1

UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA

Facultad de Estomatología

Roberto Beltrán Neira

“BIOFILM Y MICROORGANISMOS ORALES

BACTERIANOS”

INVESTIGACION BIBLIOGRAFICA DEL PROCESO DE SUFICIENCIA

PROFESIONAL PARA OBTENER EL TÍTULO DE CIRUJANO DENTISTA

ANGÉLICA ELIZABETH OLIVA HUAMANÍ

LIMA – PERÚ

2006

2

MIEMBROS DEL JURADO:

PRESIDENTE : Dr. Carlos Matta Morales.

SECRETARIO : Dr. Lola Sueng Navarrete.

ASESOR : Dr. Guido Perona Miguel de Priego.

FECHA DE SUSTENTACIÓN : 17 DE FEBRERO DEL 2006

CALIFICATIVO : APROBADO

3

A mis padres José Oliva Paredes y Alejandrina Huamaní Morales por ser ejemplo de

sacrificio y constancia.

4

AGRADECIMIENTO

A mi asesor, el Dr. Guido Perona Miguel de Priego por su apoyo y enseñanzas, también a

todas las personas que estuvieron conmigo en el transcurso de este tiempo e hicieron

posible la realización de este trabajo.

5

RESUMEN

La biopelícula (los biofilms) son organizaciones microbianas compuestas por microorga-

nismos que se adhieren a las superficies gracias a la secreción de un exopolímero.

Estas conformaciones microbianas presentan características como heterogeneidad, di-

versidad de microambientes, resistencia a antimicrobianos y capacidad de comunicación

intercelular que las convierten en complejos difíciles de erradicar de los ambientes donde

se establecen.

Las biopelículas que colonizan la cavidad oral son unos de los más complejos

biopelículas que existen en la naturaleza.

La formación de la biopelícula involucra interacción entre las bacterias colonizadoras

primarias y la película adquirida del esmalte. Los colonizadores secundarios se unen a las

bacterias inicialmente a través de interacciones moleculares específicas (7).

A medida que la biopelícula se forma, se van desarrollando gradualmente factores

biológicos importantes, permitiendo la coexistencia de especies que serian incompatibles

si fuera un medio homogéneo (2).

La biopelícula dental se desarrolla naturalmente, pero también está asociada con dos de

las enfermedades más prevalentes: la enfermedad periodontal y la caries dental (2).

Palabras claves: BIOPELÍCULA/ PLACA DENTAL/CARIES DENTAL/

ENFERMEDAD PERIODONTAL.

1

ÍNDICE DE CONTENIDOS

Página

I.-Introducción……………………………………………………………………………1

II.- Marco teórico…………………………………………………………………………2

II.1.-Introducción a la biopelícula…………………………………………………2

II.2.- Formación de la biopelícula……..……………………………………..……7

II.2.1.- La Cavidad Oral como hábitat de Microorganismo........................7

II.2.2.- Variación de la biopelícula según las etapas de vida.....................15

II.3.- Características de la biopelícula……….……………………………….…20

II.4.- Productos de la biopelícula……..…………………………………….…..21

II.5.- Estructura de la placa dental…………………………………………….….21

II.5.1.- Placa supragingival.........................................................................21

II.5.2.- Placa subgingival............................................................................24

II.6.- La biopelícula y la caries dental………………………………………........26

II.7.-Bacterias de la boca………………………………………………………....27

III.- Conclusiones………………………………………………………………………..30

IV.- Referencias bibliográficas………………………………………………………….32

2

ÍNDICE DE TABLAS

Página

Tabla 1

Bacterias predominantes presentes en la placa dental de tres sitios……………………….8

Tabla 2

Características generales de la biopelícula y de comunidades microbianas………...…..19

3

ÍNDICE DE FIGURAS

Página

Figura 1

Evolución de las teorías acerca de la composición de la placa……………………………4

Figura 2

Placa dental en microscopio electrónico de barrido…………………………………........6

Figura 3

Partes de la biopelícula …………………………………………………………………....6

Figura 4

Fases de la biopelícula……………………………………………………….……………9

Figura 5

Colonización primaria…………………………………………………………………...10

Figura 6

Cocos y bacilos grampositivos facultativos…………………………………………….11

Figura 7

Receptores de superficies……………………………………………………………… 12

Figura 8

La heterogeneidad y la maduración de la placa………………………………………….13

4

Figura 9

Formación de la placa dental sobre un diente limpio……………………………………17

Figura 10

La biopelícula, se aprecia canales de fluído…………………………………………….18

Figura 11

Hipótesis de la placa ecológica de Marsh………………………………………………26

1

I.- INTRODUCCIÓN

El estudio de las biopelículas es un área excitante en continua evolución; tienen

repercusiones importantes para la humanidad las implicaciones que presentan estas

asociaciones en los diversos ámbitos de la medicina y la industria.

Las biopelículas son ubicuas; se forman virtualmente en todas las superficies inmersas en

medios acuosos naturales. Costerton introdujo el término biopelícula.

La biopelícula, es una formación de agregados bacterianos, usualmente existentes como

comunidades cercanamente asociadas, que se adhieren a una variedad de superficies

naturales o artificiales, en un medio acuoso que contiene una concentración suficiente de

nutrientes para sostener las necesidades metabólicas de la microbiota.

Las biopelículas que colonizan la cavidad oral son unos de los más complejos

biopelículas que existen en la naturaleza. Esta complejidad se debe en gran medida a la

composición de las distintas superficies, que determinan la existencia de cuatro nichos

orales diferentes: mucosa masticatoria, dorso lingual, saliva y superficies duras, en donde

se incluyen las superficies dentarias y las de materiales de restauración.

La formación de la biopelícula involucra interacción entre las bacterias colonizadoras

primarias y la película adquirida del esmalte. Los colonizadores secundarios se unen a las

bacterias inicialmente a través de interacciones moleculares específicas.

Las biopelículas en la cavidad bucal están relacionadas con dos enfermedades

importantes la enfermedad periodontal y la caries dental.

Estudios actuales sobre la composición de la microflora a nivel de placa dental, han

demostrado que los aerobios son los microorganismos que en mayor porcentaje se

encuentran en la placa dental supragingival; mientras que los anaerobios se encuentran en

la flora dental subgingival.

2

II.-MARCO TEÓRICO

La biopelícula se define como una comunidad microbiana que se encuentra sobre la

superficie dental, formando una biopelícula embebido en una matriz de polímeros de

origen bacteriano y salival. Se presenta en la boca de individuos sanos y enfermos, y es el

agente etiológico de dos de las enfermedades orales más prevalentes: la caries dental y la

enfermedad periodontal (6).

II.1. INTRODUCCIÓN AL BIOFILM

En 1978, Costerton (7) introdujo el término biopelícula. La biopelícula, es una formación

de agregados bacterianos, usualmente existentes como comunidades cercanamente

asociadas, que se adhieren a una variedad de superficies naturales o artificiales, en un

medio acuoso que contiene una concentración suficiente de nutrientes para sostener las

necesidades metabólicas de la microbiota.

Se ha determinado que las células bacterianas de las biopelículas exhiben características

biológicas que difieren marcadamente de las bacterias que están aisladas, o en suspensión

(9,10). Las biopelícula constituyen una comunidad microbiana protegida de una amplia

variedad de factores antibacterianos y que predominan en cualquier ecosistema que posea

un nivel suficiente de nutrientes.

Todos las biopelículas poseen una estructura y una fisiología compleja, que les permite

crear y mantener un ecosistema abierto de canales de agua (5). Un estudio reciente sobre

la estructura de la placa dental, demostró que ésta presenta una configuración más abierta

de lo que antes se pensaba. Se ha descubierto la presencia de canales que pueden

atravesar la profundidad de las biopelícula (11).

Según Costerton y cols., la resistencia que poseen las bacterias que forman parte de un

biofilm con respecto a la que poseen las bacterias planktónicas se estima entre 1000 y

1500 veces superior. Esto hace que queden invalidados los estudios sobre susceptibilidad

antimicrobiana que se llevan a cabo sobre bacterias aisladas, y abre, por tanto, una nueva

línea de investigación (7).

3

Los mecanismos por los que las bacterias sésiles son más resistentes a los antimicrobi-

anos que las planctónicas son muy numerosos (4). Además, estos mecanismos difieren no

sólo entre distintas especies, sino ante distintos antimicrobianos y entre los distintos

hábitat en los que se desarrolla la biopelícula (13).

Uno de los más importantes mecanismos de resistencia parece ser la baja tasa de crecimi-

ento que tienen las bacterias dentro de las biopelículas , que las hace menos susceptibles a

muchos, aunque no a todos los antibióticos (9). Además, la resistencia de las bacterias a

los antibióticos está afectada por su estado nutricional, la tasa de crecimiento, la tempe-

ratura, el pH y la exposición previa a dosis subletales del agente antibiótico. Cualquier

variación de estos parámetros puede modificar la respuesta a los antibióticos de las

bacterias de las biopelículas.

Además, las bacterias de las biopelícula están embebidas en una matriz que, aunque no

actúa de barrera propiamente dicha, retarda la difusión del agente antimicrobiano. A todos

estos mecanismos, hay que sumar el potencial de las enzimas que segregan las bacterias

al espacio extracelular, como las b-lactamasas, formaldehído deshidrogenasa, etc., que

suponen la ineficacia de determinados antibióticos (13).

Todos estos procesos no explican totalmente la resistencia de las bacterias de las

biopelículas a los antimicrobianos. Las últimas investigaciones al respecto proponen la

idea de que existan subpoblaciones de bacterias "súper-resistentes", que poseerían

elevados niveles de resistencia antibiótica (13).

Puesto que la eliminación completa de la biopelícula sólo puede hacerse con terapia

mecánica (control mecánico de placa supragingival, raspado y alisado radicular y cirugía

periodontal) y la duración en el tiempo de esta "ausencia de la biopelícula " es muy

limitada (apenas unas horas), se han estudiado diferentes combinaciones terapéuticas con

el fin de mejorar su potencial y mantener en el tiempo la condición de salud gingival.

El Instituto Nacional de Investigación Craneofacial y Dental (INICD) encontró un

nuevo panorama de la placa dental como biofilm, la búsqueda de los microorganismos

causantes de las enfermedades periodontales ha sido motivo de estudio durante los

4

últimos 100 años. A principios del siglo XX, al tiempo que comenzaban a encontrarse los

agentes etiológicos de otras enfermedades, empezó a investigarse cual podría ser la causa

de que una parte de la población desarrollara un cuadro clínico tras el cual acababan

perdiéndose los dientes (7)

En el período de 1880 a 1930 fue llamado el año de oro de la microbiología (Fig. 1).

Durante este período los patógenos causantes de varias enfermedades infecciosas

sistémicas fueron identificados.

Fig.1. Evolución de las teorías acerca de la composición de la placa (Tomado de Biofilm:

a new plaque. http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf)

Las investigaciones también vieron las especies causantes de la enfermedad oral,

asumiendo que la placa dental contiene microorganismos que causan la enfermedad

periodontal, científicos estudiaron la placa dental en busca del agente causal usando las

técnicas disponibles en aquel tiempo e identificaron cuatro grupos diferentes: Amebas,

Espiroquetas, Fusiformes, Estreptococos.

En el periodo de 1930 científicos dentales creyeron que la enfermedad periodontal estaba

vinculada con algún defecto constitucional del individuo como algunos mecanismos

irritantes tales como el cálculo o restauraciones desbordantes.

La creencia de que un único agente microbial microbial causaba la enfermedad

periodontal fue cambiado por la teoría de la placa no especifica, se considero a la placa

como nociva por lo tanto fue importante el estricto control de la placa y no la

identificación de microorganismos específicos.

En el periodo de 1960, se marca el retorno de la hipótesis de la placa específica. Las

investigaciones fueron un éxito demostraron que la enfermedad periodontal se podía

5

transmitir (fue probado en hamsters). Los científicos retornaron la búsqueda de patógenos

específicos en la enfermedad periodontal y el tratamiento del agente causal.

En el 2000 la placa dental es vista como una biopelícula. La investigación a través de

varias décadas ha proporcionado una fundación sólida para los estudios actuales sobre las

biopelículas orales. Los numerosos estudios culturales han divulgado la diversidad de

microflora oral residente, tanto en el nivel de género y especie en salud y enfermedad

(15,16). El desarrollo de la placa dental ha sido descrito detalladamente en:

(a) en una superficie limpia en cierto plazo de tiempo

(b) en las personas de diversas edades, de diversos países y dietas, y con

deficiencias precisas en las defensas de su anfitrión (adquiridas e innatas).

(c) siguiendo varias terapias (3,5,7).

La composición de la placa dental también varía en superficies anatómicas distintas por

ejemplo: surcos oclusales, superficies proximales, prótesis dentales debido a las

características físicas y biológicas de cada sitio (5,11,14). El reconocimiento de estas

influencias ambientales en la composición de la placa ha conducido hacia conceptos en la

prevención de enfermedades que han incluido principios ecológicos (16).

Según Costerton y cols. (2003),hacen referencia a la heterogeneidad fisiológica, a los

distintos fenotipos encontrados entre bacterias sésiles y planktónicas, a las señales

emitidas dentro del biofilm, donde destaca el concepto de quorum sensing, y a la

capacidad adaptativa de las bacterias que se organizan de forma altamente específica para

lograr un equilibrio entre la necesidad de maximizar el área de superficie para el

intercambio de nutrientes y la cohesión que le permita permanecer unido a la superficie

(14).

6

Fig.2. Placa dental en microscopio electrónico de barrido (Tomado de Biofilm: a new

plaque. http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf)

En los últimos años, se han dado importantes avances en cuanto al conocimiento de la

organización de las biopelícula y de los modos en los que se establece la comunicación

interbacteriana que hace que sean estructuras organizativamente muy complejas.

Las biopelículas que colonizan la cavidad oral son unas de los más complejas de

biopelícula que existen en la naturaleza. Esta complejidad se debe en gran medida a la

composición de las distintas superficies, que determinan la existencia de cuatro nichos

orales diferentes (15): mucosa masticatoria, dorso lingual, saliva y superficies duras, en

donde se incluyen las superficies dentarias y las de materiales de restauración.

Fig.3. Partes de la biopelícula (Tomado de Biofilm: a new plaque.

http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf)

7

II.2.-FORMACIÓN DE LA BIOPELÍCULA

Inmediatamente después de la inmersión de un sustrato sólido en el medio líquido de la

cavidad bucal, o después de la limpieza de una superficie sólida en la boca,

macromoléculas hidrófobas comienzan a adsorberse en la superficie para formar una

película condicionante denominada película adquirida. Esta película esta compuesta de

diversas glucoproteínas salivales (mucinas) y anticuerpos.

La película condicionante altera la carga y la energía libre de la superficie, que a su vez

aumentan la eficiencia de la adhesión bacteriana.

II.2.1 La cavidad oral como hábitat de microorganismos: Con el fin de identificar los

determinantes ecológicos claves que influyen en los patrones de colonización, es

necesario comprender las propiedades de la cavidad oral. En primer lugar, la boca está

continuamente bañada por la saliva, manteniendo una temperatura de 35- 36°C a un pH

de 6,7 condiciones óptimas para el crecimiento de muchos microorganismos. En segundo

lugar, la saliva influye profundamente en la ecología de la boca (17); por ejemplo, su

composición iónica promueve sus propiedades de amortiguación y su capacidad para

remineralizar el esmalte. Por otro lado, los componentes orgánicos (glicoproteínas y

proteínas) pueden: a) influír en el establecimiento y selección de la microflora oral, al

favorecer la adhesión de ciertos organismos a través de la formación de una película

selectiva acondicionadora sobre la superficie del esmalte, o la eliminación de bacterias a

través del aclaramiento salival; b) actuar como nutriente endógeno. Así mismo, la saliva

contiene componentes de la inmunidad innata y adquirida lo que le da la capacidad de

inhibir directamente algunos microorganismos exógenos (17). La microflora de la placa

dental, proveniente de diferentes sitios de la superficie dental, muestra diferencias en su

composición. Estas variaciones resultan de las diferencias locales con respecto al

suministro de nutrientes, el pH y el potencial redox (26).

8

Bacterias Fisuras Superficie proximal Surco gingival

(%) (%) (%)

Streptococcus 8-86 <1-70 2-73

Actinomyces 0-46 4-81 10-63

AnG+R* 0-21 0-6 0-37

Neisseria +** 0-44 0-2

Veillonella 0-44 0-59 0-5

AnG-R *++ 0-66 8-20

Medio ambiente

Fuente de nutrientes saliva y dieta saliva y FCG+ʎ FCG

pH neutro-bajo neutro-bajo neutro-alto

EhC¡¡ positivo lig. Negativo negativo

*AnG+R, AnG-R: Bacterias anaerobias obligadas Gram positivas y bacterias anaerobias

Gram negativas, respectivamente.

+ʎ FCG: Fluído crevicular gingival.

++: Ocasionalmente detectadas.

C¡¡ Eh: Potencial Redox.

Tabla 1. Bacterias predominantes presentes en la placa de tres sitios distintos y factores

ecológicos determinantes (Tomado de Pérez A. La biopelícula una nueva visión de la

placa dental. Rev Estomatol Herediana 2005; 15 (1): 82-85)

9

La placa dental se acumula preferentemente en los sitios estancados que tienen protección

contra fuerzas vigorosas de retiro (cepillado) que se aplican en la boca. Fases distintas del

desarrollo pueden ser reconocidas, incluyendo:

Fig.4. Fases de la biopelícula (Tomado de Lindhe. Periodontología Clínica e

implantología odontológica. Cuarta edición. Buenos Aires. Médica Panamericana

2005. p 85-97)

(a) Absorción de las moléculas anfitrionas y bacterianas a la superficie del diente. Esta

película adquirida se forma inmediatamente después de una erupción o una limpieza

(11,15) e influye directamente el patrón de la colonización microbiana inicial.

Los cambios conformacionales que pueden ocurrir después de la adsorción de las

moléculas, y del impacto de estas en sus propiedades, son ahora favorables para su

estudio: la estructura molecular de los cambios de los glucanos cuando la

glucosiltransferasas son absorbidas a la superficie (33).

10

Fig.5. Colonización primaria por bacterias facultativas predominantemente

grampositivas. Ss: Streptococos Sanguis, el mas dominante. Av: especies de

Actinomyces tambien encontradas en la placa de 24 horas (Tomado de Lindhe.

Periodontología Clínica e implantología odontológica. Cuarta edición. Buenos Aires.

Médica Panamericana 2005. p 85-97)

(b) Transporte pasivo de bacterias orales a la superficie del diente. Interacciones débiles,

de largo alcance, fisicoquímicas entre la superficie microbiana de la célula y el diente

revestido de la película adquirida crea un área débil de atracción neta que facilita la

adhesión reversible (32).

Por consiguiente, interacciones fuertes, de corto alcance entre moléculas específicas en la

superficie celular bacteriana (adhesinas) y receptores complementarios en la película

adquirida pueden dar lugar a la adhesión irreversible (31) y pueden explicar tropismos

microbianos para las superficies. Las bacterias orales poseen generalmente más de un tipo

de adhesina en su superficie celular y pueden participar en múltiples interacciones con las

moléculas del huésped y receptores similares en otras bacterias (coadhesión).

11

Fig.6. Cocos y bacilos grampositivos facultativos, que se congregan y se multiplican

(Tomado de Lindhe. Periodontología Clínica e implantología odontológica. Cuarta

edición. Buenos Aires. Medica Panamericana 2005. p 85-97)

(c) Co-adherencia de los últimos colonizadores a los anteriores ya adheridos. Esta etapa

también implica interacciones interbacteriales adhesinas-receptoras específicas (a menudo

incluyendo lectinas) y conduce a un aumento en la diversidad del biofilm y a la formación

de estructuras morfológicamente inusuales, tales como mazorcas de maíz y rosetones (8).

La co-adherencia puede también facilitar la organización funcional de la placa dental. Las

bacterias se introducen en una gama de interacciones bioquímicas antagónicas y

sinérgicas (8). La eficiencia de las interacciones metabólicas entre bacterias en cadenas

alimenticias puede ser mejorada si se ponen en contacto físico. Asimismo, la co-

adherencia de bacterias anaeróbicas estrictas a las especies anaerobias facultativas puede

asegurar la supervivencia en ambientes orales abiertamente aerobios.

12

Fig.7. Receptores de superficies sobre los cocos y bacilos grampositivos, facultativos

q permiten la adherencia posterior de los microorganismos gramnegativos, los cuales

poseen capacidad insuficiente para adherirse directamente a la película. Fn:

Fusubacterium nucleatum. Bi: Prevotella intermedia. (Tomado de Lindhe.

Periodontología Clínica e implantología odontológica. Cuarta edición. Buenos Aires.

Médica Panamericana 2005. p 85-97)

(d) La Multiplicación de los microorganismos adheridos. La división celular conduce a

crecimiento confluente y, eventualmente, a un espacio tridimensional y organizada

funcionalmente, llamada cultura de la biopelícula mixta. Los resultados de la producción

de polímeros en la formación de una matriz extracelular compleja compuesta de glucanos,

fructanos y heteropolímeros solubles e insolubles. Esta matriz es un característica común

de biofilms y hace una contribución significativa a la conocida integridad estructural y a

la resistencia general de la biopelícula; la matriz puede ser biológicamente activa y

retener nutrientes, agua y enzimas que son importantes dentro las biopelículas (25).

Más estudios se requieren para entender completamente la influencia de la matriz en la

arquitectura y características de la placa dental. Cuando es vista por la luz convencional o

microscopia electrónica, la placa dental madura aparece como una densa estructura

empaquetada (21,29); sin embargo, el reciente uso de técnicas microscópicas nuevas ha

13

demostrado una arquitectura más abierta. Substratos endógenos (derivados de la saliva o

el líquido crevicular gingival) son la fuente principal de nutrientes para las bacterias

orales, pero su catabolismo requiere de concertadas y secuénciales acciones de grupos de

microbios con enzimas complementarias (8,9,10) esto quiere decir que la placa funciona

como una verdadera comunidad microbiana.

Fig.8. La heterogeneidad y la maduración de la placa aumentan con el tiempo. Como

resultado de los cambios ecológicos mas bacterias gramnegativas estrictamente

anaerobias colonizan secundariamente y contribuyen a una mayor patogenia del

biofilm. (Tomado de Lindhe. Periodontología Clínica e implantología odontológica.

Cuarta edición. Buenos Aires. Medica Panamericana 2005. p 85-97)

(e) Separación activa. Las bacterias pueden responder a las señales ambientales y

separarse de superficies, permitiendo a las células colonizar otras partes. Por ejemplo, las

enzimas producidas por las bacterias sésiles pueden hidrolizar los adhesinas específicas

que anclan en la superficie (8).

14

Una vez que esté establecido, la microflora residente de placa sigue siendo en un

cierto plazo relativamente estable y es ventajosa para el anfitrión (16,15). La microflora

residente de todos los sitios desempeña un papel crítico dentro del desarrollo normal de la

fisiología del anfitrión y también reduce las probabilidades de infección actuando como

barrera a la colonización por especies exógenas a menudo patógenas resistencia a la

colonización (23).

Los mecanismos que contribuyen a la resistencia de la colonización incluyen una eficaz

competición por los nutrientes y los sitios de adhesión, la producción de factores

inhibidores y la creación de condiciones desfavorables para el crecimiento de la

microflora residente. Así, el tratamiento debe controlar más que eliminar la microflora de

la placa dental.

Las bacterias se adhieren en forma variable a estas superficies recubiertas. Algunas

poseen estructuras para la adhesión específicas, como sustancias polimétricas

extracelulares y fimbrias, que les permiten una adhesión rápida al contacto. Otras

bacterias requieren una exposición prolongada para unirse firmemente. Su

comportamiento cambia una vez adheridas a las superficies. Esto implica el crecimiento

celular activo de bacterias antes inactivas y la síntesis de nuevos componentes de la

membrana exterior (27).

La masa bacteriana aumenta debido al crecimiento continuo de los microorganismos

adheridos, a la adhesión de nuevas bacterias y la síntesis de polímeros extracelulares. Con

el aumento del espesor, la difusión hacia adentro y afuera de la biopelícula se hace cada

vez más difícil. Se genera un gradiente de oxígeno como resultado de la rápida utilización

por parte de las capas bacterianas superficiales y una difusión deficiente del oxigeno a

través de la matriz de la biopelícula (22).

Las condiciones completas de anaerobiosis se producen por lo general en las capas mas

profundas de los depósitos. El oxígeno es un determinante ecológico importante debido a

que las bacterias varían en su capacidad para crecer y multiplicarse con los diferentes

niveles de oxígeno. Se produce la disminución de gradientes de los nutrientes provistos

15

por una fase acuosa, es decir, la saliva. Como resultado del metabolismo bacteriano se

desarrolla gradientes inversos de productos de fermentación.

En las regiones más profundas existen gradientes de difusión importantes, sobre todo para

el oxígeno.

Ubicuidad con que se detectan las especies anaerobias en estas áreas de las biopelículas

demuestra la evidencia de esos gradientes (15).

Las biopelículas son ubicuas; se forman virtualmente en todas las superficies inmersas en

medios acuosos naturales.

II.2.2 Variación de la biopelícula según las etapas de vida: Durante el primer año de vida

(cuando no hay dientes) en la boca predomina las bacterias anaerobias aerotolerantes así

como los estreptococos y lactobacilos, si bien otras bacterias, incluyendo algunas

aerobias, aparecen en un pequeño número.

Cuando aparecen los dientes hay un cambio marcado en el equilibrio de la microflora

(microbiota) hacia los aerobios, desarrollándose un tipo de bacterias adaptadas

específicamente al crecimiento sobre superficies y sobre las hendiduras de los dientes.

La colonización bacteriana de las superficies lisas de los dientes se produce como

consecuencia de un anclaje firme de células bacterianas individuales, seguido de un

crecimiento en forma de microcolonias. A partir de una superficie dentinaria recién

limpia, el primer evento es la formación de una fina película orgánica de varias micras de

espesor como resultado de la fijación de glucoproteínas ácidas de la saliva. Esta película

proporciona un sitio de anclaje mas firme para la colonización de microcolonias

bacterianas (32).

La colonización de esta película glicoproteica es muy específica y sólo implica a unas

cuantas especies de Streptococcus (primariamente S. Sanguis, S. Sobrinus, S. mutans y S.

mitis).

16

Como consecuencia del intenso crecimiento de estos organismos se forma una zona

bacteriana espesa denominada Placa dental. Si la placa sigue formándose, comienzan a

desarrollarse bacterias filamentosas, generalmente de Fusobacterium (31).

Las bacterias filamentosas se hallan embebidas en la matriz formada por estreptococos

que se extiende perpendicular a la superficie dentaria, constituyendo una capa bacteriana

más gruesa. Además de los estreptococos y en asociación con las bacterias filamentosas,

están las espiroquetas como las especies de Borrelia, bacilos gram positivos y cocos gram

negativos. En una placa gruesa pueden predominar los organismos filamentosos, así como

las especies anaerobias de actinomyces.

Podría sorprender la naturaleza anaeróbica de la microbiota teniendo en cuenta que la

boca posee una buena accesibilidad para el oxígeno. Es probable que la anoxia sea el

resultado de la acción de bacterias facultativas que se desarrollan en condiciones aerobias

sobre los materiales orgánicos de los dientes, puesto que la defensa matriz de la placa

disminuye la difusión del oxigeno en la superficie del diente.

Las poblaciones microbianas de la placa dental viven en un microambiente que ellas

mismas fabrican en parte y también luchando contra las grandes variaciones en el

microambiente de la cavidad oral.

17

Fig.9. Formación de la placa dental sobre un diente limpio (Tomado de Prescott,

Harley. Microbiología. Cuarta edición. Editorial Médica Panamericana .Barcelona

.2002. p 837)

En relación al suministro de nutrientes, éstos comprenden dos categorías: 1) los

endógenos, dado por las proteínas y glicoproteínas provenientes de la saliva y del fluído

crevicular y 2) los exógenos, dado por los carbohidratos provenientes de la dieta. Los

carbohidratos fermentables son los nutrientes que principalmente afectan la ecología

microbiana de la cavidad oral. El metabolismo intracelular de los carbohidratos, por parte

18

de las bacterias, lleva a la producción de ácidos que van a acidificar la biopelícula dental

(11).

En cuanto al pH, muchas de las especies bacterianas orales crecen en un rango de pH

relativamente limitado. Un pH neutro no tiene impacto sobre los niveles de las especies

del grupo mutans, mientras que un pH bajo lleva a un incremento de estas bacterias.

Los organismos anaerobios pueden enfrentarse a los efectos tóxicos del oxígeno

interactuando con especies que consumen oxígeno, reduciéndolo a niveles que permiten

el crecimiento de los primeros (12)

Fig.10. Biofilm, se aprecia los canales de fluído (Biofilm: a new plaque.

http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf).

La matriz esta penetrada por canales que conducen nutrientes, productos de desecho,

enzimas, metabolitos y oxigeno (27).La matriz circundante de las microcolonias sirve

como barrera de protección y esto explica porque los antimicrobianos no tienen siempre

éxito (27).

Las bacterias asociadas a la periodontitis residen tanto en la biopelícula que se encuentran

por encima como por debajo del margen gingival. La biopelícula supragingival está unido

a la superficie dentaria y está formado predominantemente por Actinomyces. Sin

embargo, la naturaleza de la biopelícula subgingival es más complicada, ya que existen

dos biopelículas diferentes, uno asociado a la superficie radicular y otro en íntima

relación con la superficie epitelial de la pared blanda de la bolsa. Este último contiene,

predominantemente, espiroquetas y especies gram negativas (P.gingivalis, Treponema

denticola, etc). Entre estos dos biopelículas existen una zona de baja densidad celular

compuesta por bacterias débilmente unidas que parecen estar en estado planctónico

19

(4,13).La microscopía ha confirmado que la placa tiene una arquitectura abierta similar a

otras biopelículas, con los canales y los vacíos. Los gradientes se desarrollan en áreas de

biomasa densa sobre distancias cortas en los parámetros claves que influencian

crecimiento microbiano y su distribución.

Característica general Placa dental

Arquitectura abierta Presencia de canales y de vacíos

Protección contra la defensa del huésped Producción de polímeros extracelulares

para formar la matriz funcional

Resistencia a los antimicrobianos

Aumenta la resistencia a la clorhexidina y

antibióticos

Neutralización de inhibidores Producción de B-lactamasa por las células

vecinas para proteger los organismos

sensibles

Gen de expresión Síntesis de proteínas; para la regulación de

gtfBC

Coordinación del gen respuesta

Producción celula-celula que señala las

moléculas

Espacial y heterogeneidad ambiental Gradientes de pH y O2; coadherencia

Un hábitat más amplio

El ambiente obliga a los anaerobios a

comportarse también como aerobio

Metabolismo eficiente Catabolismo completo macromoléculas

complejas del huésped (mucinas) cerca

consorcios

20

Tabla 2. Características generales de la placa dental y de comunidades microbianas

(Tomado de Marsh P.D. Dental plaque as a microbial biofilm. Caries Res 2004; 38:204-

211)

II.3.CARACTERÍSTICAS DE LAS BIOPELÍCULAS (1,4)

Definición de cada una de las características de la biopelícula.

II.3.1.- Adherencia: Es la capacidad que tiene cada microorganismo para adherirse a

una superficie

II.3.2.- Heterogeneidad de microorganismos y microambientes

II.3.3.- Quórum sensing: Hace referencia a la regulación de la expresión de

determinados genes a través de la acumulación de compuestos señalizadores que

miden la comunicación intercelular. El quorum sensing depende de la densidad

celular. Cuando la densidad celular de un biofilm es baja, los compuestos

señalizadores se producen en pequeñas cantidades, si bien, la autoinducción hace que

se incrementen estos niveles a medida que la densidad celular también aumenta. Una

vez que estos compuestos alcanzan un nivel umbral (densidad celular de quorum)

comienza la activación de la expresión genética.

El fenómeno de quorum sensing da a la biopelícula propiedades distintivas, además

de influir en la estructura de la comunidad bacteriana favoreciendo el crecimiento de

bacterias beneficiosas para el biofilm e impidiendo el desarrollo de especies

competidoras (13).

II.3.4.- Homeostasis microbiana: Es el mantenimiento de una microflora estable en un

medio variable.

II.3.5.-Los microorganismos tienen un sistema de comunicación primitivo.

II.3.6.-Los microorganismos en la biopelícula son resistentes a antibióticos,

antimicrobianos y a la respuesta del huésped.

II.3.7.-Los microorganismos se agrupan en microcolonias

II.3.8.-Las microcolonias son rodeadas por la matriz protectora.

II.3.9.- Cooperación entre los diferentes tipos de comunidades.

21

.

II.4. PRODUCTOS BACTERIANOS DENTRO DEL LAS BIOPELÍCULAS (1).

1. Enzimas como colagenasas, fibrinolisinas que degradan epitelios.

2. Liberación del lipopolisacárido por gérmenes Gram negativos

3. Producción de leucotoxinas que lisan los leucocitos PNM.

4. Proteasas que desdoblan Ig G e Ig A

5. Secreción de desechos metabolicos citotóxicos como ácido butírico y

propiónico

II.5.ESTRUCTURA DE LA PLACA DENTAL

II.5.1.PLACA SUPRAGINGIVAL

Esta placa en cantidades pequeñas no es visible clínicamente salvo que sea teñida con

soluciones reveladoras. La placa se desarrolla principalmente sobre el tercio gingival de

los dientes, prefiriendo zonas de fisuras superficiales, defectos áreas ásperas y márgenes

de restauraciones desbordantes (31).

Las superficies dentales, el esmalte y el cemento expuesto, están cubiertos normalmente

por una fina película de glucoproteínas. Si se la elimina, por ejemplo, mediante

instrumentación mecánica, se vuelve a formar en minutos. Se cree que la película el

primer material celular que se adhiere a la película sobre la superficie dentaria u otras

superficies sólidas, son bacteria cocoides con una serie de células epiteliales y leucocitos

polimorfonucleares. Se encuentran bacteria ya sea en la película o dentro de ella como

microorganismos aislados o como microorganismos agregados. Cantidades mayores de

microorganismos pueden ser transportadas a la superficie dentaria por células epiteliales.

La cantidad de bacteria hallada en la superficie algunas horas después de la limpieza

depende de los procedimientos aplicados a la muestra antes del examen; la razón es que la

adhesión a la superficie sólida es inicialmente muy débil. Si no se desempeña un papel

22

activo en la adhesión selectiva de las bacterias a la superficie dentaria. Al parecer la

adhesión de los microorganismos a la superficie sólida sucede en dos etapas:

1. Un estado reversible en que la bacteria se adhiere débilmente, y luego

2. Un estado irreversible durante el cual la adherencia se consolida (25)

Otro factor que puede modificar la cantidad de bacterias en los primeros depósitos de

placa es la presencia de gingivitis, que aumenta la velocidad de formación de placa de

modo que la composición bacteriana más compleja sucede inicialmente (29). El

crecimiento de la placa también puede iniciarse por microorganismos albergados en las

diminutas irregularidades en las que están protegidos contra la limpieza natural de la

superficie dentaria.

Durante estas primeras horas, las bacterias que resisten al despegamiento de la película

pueden comenzar a proliferar y a formar colonias pequeñas de microorganismos

morfológicamente similares. Sin embargo, dado que otros tipos de microorganismos

también pueden comenzar a proliferar en una región adyacente, la película se puebla

fácilmente con una mezcla de diferentes microorganismos (29). Además, algunos de

ellos son capaces de crecer entre las colonias ya establecidas. Por último, es probable que

racimos de microorganismos de diferentes especies se adhieran a la superficie dentaria o a

otros microorganismos ya adheridos y contribuyan a la complejidad de la composición de

la placa después de algunos días. En este momento, los diferentes tipos de

microorganismos pueden beneficiarse mutuamente. Un ejemplo es la configuración en

forma de mazorca, producto del crecimiento de cocos sobre la superficie de un

microorganismo filamentoso (33).

Una característica de la placa mas antigua es la presencia de bacterias muertas y lisadas,

que pueden proveer nutrientes adicionales a las bacterias aun viables dentro del mismo

entorno (16).

El material presente entre las bacterias de la placa dental es llamado matriz

intermicrobiana y constituye aproximadamente el 25% del volumen de la placa. Tres

fuentes pueden contribuir a la matriz intermicrobiana: los microorganismos de la placa, la

saliva y el exudado gingival.

Las bacterias pueden liberar varios productos metabólicos. Algunas pueden liberar va-

rios productos metabólicos. Algunas pueden producir diversos polímeros de carbohi-

23

dratos extracelulares, que sirven como almacenamiento de energía o como material de

anclaje para asegurar su retención en la placa (8,27).

Las bacterias en degeneración o muertas también pueden contribuir a la matriz

intermicrobiana.

Las diferentes especies bacterianas a menudo poseen distintas vías metabólicas y

capacidad para sintetizar material extracelular. Por lo tanto, la matriz intermicrobiana de

la placa varía considerablemente de una región a otra. Suele observarse un componente

fibrilar en la matriz entre los cocos grampositivos y concuerda con el hecho de que varios

estreptococos bucales sintetizan lévanos y glucanos de la sacarosa de la dieta. En otras

regiones, la matriz tiene un aspecto granular u homogéneo. En partes de la placa con

presencia de microorganismos gramnegativos, la matriz intermicrobiana se caracteriza

por la presencia de vesículas pequeñas rodeadas de una membrana trilaminar, que es

similar en estructura a la envoltura externa de la pared celular de los microorganismos

gramnegativos. Estas vesículas probablemente contengan endotoxinas y enzimas

proteolitícas y también pueden participar en la adhesión entre las bacterias (27).

Los carbohidratos de la matriz han recibido mucha atención y al menos algunos de los

polisacáridos de la matriz de la placa están bien identificados: fructanos (levanos) y

glucanos. Los fructanos son sintetizados en la placa a través de la sacarosa de la dieta y

constituye un almacenamiento de energía que pueden utilizar los microorganismos en los

momentos de aporte escaso de azúcar. Los glucanos también se sintetizan a partir de la

sacarosa. Un tipo de glucano es el dextrano, que también sirve de almacenamiento de

energía. Otro glucano es el mutano, que no se degrada con facilidad, pero actúa

primordialmente como esqueleto de la matriz, de la misma manera que el colágeno

estabiliza la sustancia intercelular del tejido conectivo. Se ha sugerido que estos

polímeros de carbohidratos pueden ser los causantes del cambio de la placa reversible a

irreversible (29).

La pequeña cantidad de lípidos de la matriz de la placa no esta aun caracterizada. Parte

del contenido lipídico se encuentra en pequeñas vesículas extracelulares, que pueden

contener endotoxinas formadas por lipopolisacaridos de bacterias gramnegativas.

La maduración de la placa produce inflamación de la encía marginal y aumento del

fluído gingival.

24

II.5.2.PLACA SUBGINGIVAL

La placa subgingival se asemeja a la supragingival, aunque los tipos predominantes de

microorganismos varían considerablemente de los que residen hacia la zona contraria del

margen gingival (24).

Entre la placa subgingival y el diente se interpone un material orgánico electrodenso,

denominado cutícula. Esta cutícula probablemente contiene los restos de la lámina de la

adhesión epitelial que originalmente conectaba el epitelio de unión al diente con el

agregado de material depositado proveniente del exudado gingival (13). Se ha sugerido

que la cutícula representa un producto secretor de las células epiteliales adyacentes (7).

Falta información acerca de su composición química, pero su localización en el área

subgingival hace probable que los componentes de la saliva contribuyan a su formación.

La placa subgingival se asemeja estructuralmente a la placa supragingival, sobretodo con

respecto a la placa asociada con gingivitis sin formación de bolsas profundas. Se observa

una acumulación densa de microorganismos adyacentes al material cuticular que recubre

la superficie dentaria. Las bacterias comprenden cocos, bacilos y microorganismos

filamentosos gramnegativos y grampositivos. También se pueden hallar espiroquetas y

varias bacterias flageladas, en especial en la extensión apical de la placa. La capa

superficial a menudo es menos densa y los leucocitos están interpuestos de manera

regular entre la placa y el recubrimiento epitelial del surco gingival (24).

Cuando se forma una bolsa periodontal, el aspecto de los depósitos bacterianos

subgingivales se torna más complejo. En este caso la superficie dentaria puede estar

representada por esmalte o por segmento del cual se desprendieron las fibras

periodontales. La acumulación de placa en la porción del diente previamente cubierta por

los tejidos periodontales no difiere demasiado de la observada en la gingivitis. En esta

capa predominan los microorganismos filamentosos, pero también aparecen cocos y

bacilos. Sin embargo, en las zonas mas profundas de la bolsa periodontal, los

microorganismos filamentosos disminuyen en número y en la porción apical parecen estar

casi ausentes. En su lugar, los depósitos bacterianos densos y que contactan con el diente

están denominados por microorganismos más pequeños sin orientación particular (27).

25

Las principales bacterias encargadas de la destrucción periodontal en las profundidades

de la bolsa son: Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus,

Actinobacillus actinomycetemcomitans y treponema denticola.

Existe un predominio de bacterias asociadas a periodontitis cronica: asi tenemos a la

Porphyromonas gingivales gramnegativas que son altamente virulentas, tienen una gran

capacidad de inducir la reabsorción osea, destruir el tejido conectivo, inducir a las

citoquinas e inhibir los mecanismos de protección del huésped. Las Fusobacterium

nucleatum producen altas concentraciones de acido butirico, capaz de producir cambios

inflamatorios, por lo general asociadas a infecciones periimplantares(25).

Las capas superficiales de microorganismos en las bolsas periodontales en el lado del

tejido blando son claramente diferentes de la capa adherente a lo largo de la superficie

dentaria, y no se aprecia una matriz intermicrobiana definida. Estos microorganismos son

una gran cantidad de espiroquetas y bacterias flageladas. También hay cocos y bacilos

gramnegativos. La gran cantidad de espiroquetas y microorganismos flagelados son

materias móviles y no existe matriz intermicrobiana entre ellos. La parte mas externa de

la acumulación microbiana en las bolsas periodontales se adhiere débilmente a la pared

blanda de la bolsa (28).

Los Actinomyces están fuertemente asociados a la periodonitis juvenil y a la periodontitis

de progresión rápida, estas bacterias son capaces de evadir la respuesta del huésped y

producir la destrucción del tejido conectivo y hueso, Bacteroides forshytus gramnegativos

anaerobios se encuentran en las bolsas profundas (27).

Los depósitos bacterianos en las bolsas profundas son mucho más delgados que los

hallados en las formas adultas de enfermedad periodontal. Algunas veces las áreas de las

superficies dentarias pueden estar desprovistas de depósitos microbianos adheridos. El

material cuticular posee un espesor irregular. La capa adherente de microorganismos

varía considerablemente de espesor y disposición. Puede exhibir una organización

bacteriana en empalizada. Los microorganismos en esta capa son principalmente cocos,

bacilos y bacterias filamentosas, sobre todo del tipo gramnegativo. También se puede

hallar una capa superficial con algunos cocos grampositivos, asociados con

microorganismos filamentosos en la configuración típica de mazorca (34).

26

Las bacterias localizadas subgingivalmente parecen tener capacidad para invadir los

túbulos dentarios que están abiertos como consecuencia de reabsorciones inflamatorias

presentes en el cemento (28). Este hábitat puede servir como fuente de recolonización del

espacio subgingival después del tratamiento de la enfermedad periodontal. Los

mecanismos involucrados en esta invasión inversa del espacio subgingival se desconoce.

II.6. LA BIOPELÍCULA Y CARIES DENTAL

La caries dental vendría a ser el resultado de los cambios ocurridos en el balance de la

microflora que reside en la placa, como consecuencia de la modificación de las

condiciones medioambientales locales. Por ejemplo, las condiciones repetidas de un pH

bajo en la placa luego del consumo frecuente de azúcares que favorecen el predominio de

las especies cariógenas, y la disminución del flujo salival (2).

Según la hipótesis de la placa ecológica de Marsh; señala que en un microambiente con

pH neutro las bacterias predominantes son las S. oralis y las S. sanguis cuando este

microambiente cambia por el exceso de azúcares a un pH ácido ocurre el fenómeno de la

desmineralización además de que aumentan los lactobacilos luego el medio retorna a un

ambiente neutro sucediendo el fenómeno de la remineralización (18).

Fig.11. Hipótesis de la placa ecológica de Marsh (Pérez A. La biopelícula una nueva

visión de la placa dental. Rev Estomatol Herediana 2005; 15 (1): 82-85)

27

II.7.BACTERIAS DE LA BOCA:

Aproximadamente 400 a 500 especies bacterianas son encontradas en muestras de placas

subgingivales de humanos, es posible que 10 a 20 especies cumplan un rol patogénico y

destructivo en la enfermedad periodontal (29).

Las bacterias anaerobias comprenden un importante grupo de la microbiota normal de los

humanos. Bacterias gram negativas son consideradas como residentes de la flora oral,

intestinal y vaginal.

Las bacterias anaerobias se encuentran diseminadas en la naturaleza. Estan presentes en

casi todas las infecciones. Las infecciones que envuelven anaerobios son frecuentemente

polimicribiales, encontrandos mezclados con aerobios facultativos y otros anaerobios,

estas infecciones son comunes y se encuentran asociadas con altas tasas de morbilidad y

mortalidad.

La mayor parte de las bacterias salivales provienen del dorso de la lengua, de donde se

desprenden por acción mecánica; cantidades menores provienen de las mucosa bucales

(30)

El surco gingival es el lugar predilecto para el crecimiento microbiano pero estos tienen

que evadir una serie de obstáculos como el mecanismo de defensa no especifico como es

el flujo de la saliva y fluído gingival.

De entre todas las bacterias que forman el biofilm bacteriano existen tres que tienen una

relevancia especial en el inicio y la progresión de la enfermedad periodontal, son

Actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalisy Tannerella forsythesis (19). El

origen de estas especies es exógeno; no forman parte de la flora habitual y el tratamiento

debe tener como objetivo su eliminación total.

Microflora bacteriana oral

• Estreptococo( es el grupo más numeroso)

-Aerobios facultativos

-Representa la mitad de las formas viables en saliva y dorso lingual

28

-Representan un cuarto de las cuentas en placa y surco gingival

-El más abundante de los estreptococos es el grupo de viridans: Impide otras

colonizaciones al producir bacteriocinas, causa infección seria cuando hay ulcera y

compromiso del sistema inmúne, produce exotoxinas, enzimas liticas, activa el

complemento e induce generación de citoquinas.

-Estreptococos orales estan asociados a abscesos y endocarditis bacteriana

-Otros estreptococos aislados S. mitis, S. oralis, S.gordonii,S. Anginosus, S. constelltus y

S. .intermedius.

• Otros cocos gran positivos importantes:

-Peptoestreptococus:

Anaerobio obligado grampositivas

Significante en flora subgingival y enfermedad periodontal avanzada

Abscesos odontogenicos.

Enterococos en pequeño porcentajes

Estafilococos aureos en pequeñas cantidades.

• Bacilos grampositivas y filamentos

-Actinomyces (anaerobios y aerobios facultativos)

A.israeli, A.viscosus, A. naeslundi, A.odonlolycus

-Especies de eubacterias

-Difieroides.

-Corynebacterium

29

• Cocos gramnegativos

Especies de Veillonella (anaerobio)

Especies de Neisseria (facultativo)

• Bacilos anaerobio gramnegativos y filamentos

Prevotella (anaeróbicas y microaerofilos)

Porphyromonas gingivalis (bacilo anaerobio gram negativo), Selenomonas.

Bacteroides.

Fusobacterium, Campilobacter, Actinobacillus y Capnocytofa

30

III. CONCLUSIONES

1. La placa dental muestra características que son típicas de las biopelículas y

comunidades microbianas generales.

2. Las biopelículas son ubicuas es decir se forman en todas las superficies inmersas en

medios acuosos.

3. La biopelícula dental en las primeras 24 horas esta constituída básicamente por

cocos gram positivos (Streptococcus y Actinomyces) y cocos facultativos que

representan a los gram negativos.

4. La colonización de esta película glicoproteíca es muy específica y sólo implica a

unas cuantas especies de Streptococcus (primariamente S. Sanguis, S. Sobrinus, S.

mutans y S. mitis).

5. La biopelícula supragingival y subgingival tiene similar estructura y

características.

6. La biopelícula supragingival y subgingival tienen diferente composición bacteriana.

7. La biopelícula supragingival esta unido a la superficie dentaria y está formado

predominantemente por Actinomyces.

8. La biopelícula subgingival predominan espiroquetas y especies gram negativas

(Treponema denticola, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia,

Bacteroides forythus, Actinobacillus actinomycetemcomitans)

9. La placa subgingival está compuesta por bacilos gram positivos y cocos

streptococcus mitis, S. sanguis, Eubacterium, Actinomyces viscosus, Actinomyces

naeslundi, Bacteroides melaninogénicus, Fusobacterium y Capnocytophaga sin

organizarse, mas apicalmente se encuentran filamentos gramnegativos,

espiroquetas, células epiteliales y leucocitos.

10. Las principales bacterias encargadas de la destrucción periodontal en las

profundidades de la bolsa son: Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia,

31

Bacteroides forythus, Actinobacillus actinomycetemcomitans y treponema

denticola.

11. Las bacterias que se relacionan con la enfermedad periodontal son los bacilos

anaeróbicos gramnegativos, con algunos cocos anaerobios y una gran cantidad de

espiroquetas anaeróbicas.

12. De entre todas las bacterias que forman la biopelícula bacteriana existen tres que

tienen una relevancia especial en el inicio y la progresión de la enfermedad

periodontal, son Actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalisy Tannerella

forsythesis.

13. Es importante que continúen las investigaciones sobre la resistencia bacteriana

dentro de los biofilms, la patogenicidad propia de las bacterias conocidas y las que

todavía quedan por conocer, la susceptibilidad propia del paciente para producir una

respuesta inflamatoria efectiva contra los patógenos periodontales.

32

IV. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Betancourth, Botero. Biopelículas: una comunidad microscópica en desarrollo.

Colombia Médica 2004; 35 (Supl 1): 34-39.

2. Pérez A. La biopelícula una nueva visión de la placa dental. Rev Estomatol

Herediana 2005; 15 (1): 82-85.

3. Socransky SS, Haffajee AD. Dental biofilms: difficult therapeutic targets.

Periodontol 2000, 2002; 28: 12-55.

4. Costerton W et al. The application of biofilm science to the study and control of

chronic bacterial infections. J Clin Invest 2003; 15; 112 (10): 1466-77.

5. Archives of Oral Biology Spatial distribution of vital and dead microorganisms in

dental biofilms. http://www.blackwell-synergy.com/doi/abs10. (15/01/06).

6. Rüdiger SG, Carlen A. Dental biofilms at healthy and inflamed gingival margins. J

Clin Periodontol 2002, 29: 524-530.

7. Costerton JW. Introduction to biofilms. Int J Antimicrob Agents 1999; 11: 217-221.

8. Marsh P.D. Dental plaque as a microbial biofilm. Caries Res 2004; 38 :204-211.

9. Auschill T M, Hein N, Hellwig E. Effect of two antimicrobial agents on early in situ

biofilm formation. J Clin Periodontol 2005; 32:147-152.

10. Arweiler N.B. Hellwig E, Sculean A. Individual vitality pattern of in situ dental

biofilms at different locations in the oral cavity. Caries Res 2004; 38: 442-447.

11. Shapiro S. Giertsen E. Guggenheim B. An invitro oral biofilm model for comparing

the efficacy of antimicrobial mothrinses. Caries Res 2002; 36: 93-100.

12. Auschill TM, Arweiler NB, Brecx M. The effects of dental restorative materials on

dental biofilm. Eur J Oral Sci 2002; 110: 48-53.

13. Watnick P, Kolter R. Biofilm city of microbes. Journal of bacteriology, May 2000, p.

2675-2679.

14. Ramberg P, Lindhe J, Dahlen G and Volpe AR: The influence of gingival

inflammation on the novo plaque formation. J Clin Periodontol 1994; 21: 51-56.

33

15. Newman HN, Wilson M, eds. Dental plaque revisited. Oral biofilms in heath and

disease. UK: BioLine; 1999: 240.

16. Marsh PD. Dental plaque: biological significance of biofilm and community life style.

J Clin Periodontol 2005; 32 (Suppl.6): 7 – 15.

17. Marsh PD. Sugar, fluoride, pH and microbial homeostasis in dental plaque. Proc Finn

Dent Soc 1991; 87: 515-25.

18. Marquis RE. Oxygen metabolism, oxidative stress and acid-base physiology of dental

plaque biofilms. J Int Microbiol 1995; 15: 198-207.

19. Pasado, presente y futuro de la microbiología de la periodontitis http://

scielo.isciii.es/scielo.php ?script=scri_arttex&pid=S1130-14572000. (15/01/06)

20. Robinson C, Kirkham J, Percival R. A method for the quantitative site-specific study

of yhe biochemistry within dental plaque biofilms formes in vivo. Caries Res 1997;

31:194-200.

21. Sculeman A, Auschill T M. Effect of enamel matrix protein derivative on ex vivo

dental plaque vitality. J Clin Periodontol 2001; 28:1074-1078.

22. Listgarten MA, Slots J, Rosenberg J, Nitkin L, Sullivan P, Oler J. Clinical and

microbiological characteristics of treated periodontitis patients on maintenance care. J

Periodontol. 1989 Aug; 60 (8):452-9.

23. Haffajee AD, Bogren A, Hasturk H, Feres M, Lopez NJ, Socransky SS. Subgingival

microbiota of chronic periodontitis subjects from different geographic locations. J

Clin Periodontol 2004; 31: 996–1002.

24. Kinane D. Causation and pathogenesis Periodontal Diaseases. J Clin Periodontol

2001; 25:8-20.

25. Socransky SS, Haffajje AD. Evidence of bacteriology: a historical perspective.

Periodontology 2000; 5: 134-44.

26. Dowsett S.A, Kowolik MJ. Subgingival microbiota of indigenous indians of central

America. J Clin Periodontol 2002; 29: 159-167.

27. Haffajee AD, Bogren A, Hasturk H. Subgingival microbiota of chronic periodontitis

subjects from different geographic locations. J Clin Periodontol 2004; 31:996-1002.

34

28. Ximénez-Fyvie LA, Haffajee AD, Socransky SS: Microbial composition of supra and

subgingival plaque in subjects with adult periodontitis. J Clin Periodontol 2000; 27:

722–732.

29. Ximénez – Fyvie LA, Haffajee AD, Socransky SS: Comparison of the microbiota of

supra and subgingival plaque in health and periodontitis. J Clin Periodontol 2000;

27:648-657.

30. Lindhe. Periodontologia Clínica e implantologia odontológica. Cuarta edición.

Buenos Aires. Medica Panamericana 2005. p 85-97.

31. Brock, Biología de los microorganismos. Octava edición revisada Madrid. Mc Graw

Hill. Interamericana 2000 p.789.

32. Prescott, Harley. Microbiología. Cuarta edición. Editorial Médica Panamericana

.Barcelona .2002. p 837.

33. Socransky SS, Haffajje AD, Cugini MA. Microbial complexes in sub gingival

plaque. J Clin Periodontol 1998; 25: 134-144.

34. Biofilm: a new plaque. http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf

(15/01/06)