Tesi- Corso di Laurea in Scienze Biologiche- Valeria Prestigiacomo
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UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI PALERMOFACOLTA’ DI SCIENZE MM.FF.NN
CORSO DI LAUREA IN SCIENZE BIOLOGICHE
Identificazione e suscettibilità ai farmaci antimicrobici di Klebsiella spp. in campioni animali e derivati
Relazione di tirocinio di:Valeria Prestigiacomo Tutor universitario:
Dr.ssa Mirella Vazzana
Tutor aziendale:Dott. Santo Caracappa
Anno Accademico 2011-2012
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Klebsiella spp
campione
isolamento identificazione
antibiogramma
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Enterobacteriaceae
E. coli
Enterobacter
Salmonella
Proteus
Klebsiella
Serratia
Yersinia
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Patogenesi
Capsula Lipopolisaccaridi
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Isolamento colturale di Klebsiella spp
McConkey, terreno:
Selettivo Differenziale
Incubazione: 37° C per 24h
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Prove Biochimiche
Catalasi
2 H2O2 2 H2O + O2
4 ferrosocitocromo c + O2 + 4 H 4 ferrosocitrocomo c + 2 H2O
Ossidasireazione -
reazione +
+
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Colorazione Gram
Coloranti e decoloranti:
- Cristalvioletto- Lugol- Alcol o acetone- Safranina
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Procedimento: Visione al microscopio di Klebsiella
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Prove per infissione e strisciamento su terreni di coltura
Kligler Iron Agar
Solfuro Indole Motility
Citrato di Simmons
Urea
Reazioni prodotte da KlebsiellaValeria Prestigiacomo-UNIPA
KIA
SIM
Citrato
Urea
+-
+ -
+
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Prove di identificazione: API 20EPrima dell’incubazione
Dopo circa 24h a 37°C
Risultato ottenuto:
Klebsiella pneumoniae
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
AntibiogrammaMetodo Kirby Bauer
Antibiotici testati:
Sulphametroxazole-Trimethoprim (SXT)
Cephalexin (CL)Amoxicillin-
Clavulanic acid (AMC) Ampicillin (AMP) Ceftiofur (FUR) Enrofloxacin-Baytril (ENR) Gentamicin (CN) Tetracycline (TE)
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Risultato ottenuto dopo l’incubazione
Sensibilità ai farmaci antimicrobici di due diversi ceppi di Klebsiella
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
RisultatiCampione Specie SXT CL AMC AMP FUR ENR CN TE
Fegato Uccello S S S R S S S S
Feci Bovino S S S S S S S S
Intestino Ovino S S S R S S S S
Latte Bovino S S S S S S S S
Feci Emù S S S R S S S S
T.faringeo Cane S R S R R R R R
Rene Cane S S S R S S S S
Fegato Coniglio S S S R S S S S
Latte Bovino S S S R S S S S
Milza n 83 Bovino S S S R S S S S
Latte Vacca S S S R S S S S
Polmone Cane S S S R S I S R
T.congiuntivale Cane R R I R R R R R
Fegato Cane S S S R S S S S
Fegato Cane S R S R R R R R
Latte Ovino S S R I S S S S
T.nasale Gatto S R R R R S S I
Fegato Volpe R S S R S S S R
Feci Gazella S S S R S S S S
Fegato Pecora S S S S S S S S
Latte Pecora S S S R S S S S
T.vaginale Euino S S S R S S S S
Feci Equino S S S S S S S S
Fegato Lucertola S S S R S S S I
Intestino aborto Alpaca S I I R S S S R
Milza Cane I R I R R R R R
Tampone Cane S S S R S S S I
Fegato Pecora S S S R S S S S
Milza n82 Bovino S S S R S S S R
Polmone Cane S S S I S S S S
0,0010,0020,0030,0040,0050,0060,0070,0080,0090,00
100,00
SXT CL AMC AMP FUR ENR CN TE
S%
R%
I%
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Considerazioni
La maggior parte dei ceppi ottenuti sono risultati resistenti ad almeno un farmaco antimicrobico
Il 27% dei ceppi isolati è risultato ad almeno 3 antibiotici
Due ceppi sono risultati resistenti a TUTTI gli antibiotici saggiati
Valeria Prestigiacomo-UNIPA
Ringrazioil Dott. Caracappa Santo,
la Dott.ssa Vazzana Mirellaper la disponibilità e la collaborazione.
Valeria Prestigiacomo-UNIPA