Aspetti biochimici e molecolari della malattia di Fabry
Andrea Dardis, PhDCentro di Coordinamento Regionale per le Malattie Rare
University Hospital “Santa Maria della Misericordia”Udine, Italy
Malattia di Fabry
• Malattia da accumulo lisosomiale
• 1:40.000 maschi
• Causa: deficit dell’enzima alfa-galattosidasi A (AGAL-A)
• Deputata alla degradazione di Globotriaosilceramide(Gb3) e Globotriaosilsfingosina (LysoGb3) nei lisosomi
Lisosoma
Sfingosine
Sfingosine
Globotriaosylsphingosine (LysoGb3)
Lactosylsphingosine
Sintesi e trasporto di AGAL-A
X linked: Gene GLA (Xq22.1)
XY
Donne portatrici in eterozigosi, come conseguenza
dell’inattivazione casuale del X, possono essere asintomatiche o
sviluppare sintomi.
XX
Maschi emizigoti sono affetti
Diagnosi enzimatica
Determinazione dell’attività dell’enzima AGAL-A nelle cellule del paziente affidabile e rapida
�Non informativa nelle femmine
�XY �Maschi emizigoti presentano un’attività della AGAL-A chiaramente
patologica (<5%)
�XX�Come conseguenza dell’inattivazione casuale dell’ X, l’
attività enzimatica può risultare alterata o nella norma.
Diagnosi molecolare
�Conferma diagnostica nei maschi�Diagnostica nelle femmine�Consulenza genetica
Gene GLA
�gDNA: 13 kb; 7 esoni�cDNA: 1290 pb�Proteina: 429 aa (31 aa signal peptide)
Circa 700 varianti nel gene GLA!!
La maggior parte puntiformi
Delezione o duplicazione
Mutazioni patogenetiche:
�Mutazioni missenso- Analisi funzionale (p.C52, p.G183A, p.Y216C, p.C172G, pD264Y)�Mutazioni non senso�Frameshift
Polimorfismi: p.D313Yp.E66Q
Mutazioni missenso non riportate in letteratura:
Analisi di 100 alleli normaliAnalisi in silicoFunzionale.
Le varianti del gene GLA
Criteri proposti per definire la diagnosi di malattia diFabry classica
Van der Tol et al, J Med Genet , 2014
Variati atipiche
�Segni clinici aspecifici
�Attività residua della AGAL-A in leucociti >5%
�Varianti genetiche di significato incerto (GVUS):
p.A143T
p.R112H
p.R118C
ecc
Non trovati in pazienti con la forma classica di Fabry
Dati controversi
Attività residua in vitro 30-40%
Dosaggio in plasma di LysoGb3 Suggestivo di FD
N Non esclude FD però
in maschi, FD altamente improbabile
Imaging e prove funzionali
Biopsia dell’organo affetto
X Y X X
XY XX XXXY
Gene GLA (Xq22.1)
Padre Madre portatrice
Figlio sano
(25%)
Figlia sana
(25%)
Figlio Affetto
(25%)
Figlia portatrice
(25%)
X Y X X
XY XX XXXY
Padre affetto Madre
Gene GLA (Xq22.1)
Tutti i figli maschi saranno saniTutte le figlie femmine saranno portatrici
Diagnosi prenatale
E’ possibile quando c’è un paziente diagnosticato in famiglia
Malattie X linked: le donne portatrici hanno una probabilità ½ di
trasmettere il gene mutato ai figli
50% dei maschi affetti 50% delle femmine portatrici
Diagnosi prenatale solo nei maschi
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