WIDER I

Sistemi per la Microbiologia

WIDER I

SISTEMA DI LETTURA SEMI-AUTOMATICO PER ANALISI MICROBIOLOGICHE

Antibiogramma in microdiluizione (CMI)

Antibiogramma metodo Kirby-Bauer (lettura automatica aloni d’inibizione)

1

Opzioni infinite

2

WIDER I

Caratteristiche del Sistema

Il sistema automatico WIDER I è un sistema integrato costituito da un’unità di lettura e da un elaboratore dati. La struttura semplice e intuitiva del software permette un’immediata operatività e una rapida gestione delle informazioni in memoria; la flessibilità dello strumento consente di eseguire con estrema affidabilità e riproducibilità, le analisi effettuate con maggior frequenza nel laboratorio di microbiologia. Il dispositivo di lettura si avvale di una sofisticata telecamera digitale ad alta risoluzione per l’acquisizione delle immagini. Il sistema computerizzato - nella sua modularità - consente all'utente un'ampia scelta di configurazioni, da quella base fino al massimo delle proposte.

Principio di lettura

L’estrema flessibilità del Sistema WIDER ne consente l’integrazione all’interno dell’organizzazione di qualsiasi laboratorio; la sua multifunzionalità assicura la completa standardizzazione di tutti gli antibiogrammi svolti nel normale processo analitico. Con una semplice operazione - l’introduzione del campione nell’alimentatore - WIDER I è in grado di fornire l’identificazione e l’antibiogramma in meno di 3 secondi. Il dato è ricavato sotto forma d’immagine: un software di ultima generazione trasforma l’immagine in dati numerici per mezzo di complesse funzioni algoritmiche. Il microbiologo può controllare l’intero processo analitico, sia per quanto riguarda l’identificazione, sia per quanto riguarda la CMI. Quest’ultima può essere verificata sia mediante osservazione visiva della crescita dei microrganismi direttamente nei pozzetti del pannello, sia tramite il Sistema Esperto che ne convalida i dati.

L'unità di lettura

WIDER I presenta al suo interno una telecamera digitale a colori ad alta definizione. Il sistema di lettura non richiede particolari operazioni di calibrazione esterne in quanto lo strumento provvede alle operazioni di calibrazione automaticamente al momento dell’accensione.

È previsto un controllo dei parametri della lettura anche al momento dell’inserimento del campione, mediante la semplice selezione di un’opzione dedicata presente nel menu di lettura. Il pannello frontale dello strumento reca una serie di indicatori L.E.D. che forniscono informazioni relative alla calibrazione automatica.

Nello stesso pannello è posizionato l'alimentatore automatico dei campioni che, mediante apposito adattatore, consente la lettura sia dei pannelli per la CMI/ID, che delle piastre Petri da 90 mm per analisi con il metodo Kirby-Bauer.

Per l'identificazione dei campioni può essere utilizzato un lettore di codice a barre collegato all’unità di lettura.

3

Esempi di immagini WIDER

L’alta risoluzione dell’immagine dei pannelli permette di poter osservare, con estrema nitidezza, l’avvenuta crescita all’interno di ciascun pozzetto, assicurando così all’operatore il completo controllo delle analisi.

lettura di un pannello MIC/ID

lettura aloni di inibizione (metodo Kirby-Bauer) con il sistema Wider

4

Il software

WIDER I è fornito di un avanzato software gestionale in lingua italiana, sviluppato con tecnologia Windows® XP, di semplice utilizzo. Oltre alle normali funzioni di gestione, il software consente l'accesso a un archivio dati aperto e flessibile: in qualsiasi momento l'operatore è in grado di ottenere informazioni relative a qualsiasi paziente.

I dati in memoria possono essere analizzati per studi statistici ed epidemiologici, e possono essere ricavati seguendo molteplici criteri; possono anche essere visualizzati o stampati in forma di diagramma (grafici a barre, a torta etc.) e in formato tabella con grafica Windows®.

I dati possono essere esportati anche su floppy-disk direttamente in Excel o Access. Possono essere formulate interrogazioni di qualsiasi tipo sulla sensibilità e la prevalenza dei microrganismi riscontrati nei vari reparti: sulla sensibilità a uno o più antibiotici, sulla combinazione antibiotico-sensibilità di un microrganismo nei confronti di due o più antibiotici, sui valori della CMI, sui criteri di esclusione dei campioni “ridondanti” etc...

Il sistema permette sia l’interfacciamento bidirezionale con il sistema centrale, sia l’esportazione dei dati e delle immagini via Internet, facilitando in tal modo l’interazione con i programmi di sorveglianza delle resistenze in studio presso gli Osservatori Epidemiologici; è inoltre prevista l’integrazione dei dati statistici provenienti da altri utilizzatori del Sistema WIDER. È prevista una funzione che riporta tutti gli elementi necessari alla tracciabilità dell’analisi (ora, data, operatore, ed eventuali modifiche apportate all’interpretazione automatica).

Le funzioni di refertazione sono ampie e completamente personalizzabili: sono disponibili referti di tipo preliminare e definitivo (es. dati anagrafici del paziente, risultati CMI/ID, interpretazioni del Sistema Esperto, schema delle reazioni biochimiche e immagine digitalizzata del pannello o della piastra).

Il Sistema Esperto fornisce la rilevazione assistita delle incoerenze ed evidenzia i meccanismi di resistenza dei diversi fenotipi (beta-lattamasi, ESBL, resistente costitutive, inducibili etc.). È inoltre prevista la possibilità di implementare il Sistema Esperto con proprie regole, mediante semplice attribuzione di speciali codici numerici: in tal modo è possibile integrare i dati automatici con le informazioni che provengono dalla propria realtà analitica, dalla propria esperienza, nonché dalla propria statistica, soprattutto nell’ambito delle resistenze emergenti.

31,3%

50,0%

18,8%

sensib.

E.coliP.aerug.K.pneum.P.mirab.P.vulgaris

sensibilidad en orinas

E.coliP.aerug.

K.pneum.P.mirab.

P.vulgaris

0102030405060708090

100

%

resist.interm.sensib.

sensibilidad en orinas

E.coli P.aerug. K.pneum. P.mirab. P.vulgaris0

20

40

60

80

100

120

%

sensib.interm.resist.

sensibilidad en orinas

E.coli P.aerug. K.pneum. P.mirab. P.vulgari

0

20

40

60

80

100

120

% sensib.

interm.resist.

sensibilidad en orinas

Sensibilità nelle urine Sensibilità nelle urine

Sensibilità nelle urine Sensibilità nelle urine

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Le performance

Il Sistema WIDER è stato concepito per uno studio accurato degli antibiogrammi: dall’esteso range delle CMI (vere diluizioni CMI) e dall’ottima correlazione con i sistemi di riferimento, è possibile ottenere informazioni sulle resistenze emergenti e di basso livello (enterococchi, streptococchi etc.), mentre l’elevata qualità dell’analisi permette una corretta identificazione anche di quei microrganismi cosiddetti “difficili”.

Sistema di inoculo

WIDER I utilizza un sistema di aspirazione monouso appositamente studiato per essere impiegato nella preparazione degli inoculi: alcune colonie, cresciute su agar non selettivi, vengono prelevate con anse calibrate e inoculate nella soluzione salina Wider PluronicTM. La sospensione batterica è poi trasferita in una vaschetta d’inoculo Wider. Grazie al sistema di aspirazione monouso, i pozzetti dei pannelli vengonono inoculati in un’unica soluzione.

FUNZIONI IN SVILUPPO

• Differenziazione morfologica • Conta delle colonie

differenziazione morfologica

Consumabili dedicati

Identificazione e Antibiogramma

Il sistema WIDER I utilizza pannelli esclusivi con profili antibiotici e prove biochimiche prodotti su specifica indicazione tecnico-scientifica di Francisco Soria Melguizo SA. per il Sistema WIDER I. È inoltre prevista la possibilità di produrre pannelli personalizzati. I pannelli Wider, prodotti da DADE - Baxter – Sacramento, presentano estesi range di concentrazione di antibiotico. È, infatti, possibile ottenere dettagliate informazioni sui fenomeni emergenti (p.e. resistenze di basso livello nel caso di enterococchi, streptococchi etc.), mentre un’accurata analisi permette la corretta identificazione anche di quei microrganismi che presentano una problematica identificazione; il software è, inoltre, in grado di mettere in evidenza l'alta resistenza a Gentamicina e Streptomicina negli enterococchi,e di rilevare la meticillino-resistenza nei ceppi di stafilococchi.

6

Un aspetto particolarmente curato dal software Wider è l’analisi delle ESBL e della CMI dei microrganismi esigenti, con un range ampio di concentrazioni in microdiluizione e con l’impiego di brodi arricchiti (sangue lisato di cavallo per streptococchi non enterococchi e brodo HTM per i microrganismi esigenti ). Per l'interpretazione dell'antibiogramma, il Sistema Wider I segue le regole raccomandate dal CLSI, aggiornate secondo le più recenti pubblicazioni. I Pannelli WIDER I sono stati studiati per la determinazione della sensibilità dei microrganismi nei confronti di differenti antibiotici di interesse clinico e per identificare, con appropriate prove biochimiche, i seguenti microrganismi: - Bacilli Gram-negativi aerobi e anaerobi facoltativi (identificazione/antibiogramma, o solo antibiogramma) - Cocchi Gram-positivi e alcuni aerobi esigenti (identificazione/antibiogramma, o solo antibiogramma) - Listeria monocytogenes (identificazione/antibiogramma) - CMI Lieviti

Antibiogrammi specifici

-CMI microrganismi esigenti

Le prove di sensibilità agli antibiotici presenti nel pannello sono una miniaturizzazione delle prove di sensibilità in diluizione. Gli antibiotici presenti nel pannello sono diluiti in terreno Mueller-Hinton e supplementati con calcio, magnesio e con sangue lisato di cavallo nel caso degli streptococchi, o con HTM nel caso degli emofili. Dopo l'inoculo e la reidratazione con una sospensione standardizzata dei microrganismi in esame, si provvede all’incubazione del pannello per almeno 8-16 ore a 35°C e si procede quindi alla determinazione della CMI.

Incubazione

Le prove d’identificazione utilizzano test biochimici convenzionali e cromogenici modificati, e si basano sulle variazioni di pH e di colore dopo circa 16-24 ore d’incubazione a 35°C. È possibile optare per la determinazione della CMI rapida in 8 ore per le situazioni d’urgenza.

Antimicrobico Pannello CMI/ID Pannello CMI GRAM POSITIVO GRAM POSITIVO

Penicillina

Ampicillina

Amoxicillina/Ac. Clavulanico

Oxacillina

Cefazolin

Cefotaxime

Imipenem

Streptomicina

Gentamicina

Amicacina

Kanamicina

Vancomicina

Teicoplanina

Moxifloxacina

Levofloxacina

Eritromicina

Telitromicina

Clindamicina

Quinopristin/Dalfopristin

Lenezolid

Cloramfenicolo

Fosfomicina

Trimethoprim-Sulfamethossazolo

8-4-2-1-0,5-0,25-0,12

16-8-4-2-1-0,5

16/8-8/4-4/2

4-2-0,25

4-2

4-2-1-0,5

---

1000

500-8-4-2

16-8-4

---

16-8-4-2-1

16-8-4-2-1

---

4-2-1-0,5

2-1-0,5-0,12

---

2-0,5

2-1-0,5

4-2-1-0,5

8

64-32

2/38-1/19

8-4-2-1-0,5-0,25-0,12-0,06

16-8-4-2-1-0,5-0,25

16/8-8/4-4/2

4-2-0,25

4-2

4-2-1-0,5-0,25-0,12

8-4-2-1-0,5

1000

500-8-4-2

16-8-4

1000

16-8-4-2-1

16-8-4-2-1

4-2-1-0,5

4-2-1-0,5

2-1-0,5-0,25-0,12

2-1-0,5-0,25-0,12

2-0,5

4-2-1-0,5

4-2-1-0,5

8

64-32

2/38-1/19

Antimicrobici presenti nei pannelli WIDER per Microrganismi Gram-Positivi

Antimicrobico Pannello CMI/ID Pannello CMI GRAM NEGATIVI GRAM NEGATIVI

Antimicrobici presenti nei pannelli WIDER per Microrganismi Gram-Negativi

Amoxicillina

Amoxicillina/Ac. Clavulanico

Ampicillina/Sulbactam

Ticarcillina

Piperacillina

Piperacillina/Tazobactam

Cefalotina

Cefazolin

Cefuroxime

Cefoxitin

Ceftazidime

Ceftazidime/Ac. Clavulanico

Cefotaxime

Cefotaxime/Ac. Clavulanico

Cefepime

Imipenem

Meropenem

Gentamicina

Tobramicina

Amicacina

Nitrofurantoina

Acido Nalidixico

Ciprofloxacina

Trimethoprim/Sulfamethoxazole

16-8-4

16/8-8/4-4/2

---

64-32-16

---

64/4-32/4-16/4

8

---

16-8-4

16-8

16-8-4-2-1

8/4-1/4

8-4-2-1

---

16-8-4-2-1

8-4-2-1

8-4-2-1

8-4-2

8-4-2

16-8-4

64

16-4

4-2-1-0,12

4/76-2/38

16-8-4

32/16-16/8-8/4-4/2

32/16-16/8-8/4-4/2

64-32-16

64-32-16

64/4-32/4-16/4

---

16-8-4-2

16-8-4-2-1

16-8-4

16-8-4-2-1-0,5

8/4-1/4

8-4-2-1-0,5-0,25-0,12

8/4-1/4

16-8-4-2-1-0,5

8-4-2-1-0,5-0,12

8-4-2-1-0,5-0,12

8-4-2

8-4-2

16-8-4

64

16-4

4-2-1-0,12

4/76-2/38

Antimicrobico CMI

Antimicrobici presenti nei pannelli WIDER per Microrganismi Esigenti

Penicillina

Ampicillina

Amoxicillina/Ac. Clavulani-

co

Cefuroxime

Cefotaxime

Cefixime

Cefepime

Meropenem

Vancomicina

Teicoplanina

Eritromicina

Claritromicina

Clindamicina

Tetraciclina

Ciprofloxacina

0,03-0,06-0,12-0,25-0,5-1-2-4

0,06-0,12-0,5-1-2-4

0,5/0,25-1/0,5-2/1-4/2

0,12-0,25-0,5-1-2-4-8

0,03-0,06-0,12-0,25-0,5-1-2-4

0,25-0,5-1

0,06-0,12-0,5-1-2

0,12-0,25-0,5-1-2-4

0,25-0,5-1-2

0,25-0,5-1-2

0,25-0,5-1

0,25-0,5-1-2-4-8-16

0,12-0,25-0,5-1

0,25-0,5-1-2-4

0,06-0,12-0,5-1-2-4

0,25-0,5-1-2-4-8

Antimicotici presenti nei pannelli WIDER per Lieviti

Antimicotici

8-4-2-1-0,5-0,25-0,12-0,06- ,03-0,015-0,008-0,004

128-64-32-16-8-4-2-1-0,5-0,25-0,12-0,06

8-4-2-1-0,5-0,25-0,12-0,06–0,03-0,015-0,008-0,004

8-4-2-1-0,5-0,25-0,12-0,06–0,03-0,015-0,008-0,004

8-4-2-1-0,5-0,25-0,12-0,06–0,03-0,015-0,008-0,004

128-64-32-16-8-4-2-1-0,5-0,25-0,12-0,06

Itraconazolo

Fluconazolo

ketoconazolo

Voriconazolo

Amfotericina B

5-Fluorcitosina

Lettura automatica con il Sistema WIDER I RPMI Broth 1640, 25 ml Inoculatore usa e getta per pannelli microtiter Lettura in 24 ore

Pannelli Wider di prossima introduzione WIDER – MIC/ID GRAM NEG URINE B1019-95B Rev: 1

+ 4

P GLU

RAF INO URE LYS TDA CIT TAR OF/G

4 K

4 CL

8 CF

SUC

RHA ADO H2S ARG ESC MAL ACE OF/B

NIT 64 FOS

16

SOR

ARA MEL IND ORN VP ONPG CET DCB

64 FD

32

16 NA

4

8 NOR

4

1

2 CIP

1

0,5

0,25

0,12

16 CFZ

8

8 GM

4

2

8 TO

4

16 AK

8

4

4/76 T/S

2/38

2 CFM

1

0,5

8 CTX

4

2

1

8/4 CT/C

1/4

8 AZT

1

8 TMP

16 AMX

8

4

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8

4

2

1

8/4 CAZ-C

1/4

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2

16/8 A/C

8/4

4/2

64/4 P/T

32/4

16/4

16 CFX

8

4

8 IMI

4

2

Antimicrobial Agents Dilutions Antimicrobial Agents Dilutions Penicillin (P) 4 Aztreonam (AZT) 8-1 Amoxicillin (AMX) 16-8-4 Imipenem (IMI) 8-4-2 Amoxicillin/Clavulanic Acid (A/C) 16/8-8/4-4/2 Ertapenem (ETP) 4-2 Piperacillin/Tazobactam. (P/T) 64/4-32/4-16/4 Kanamycin (K) 4 Cephalothin (CF) 8 Gentamicin (GM) 8-4-2 Cefazolin (CFZ) 16-8 Tobramycin (TO) 8-4 Cefuroxime (CFX) 16-8-4 Amikacin (AK) 16-8-4 Cefixime (CFM) 2-1-0,5 Nitrofurantoin (FD) 64-32 Ceftazidime (TAZ) 16-8-4-2-1 Nalidixic Acid (NA) 16-4 Ceftazidime/Clavulanic Acid (TZ/C) 8/4-1/4 Ciprofloxacin (CIP) 2-1-0,5-0,25-0,12 Cefotaxime (CTX) 8-4-2-1 Norfloxacin (NOR) 8-4-1 Cefotaxime/Clavulani Acid (CT/C) 8/4-1/4 Trimethoprim/Sulfamethoxazole (T/S) 4/76-2/38 Trimethoprim (TMP) 8 Fosfomycin (FOS) 64-16 Colistin (CL) 4

WIDER – MIC/ID GRAM NEG NFB B1019-96B Rev: 1

+ 4

P GLU

RAF INO URE LYS TDA CIT TAR OF/G

4 K

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SUC

RHA ADO H2S ARG ESC MAL ACE OF/B

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2/38

SOR

ARA MEL IND ORN VP ONPG CET DCB

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1

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2

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8

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4

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16

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1

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32

64 FOS

32

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4

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1

Antimicrobial Agents Dilutions Antimicrobial Agents Dilutions Penicillin (P) 4 Tobramycin (TO) 8-4-2 Ampicillin/Sulbactam (A/S) 16/8-8/4-4/2 Amikacin (AK) 32-16-8 Ticarcillin (TC) 128-64-32 Netilmicin (NET) 8-4 Piperacillin/Tazobactam (P/T) 64/4-32/4-16/4 Nitrofurantoin 64 Cephalothin (CF) 8 Nalidixic Acid (NA) 16 Ceftazidime (TAZ) 16-8-4-2-1 Ciprofloxacin (CIP) 2-1-0,5-0,25 Ceftazidime/Clavulanic Acid (TZ/C) 8/4-1/4 Levofloxacin (LVX) 4-2-1-0,5 Cefepime (CFP) 16-8-4-2-1 Minocycline (MIN) 8-4-2 Aztreonam (AZT) 16-8-4-2 Trimethoprim./Sulfamethoxazole (T/S) 4/76-2/38 Imipenem (IMI) 8-4-2-1 Fosfomycin (FOS) 64-32 Meropenem (MER) 8-4-2-1 Colistin (CL) 4-2 Kanamycin ((K) 4 Gentamicin (GM) 8-4-2

WIDER – MIC/ID GRAM NEG ENT B1019-97B

Rev: 1

+ 4 P

GLU

RAF INO URE LYS TDA CIT TAR OF/G

4 K

4 CL

64 FD

SUC

RHA ADO H2S ARG ESC MAL ACE OF/B

NIT 16 NA

8 CF

SOR

ARA MEL IND ORN VP ONPG CET DCB

2 CIP

1 0,12 4/76 T/S

2/38 64 FOS

16 8 GM

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16/4 16 CX

8 8 IMI

4 2 1

Antimicrobial Agents Dilutions Antimicrobial Agents Dilutions Penicillin (P) 4 Meropenem (MER) 8-4-2 Amoxicillin (AMX) 16-8-4 Ertapenem (ETP) 4-2 Amoxicillin/Clavulanic Acid (A/C) 16/8-8/4-4/2 Kanamycin (K) 4 Piperacillin/Tazobactam (P/T) 64/4-32/4-16/4 Gentamicin (GM) 8-4-2 Cephalothin (CF) 8 Tobramycin (TO) 8-4 Cefuroxime (CFX) 16-8-4 Amikacin (AK) 16-8-4 Cefoxitin (CX) 16-8 Nitrofurantoin (FD) 64 Ceftazidime (TAZ) 16-8-4-2-1 Nalidixic Acid (NA) 16 Ceftazidime/Clavulanic Acid (TZ/C) 8/4-1/4 Ciprofloxacin (CIP) 2-1-0,12 Cefotaxime (CTX) 8-4-2-1 Minocycline (MIN) 8-4-2 Cefotaxime/Clavulanic Acid (CT/C) 8/4-1/4 Trimethoprim/Sulfamethoxazole (T/S) 4/76-2/38 Cefepime (CFP) 8-4-2-1 Fosfomycin (FOS) 64-16 Aztreonam (AZT) 8-1 Colistin (CL) 4 Imipenem (IMI) 8-4-2-1

Pannelli di prossima introduzione

WIDER – MIC/ID GRAM POS 2 B1019-94B Rev. 1

-

+ 1000 STR

CV NOV VP BE PGT LAC NACL RBS BAC

500 GM

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NIT IDX PHO ARG MAN MNS ARA RAF

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1

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1

8 P

0,5 0,25

0,12 8/4 A/C

4/2

16 FUS

2 256 MUP

4 64 FD

32

Antimicrobial Agents Dilutions Antimicrobial Agents Dilutions Penicillin - P 0,12-0,25-0,5-8 Erythromycin -E 0,5-1-2-4 Ampicillin - AM 0,25-2-4-8 Clindacmycin -CD 0,5 - 2 Amoxacillin/Clavulanate –A/C 4/2-8/4 Synercid – Q/D 1-2 Oxacillin - OX 0,25-2-4 Minocycline -MIN 2-4-8 Streptomycin -STR 1000 Linezolid -LNZ 1-2-4 Gentamicin 4-8-500 Fosfomycin - FOS 32-64 Tobramycin - TOB 4-8 Trimethoprim/Sulfamethoxazole – T/S 1/19-2/38 Amikacin - AK 8-16-32 Rifampin -RI 1-2 Vancomycin - VA 1-2-4-8-16 Mupirocin -MUP 4-256 Teicoplanin -TPL 2-4-8-16 Fusidic Acid - FUS 2-16 Daptomycin -DAP 0,5-1-2-4 Nitrofurantoin 32-64 Levofloxacin -LVX 0,5-1-2-4