponderale•• trattamenti eseguititrattamenti eseguiti

Parametri clinici e bioumoraliParametri clinici e bioumorali

CasisticaCasistica

1099 pazienti con HCC (829 m, 270 f, et1099 pazienti con HCC (829 m, 270 f, etàà media 65 media 65 aaaa), diagnosi clinica o ), diagnosi clinica o istologica, studio istologica, studio multicentricomulticentrico ITALICA (ITALICA ( ItalianItalian Liver Liver CancerCancer groupgroup))

Materiali e MetodiMateriali e MetodiParametri Parametri biologicibiologici--immunofenotipiciimmunofenotipici•• GradingGrading (Edmonson)(Edmonson)•• p53 p53 (gene (gene oncosoppressoreoncosoppressore-- riparazione del DNA riparazione del DNA –– citoprolifcitoprolif.).)

[anti[anti--p53 Mop53 Mo--Ab DOAb DO--1, 1, IgGIgG 22°°; ; ImmunotechImmunotechS.A.,S.A.,FranceFrance]]

•• BCLBCL --22 (cascata (cascata apoptoticaapoptotica))[bcl2clone 124; [bcl2clone 124; DakoDako; ; DenmarkDenmark]]

•• KI 67KI 67 (citoproliferazione)(citoproliferazione)[Ki67 Mo[Ki67 Mo--Ab clone MIB, IgG1 mouseAb clone MIB, IgG1 mouseImmunotechImmunotechS.A.,S.A.,FranceFrance]]

•• CD 44CD 44 (molecola di adesione, regola architettura (molecola di adesione, regola architettura tissutaletissutale))[CD44 [CD44 stdstd; ; BenderBenderMedysistemMedysistem]]

90 Pazienti centro di Padova90 Pazienti centro di Padova

Statistica: Statistica: tt--studentstudent, chi, chi--quadro, regressione lineare, quadro, regressione lineare, SpearmanSpearman RankRank,,KaplanKaplan--MeierMeier, analisi discriminante,, analisi discriminante,

(risultati (risultati validativalidati in serie interne)in serie interne)

RisultatiRisultati

0

10

20

30

40

50

<20 ng 20-200 201-400 >401

AFP ng/ml

Distribuzione dei 1099 pazienti per classi di AFPDistribuzione dei 1099 pazienti per classi di AFP

RisultatiRisultati

0

20

40

60

< 2 cm 2-3 cm 3-5 cm >5 cm

AFP >400 ng/ml

Distribuzione dei 1099 pazienti per classe di Distribuzione dei 1099 pazienti per classe di ChildChild--PughPughe dimensioni del nodulo principalee dimensioni del nodulo principale(risultati (risultati validativalidati in serie interne)in serie interne)

0

20

40

60

1 nodulo 2-3 noduli >3 noduli diffuso massivo

AFP >400 ng/ml

p<0,0001p<0,0001 p<0,0001p<0,0001

RisultatiRisultati

0

20

40

60

TNM 1 TNM 2 TNM 3 TNM 4

AFP> 400 ng/ml

Distribuzione dei 1099 pazienti per classe di TNM e Distribuzione dei 1099 pazienti per classe di TNM e numero di nodulinumero di noduli

(risultati (risultati validativalidati in serie interne)in serie interne)

0

20

40

60

CHILD A CHILD B CHILD C

AFP> 400 ng/ml

p<0,0001p<0,0001 p<0,0001p<0,0001

RisultatiRisultati

0

10

20

30

40

50

60

untreated resezione OLTx PEI TACE

AFP>400 AFP<400

Indicazione al trattamento in base ai livelli di AFPIndicazione al trattamento in base ai livelli di AFP

P<0,0001P<0,0001

RisultatiRisultati

0 30 60 90 1200,00

0,25

0,50

0,75

1,00

Survivor

Times

1

2

3

4

Pazienti non trattati (p<0,0001)

dd

0 50 100 1500,00

0,25

0,50

0,75

1,00

Survivor

Times

1

2

3

4

Pazienti sottoposti a trattamento p <(0,0001)

AFP MEDIANA0-20 ng/ml 12 mesi21-200 ng/ml 13 mesi201-400 ng/ml 10 mesi> 400 ng/ml 5 mesi

AFP MEDIANA 0-20 ng/ml 33 mesi 21-200 ng/ml 26 mesi 201-400 ng/ml 20 mesi > 400 ng/ml 9,2 mesi

Risultati

0 30 60 900,00

0,25

0,50

0,75

1,00

Survivor

Times

1

2

3

4

Survival Plot (PL estimates)

0 50 100 1500,00

0,25

0,50

0,75

1,00

Survivor

Times

1

2

3

4

Survival Plot (PL estimates)

0 30 60 90 1200,00

0,25

0,50

0,75

1,00

Survivor

Times

1

2

3

4

Pazienti chirurgici p=ns

Alcolizzazione p<0,01 Chemioembolizzazione p<0,0001

Risultati

Parametri clinici e Parametri clinici e bioumoralibioumorali

•• sesso femminile p=0,004sesso femminile p=0,004

•• dimensione p<0,0001dimensione p<0,0001

•• Okuda p<0,0001Okuda p<0,0001

•• TNM p<0,0001TNM p<0,0001

•• ChildChild--Pugh p<0,0001Pugh p<0,0001

•• No noduli TAC p<0,0001No noduli TAC p<0,0001

•• trombosi p<0,0001trombosi p<0,0001

•• metastasi p<0,0001metastasi p<0,0001

•• calo ponderale p<0,0056calo ponderale p<0,0056

•• dolore addominale p<0,0025dolore addominale p<0,0025

•• indicazione a trattamento indicazione a trattamento

p<0,01p<0,01

Parametri biologiciParametri biologici

•• Grading p<0,0001Grading p<0,0001

•• BCLBCL--2 p = 0,052 p = 0,05

Non significativiNon significativi•• eziologiaeziologia

•• transaminasitransaminasi

•• istotipoistotipo

•• CD 44CD 44

•• MIB 1MIB 1

•• p53p53

Risultati: Analisi discriminanteRisultati: Analisi discriminante

Step V ariabili

1 D im ensione del tum ore (p<0,0001)

2 Sesso fem m in ile (p<0,0001)

3 C hild Pugh (p<0,0001)

4 Stage TN M (p<0,0001)

Percentuale di casi classificati correttamente: 46,9%Percentuale di casi classificati correttamente: 46,9%

ConclusioniConclusioni

•• Scarsa validitScarsa validitàà diagnostica (>200 diagnostica (>200 ngng/ml nel 24% dei pazienti)/ml nel 24% dei pazienti)

•• Importante indice prognostico (non nei pazienti trattati Importante indice prognostico (non nei pazienti trattati chirurgicamente)chirurgicamente)

•• Definisce un profilo particolare di paziente caratterizzato da Definisce un profilo particolare di paziente caratterizzato da –– maggiori dimensioni della neoplasia (TNM, diametro massimo, maggiori dimensioni della neoplasia (TNM, diametro massimo, Okuda)Okuda)

–– maggiore frequenza di metastasi extraepatiche e trombosi maggiore frequenza di metastasi extraepatiche e trombosi venosavenosa

–– associazione con calo ponderale e dolore addominale, peggiore associazione con calo ponderale e dolore addominale, peggiore funzionalitfunzionalitàà epatica e inferiore indicazione a trattamentoepatica e inferiore indicazione a trattamento

•• La correlazione tra AFP, grading ed ipoespressione del gene BCLLa correlazione tra AFP, grading ed ipoespressione del gene BCL--2 2 suggerisce un possibile ruolo nellsuggerisce un possibile ruolo nell’’apoptosiapoptosi ed una associazione ed una associazione con forme meno differenziatecon forme meno differenziate

•• I fattori selezionati come I fattori selezionati come predittoripredittori indipendenti allindipendenti all’’analisi analisi discriminante sono dimensione, sesso femminile, discriminante sono dimensione, sesso femminile, ChildChild e TNMe TNM