UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI PALERMOFACOLTA’ DI SCIENZE MM.FF.NN

CORSO DI LAUREA IN SCIENZE BIOLOGICHE

Identificazione e suscettibilità ai farmaci antimicrobici di Klebsiella spp. in campioni animali e derivati

Relazione di tirocinio di:Valeria Prestigiacomo Tutor universitario:

Dr.ssa Mirella Vazzana

Tutor aziendale:Dott. Santo Caracappa

Anno Accademico 2011-2012

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Klebsiella spp

campione

isolamento identificazione

antibiogramma

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Enterobacteriaceae

E. coli

Enterobacter

Salmonella

Proteus

Klebsiella

Serratia

Yersinia

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Patogenesi

Capsula Lipopolisaccaridi

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Isolamento colturale di Klebsiella spp

McConkey, terreno:

Selettivo Differenziale

Incubazione: 37° C per 24h

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Prove Biochimiche

Catalasi

2 H2O2 2 H2O + O2

4 ferrosocitocromo c + O2 + 4 H 4 ferrosocitrocomo c + 2 H2O

Ossidasireazione -

reazione +

+

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Colorazione Gram

Coloranti e decoloranti:

- Cristalvioletto- Lugol- Alcol o acetone- Safranina

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Procedimento: Visione al microscopio di Klebsiella

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Prove per infissione e strisciamento su terreni di coltura

Kligler Iron Agar

Solfuro Indole Motility

Citrato di Simmons

Urea

Reazioni prodotte da KlebsiellaValeria Prestigiacomo-UNIPA

KIA

SIM

Citrato

Urea

+-

+ -

+

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Prove di identificazione: API 20EPrima dell’incubazione

Dopo circa 24h a 37°C

Risultato ottenuto:

Klebsiella pneumoniae

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

AntibiogrammaMetodo Kirby Bauer

Antibiotici testati:

Sulphametroxazole-Trimethoprim (SXT)

Cephalexin (CL)Amoxicillin-

Clavulanic acid (AMC) Ampicillin (AMP) Ceftiofur (FUR) Enrofloxacin-Baytril (ENR) Gentamicin (CN) Tetracycline (TE)

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Risultato ottenuto dopo l’incubazione

Sensibilità ai farmaci antimicrobici di due diversi ceppi di Klebsiella

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

RisultatiCampione Specie SXT CL AMC AMP FUR ENR CN TE

Fegato Uccello S S S R S S S S

Feci Bovino S S S S S S S S

Intestino Ovino S S S R S S S S

Latte Bovino S S S S S S S S

Feci Emù S S S R S S S S

T.faringeo Cane S R S R R R R R

Rene Cane S S S R S S S S

Fegato Coniglio S S S R S S S S

Latte Bovino S S S R S S S S

Milza n 83 Bovino S S S R S S S S

Latte Vacca S S S R S S S S

Polmone Cane S S S R S I S R

T.congiuntivale Cane R R I R R R R R

Fegato Cane S S S R S S S S

Fegato Cane S R S R R R R R

Latte Ovino S S R I S S S S

T.nasale Gatto S R R R R S S I

Fegato Volpe R S S R S S S R

Feci Gazella S S S R S S S S

Fegato Pecora S S S S S S S S

Latte Pecora S S S R S S S S

T.vaginale Euino S S S R S S S S

Feci Equino S S S S S S S S

Fegato Lucertola S S S R S S S I

Intestino aborto Alpaca S I I R S S S R

Milza Cane I R I R R R R R

Tampone Cane S S S R S S S I

Fegato Pecora S S S R S S S S

Milza n82 Bovino S S S R S S S R

Polmone Cane S S S I S S S S

0,0010,0020,0030,0040,0050,0060,0070,0080,0090,00

100,00

SXT CL AMC AMP FUR ENR CN TE

S%

R%

I%

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Considerazioni

La maggior parte dei ceppi ottenuti sono risultati resistenti ad almeno un farmaco antimicrobico

Il 27% dei ceppi isolati è risultato ad almeno 3 antibiotici

Due ceppi sono risultati resistenti a TUTTI gli antibiotici saggiati

Valeria Prestigiacomo-UNIPA

Ringrazioil Dott. Caracappa Santo,

la Dott.ssa Vazzana Mirellaper la disponibilità e la collaborazione.

Valeria Prestigiacomo-UNIPA