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I primi strumenti di I primi strumenti di osservazioneosservazione

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Forma e Forma e dimensione dei dimensione dei microrganismimicrorganismi

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Microscopio otticoMicroscopio ottico

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Microscopio otticoMicroscopio ottico

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Microscopio Microscopio otticoottico

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Staphylococcus aureus

Streptococcus pneumoniae

Preparati colorati per l’osservazione con microscopio

ottico

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Bacillus anthracis

Bacillus cereus

spore

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Potere di risoluzione di un Potere di risoluzione di un microscopiomicroscopio

Potere risolutivoPotere risolutivo

D = λ/n sen θ

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POTERE DI RISOLUZIONE

PER POTERE DI RISOLUZIONE SI INTENDE LA CAPACITA’ DI DISTINGUERE DUE PUNTI ADIACENTI BEN SEPARATI

POTERE DI RISOLUZIONE D = λ/n sen θ

E’ FUNZIONE DELLA LUNGHEZZA D’ ONDA DELLA LUCE IMPIEGATA E DELL’APERTURA NUMERICA CHE DIPENDE DALLE CARATTERISTICHE DEL SISTEMA DI LENTI

APERTURA NUMERICA = I SEN α OPPURE N SEN θ

I è L’INDICE DI RIFRAZIONE DEL MEZZO INTERPOSTO TRA L’OGGETTO SUL VETRINOE LA LENTE FRONTALE DEL MICROSCOPIO

I = 1 SE IL MEZZO è L’ARIA

I = 1,52 SE IL MEZZO è L’OLIO DI CEDRO

IL MASSIMO DI APERTURA NUMERICA POTRA’ ESSERE DIPOCO INFERIORE O SUPERIORE A 1 A IN RELAZIONE AL MEZZO INTERPOSTO IMPIEGATO .

ESEMPI (CALCOLO APERTURA NUMERICA) : ARIA 1 SEN 144°/2 = SEN 72° = 0,95OLIO DI CEDRO 1,52 SEN 139°/2 = 1,43

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Apertura Apertura numericanumerica

Angolo θ è la metà dell’angolo di apertura del cono di luce

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Rifrazione luceRifrazione luce

La rappresentazione grafica è indicativa del percorso della La rappresentazione grafica è indicativa del percorso della radiazione luminosa attraverso due mezzi di propagazione con indice radiazione luminosa attraverso due mezzi di propagazione con indice di rifrazione uguale o differente.di rifrazione uguale o differente.

ARIA

Lente a secco ad alto ingrandimento

Lente ad immersione in olio di cedro

Aria n = 1

Olio di cedro n = 1,52

vetro vetro

Olio

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Microscopio Microscopio elettronicoelettronico

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Il microscopio elettronico permette una risoluzione 250 000 volte superiore Il microscopio elettronico permette una risoluzione 250 000 volte superiore a quella di un m.o. (0,2 um)a quella di un m.o. (0,2 um)

Con il m. e. è stato possibile studiare i dettagli delle strutture cellulari.Con il m. e. è stato possibile studiare i dettagli delle strutture cellulari.

L’immagine vista al m.e. a L’immagine vista al m.e. a trasmissione o a scansionetrasmissione o a scansione non può essere non può essere osservata direttamente perché il fascio di elettroni possiede un elevato osservata direttamente perché il fascio di elettroni possiede un elevato contenuto di energiacontenuto di energia

Per il m. e. a trasmissione vanno preparate sezioni ultrasottili del Per il m. e. a trasmissione vanno preparate sezioni ultrasottili del campione.campione.

Le foto al m. e. rappresentano solo una sezione del campione osservato, il Le foto al m. e. rappresentano solo una sezione del campione osservato, il preparato dopo avere attraversato il campione cade su una lastra preparato dopo avere attraversato il campione cade su una lastra fotografica o schermo fluorescente.fotografica o schermo fluorescente.

Un altro tipo di m.e. è quello a Un altro tipo di m.e. è quello a scansionescansione il fascio elettronico non passa il fascio elettronico non passa attraverso il campione vengono emessi elettroni secondari la cui intensità attraverso il campione vengono emessi elettroni secondari la cui intensità varia al variare dei contorni della superficie. IL SEM dà informazioni sul varia al variare dei contorni della superficie. IL SEM dà informazioni sul campione che non si possono ottenere con un microscopio di tipo TEM. campione che non si possono ottenere con un microscopio di tipo TEM.

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Immagini di batteri Immagini di batteri al microscopio al microscopio elettronico a elettronico a scansionescansione

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Esame a Esame a frescofresco

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Goccia pendenteGoccia pendente