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Maurizio Servili , Sonia Esposto, Agnese Taticchi, Stefania Urbani Dipartimento di Scienze Agrarie Alimentari ed Ambientali Università di Perugia "Variabilità dei composti fenolici bioattivi dalla materia prima ai prodotti e co- prodotti dell'industria alimentare" Milano, 30 giugno 2016 LE GORNATE DELLA SALUTE E DEL BENESSERE: INNOVAZIONE E RICERCA

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Maurizio Servili , Sonia Esposto, Agnese Taticchi, Stefania Urbani Dipartimento di Scienze Agrarie Alimentari ed Ambientali

Università di Perugia

"Variabilità dei composti fenolici bioattivi dalla materia prima ai prodotti e co-

prodotti dell'industria alimentare"

Milano, 30 giugno 2016

LE GORNATE DELLA SALUTE E DEL BENESSERE: INNOVAZIONE E RICERCA

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BENEFICI DEI POLIFENOLI

DIABETE CANCRO

INVECCHIAMENTO ASMA

C. V. Ds

INFEZIONI

IPERTENSIONE

EFFETTI SALUTISTICI APPORTATI CON LA DIETA DAI FENOLI (Pandey et al., 2009).

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FITO

CO

MP

OST

I CAROTENOIDI

COMPOSTI CHE CONTENGONO N e S

FENOLI

ALCALOIDI

Classificazione dei fitocomposti presenti negli alimenti.

Cumarine

Tannini

Flavonoidi

acidi Fenolici

Secoiridoidi

Stilbeni

Lignani

Alcoli fenolici

acido Ellagico

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Vie biosintetiche dei principali composti secondari presenti nel frutto dell’ oliva (fonte Alagna et al., 2012).

Via metaboplica del non mevalonato (MEP) nei plastidi

PIRUVATO + G3-P

DMAPP

IPP

Via metabolica del mevalonato (MVA) 2-CoA

MVAPP

IPP

GPP

Biosintesi degli Steroli e dei Terpeni

Altri monoterpeni

FPP GGPP

Diterpeni

Tetraditerpeni

Sesquiterpeni Squalene

steroli

Triterpeni

Biosintesi dei Fenilpropanoidi

L-Arogenato

Tirosina L-Fenilalanina

O-Cumarato

acido Caffeico

Verbascoside

p-Cumaroil-CaA

Lignani

Biosintesi dei Secoiridoidi

Geraniolo

acido Deossiloganico

Segolanine

Monoterpeni Indolo

Alcaloidi

Ligustroside

Oleuropeina Demetiloleuropeina Tirosolo

3,4-DHPEA-EDA

Oleuropeina aglicone Idrossitirosolo

G3P: gliceraldeide 3-fosfato; DMAPP: Dimetilallil difosfato; IPP: Isopententil difosfato; CoA: acetil-CoA; MVAPP: Mevalonato difosfato; GPP: Geranil difosfato; FPP: Farnesil difosfato; e GGPP: Geranil geranil pirofosfato. Le frecce tratteggiate indicano vie biosintetiche incerte .

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Il frutto dell’oliva è una fonte di molecole bioattive

Valorizzazione dei prodotti e dei coprodotti dell’oliva ricchi di sostanze fenoliche dalle numerose e riconosciute proprietà funzionali , per il miglioramento del

benessere animale ed umano .

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Secoiridoidi

Oleuropeina Demetiloleuropeina Ligustroside Nüzhenide

Derivati dell’acido Idrossicinnamico

Verbascoside

alcoli Fenolici (3,4 Diidrossifenil) etanolo (3,4-DHPEA) (p-Idrossifenil) etanolo (p-HPEA)

Acidi Fenolici

acido Clorogenico acido Caffeico acido p-Idrossibenzoico acido Protocatechico

acido Vanillico acido Siringico acido p-Cumarico

acido Ferulico acido Sinapico acido Benzoico acido Cinnamico

acido Gallico

Antocianine Cianidin-3-glucoside Cianidin-3-rutinoside Cianidin-3-caffeilglucoside

Cianidin-3-caffeilrutinoside Delfinidin 3-ramnosilglucoside-7-xiloside

Flavonols Quercetina-3-rutinoside

Flavones Luteolina-7-glucoside

Luteolina-5-glucoside

Apigenina-7-glucoside

Flavonoidi

COMPOSIZIONE FENOLICA DEL FRUTTO DELL’OLIVA

acido o-Cumarico

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VERBASCOSIDE

OLEUROPEINA DEMETILOLEUROPEINA

NÜZHENIDE

LIGUSTROSIDE

H O H O

O H

O

O H

O

H O

H O

O

O O C H 2 O H

H 3 C O

O H

O H

1 9

1 '

2 '

2 3

4

5 6

7

3 '

8

4 ' 5 '

6 '

7 '

8 ' 1 '

1 '

2 '

2 '

3 '

3 '

4 '

4 '

5 '

5 '

6 '

6 '

O

OCOOH

HO

OH

OHOCH2OH

O

HO

HO

O

1'

2'3'

4'5'

6'

8'

7'

1'2'

3'

4'5'

6'

7

65

4

3

19

8

10O

OCOOCH3

HO

OH

OHOCH2OH

O

HO

HO

O

1'

2'3'

4'5'

6'

Oleuropein

8'

7'

1'2'

3'

4'5'

6'

7

65

4

3

19

8

10

O

O

HO

OH

OHOCH2OH

O

HOO

1'

2'3'

4'5'

6'

8'

7'

1'2'

3'

4'5'

6'

7

65

4

3

19

8

10

COOCH3

a

Ligstroside

4

nüzhenide

OH

O

O

OCH3O

OOH

OH

OH

O

O

O

OH

OH

OH

OHO

1

1'

2'

3

45

67

8

9

10

3'4'

5'6'

1''

2''3''

4''

5''6''

8

7

1

2

34

Demethyloleuropein

Nüzhenide

O

O

H O O H

O H O C H 2 O H

O

H O O

1 ' 2 ' 3 '

4 ' 5 '

6 '

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7

6 5

4 3

1 9

8

1 0

C O O C H 3

O

H O O H

O H O C H 2 O H

O 1 ' 2 ' 3 '

4 ' 5 '

6 '

6 5

O C O O H H O

H O

O

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7 4

3

1 9

8

1 0

O

O C O O C H 3

H O

O O

H O

H O

O

1 '

O H

O H C H 2 O H

2 ' 3 '

4 ' 5 '

6 '

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7

6 5

4 3

1 9

8

1 0

Formule di struttura dei secoiridoidi glucosidici presenti nel frutto dell’oliva.

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VARIABILITÀ DEI COMPOSTI FENOLICI (mg/g s.s.) VALUTATA SU 100 CAMPIONI DI FRUTTI DI OLIVA. (DATI NON PUBLICCATI).

0

100

200

300

400

Fenoli totali Oleuropeina 3,4-DHPEA-EDA Verbascoside

81.5

47.5

20.8 9.8

Box and whisker plots: Limiti in percentile: box = lower 25th, upper 75th; whiskers =lower 10th, upper 90th; punti = lower 5th, upper 95th. La linea all’interno del box rappresenta la mediana.

26.2

235.6

2.4

135.7

45.3 64.3

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Il frutto dell’oliva è una fonte di molecole bioattive

Valorizzazione dei prodotti e dei coprodotti dell’oliva ricchi di sostanze fenoliche dalle numerose e riconosciute proprietà funzionali , per il miglioramento del

benessere animale ed umano .

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Acidi fenolici e derivati: p-idrossibenzoico, ferulico, cinnamico, benzoico, 4-(acetossietil)-1,2-didrossibenzoico

Alcoli fenolici: 3,4 DHPEA ((3,4-Didrossifenil) etanolo) p-HPEA (3,4-Didrossifenil) etanolo)

(3,4-Didrossifenil) etanolo-glucoside

Lignani: (+)-1-Acetossipinoresinolo (+)-Pinoresinolo

Flavoni: apigenina, luteolina

Idrossi-isocromani: Verbascoside

Secoiridoidi: 3,4 DHPEA-EDA (forma Dialdeidica dell’acido Decarbossimetil elenolico legato al 3,4-DHPEA)

p-HPEA-EDA (forma Dialdeidica dell’acido Decarbossimetil elenolico legato al p-HPEA)

3,4 DHPEA-EA (Oleuropein aglicone) Ligustroside aglicone

Oleuropeina

p-HPEA-derivai

Composti fenolici presenti nell’ OEVO

forma dialdeidica dell’ oleuropeina aglicone forma dialdeidica del ligustroside aglicone

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(+)-1- ACETOSSIPIRESINOLO (+)-1-PINORESINOLO

O

8'

7'

1'

23'

4

5 '

6'

7

65

4

3

19

8

10

COOCH3

O

O

OH

HOO

8'

7'

1'

23'

4

5 '

6'

3

8

10

COOCH3

O

OH

HOO

8'

7'

1'

23'

4

5 '

6'

7

65

4

3

19

8

10

COOCH3

O

O

OH

HOO

8'

7'

1'

23'

4

5 '

6'

3

8

10

COOCH3

O

OH

HOO

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7

6 5

4

3

1 9

8

1 0

O H O

O

O 1

3 4

5

6

9

8

1 0

7

8 '

7 '

1 ' 2 '

3 '

4 ' 5 '

H O O

C O O C H 3 O

O

O

H O

8

7 1

2

3

4 5

6 H O

O H

O

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7

6 5

4

3

1 9

8

1 0

O H O

O

O

H O 8

7 1

2

3

4 5

6 H O

H O

O H

FORMA DIALDEIDICA DELL’ACIDO DECARBOSSIMETIL-ELENOLICO LEGATO AL p-HPEA (p-HPEA-EDA) = OLEOCANTALE

LIGUSTROSIDE AGLICONE

(p-HPEA-EA) OLEUROPEINA AGLICONE

(3,4-DHPEA-EA)

p-IDROSSIFENIL-ETANOLO

(p-HPEA = tirosolo) (3,4-DIIDROSSIFENIL) ETANOLO

(3,4-DHPEA = IDROSSITIROSOLO)

FORMA DIALDEIDICA DELL’ACIDO DECARBOSSIMETIL- ELENOLICO LEGATO AL

3,4-HPEA (3,4 DHPEA-EDA)

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Proprietà farmacologiche dei polifenoli idrofili. Obied et al., 2012.

3.Cardiovascolare: 3.1. attività anti-ipertensiva e di regolazione della pressione sanguigna; 3.2. funzione piastrinica ed endoteliale; 3.3. contro aterosclerosi; 3.4. altre proprietà cardioprotettive.

4.Immunomodulatrice: hanno mostrato capacità di modulare funzioni immunitarie, in particolar modo I processi infiammatori legati al sistema immunitario.

5.Gastrointestinale: 5.1. effetto gastroprotettivo; 5.2. modulazione degli enzimi digestivi.

6.Endocrina: 6.1. effetti antidiabetici; 6.2. effetti osteoprotettivi; 6.3. altri effetti endocrini.

7.Respiratoria: hanno mostrato effetti antinfiammatori ed antiossidanti nel contrastare malattie dei polmoni.

1.Antiossidante: hanno attività RONS scavenging, potere riducente, chelante di metalli ed inducono l’attività di enzimi endogeni ad azione “antiossidante” quali catalasi, superossido dismutasi, chinone reduttasi, glutadione perossidasi, glutadione reduttasi, glutadione S-transferasi e glutamilicisteina-sintetasi.

2.Anti-infiammatoria: agiscono contro malattie cardiovascolari e alcuni tipi di cancro attraverso l’inibizione di enzimi pro-infiammatori quali fosfosinositide-3-chinasi e tirosina-chinasi, la soppressione di varie citochinine proinfiammatorie, il fattore alfa della necrosi dei tumori, interleukine incluse e proteina-1 mocita chemotattico.

8.Autonome: 8.1. effetti colinergici ed adrenergici.

9. Sistema nervoso centrale: 9.1. effetti neuroprotettivi; 9.2. effetti analgesici e antinocicettivi; 9.3. effetti comportamentali.

10. Antimicrobica e chemioterapica: 10.1. antibatterica;. 10.2. antifungina; 10.3. antivirale; 10.4. antiprotozoica e antiparassitaria.

11. Anticancro e chemopreventiva: possono direttamente contollare la crescita cellulare a differenti stadi di cancerogenesi, attraverso l’apoptosi o l’inibizione della proliferazione cellulare, tramite vari meccanismi.

Tali proprietà sono state dimostrate da numerosi studi preclinici (in vitro, ex vivo e in vivo)

e da alcuni studi clinici.

Esse dimostrano elevate potenzialità per la prevenzione e la cura delle malattie e

la promozione della salute umana.

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EFETTI SALUTISTICI DEI COMPOSTI FENOLICI DELL’ OEVO

L'inibizione dell’ossidazione del colesterolo LDL.

“I polifenoli dell’olio di oliva contribuiscono alla protezione dei lipidi

ematici dallo stress ossidativo”.

REGOLAMENTO (UE) N. 432/2012 DELLA COMMISSIONE del 16 maggio 2012 relativo alla compilazione di un elenco di indicazioni sulla salute consentite sui prodotti alimentari, diverse da quelle facenti

riferimento alla riduzione dei rischi di malattia e allo sviluppo e alla salute dei bambini.

Recentemente il Panel NDA dell’ European Food Safety Authority (EFSA), ha concesso il claim salutistico ai polifenoli dell’oliva e dell’olio.

Secondo il Panel dovrebbero essere assunti quotidianamente 5 mg idrossitirosolo e suoi derivati, forniti da un moderato consumo di olio di oliva (20 g /giorno), sottolineando che alcuni oli di oliva

presentano una concentrazione troppo bassa in polifenoli per apportare tale quantità rimanendo nel contesto di una dieta equilibrata

(EFSA Panel on Dietetic Products, Nutrition and Allergies (NDA). Polyphenols in olive related health claims. EFSA Journal 2011; 9(4):2033).

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0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

1800

H O

H O

O H H O

H O

O H

547.3

1157.1

310.6

401.2

805.2

214.1

246.3

101.2

VARIABILITÀ DEI (mg/kg) VALUTATA SU 800 CAMPIONI. (dati non pubblicati).

Fenoli totali derivati del Idrossitirosolo

derivati del Tirosolo

summa dei Lignani

Box and whisker plots: Limiti in percentile: box = lower 25th, upper 75th; whiskers =lower 10th, upper 90th; punti = lower 5th, upper 95th. La linea all’interno del box rappresenta la mediana.

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Il frutto dell’oliva è una fonte di molecole bioattive

Valorizzazione dei prodotti e dei coprodotti dell’oliva ricchi di sostanze fenoliche dalle numerose e riconosciute proprietà funzionali , per il miglioramento del

benessere animale ed umano .

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FORMULE DI STRUTTURA DEI FENOLI PRESENTI NELLE OLIVE DA TAVOLA.

VERBASCOSIDE

H O H O

O H

O

O H

O

H O

H O

O

O O C H 2 O H

H 3 C O

O H

O H

1 9

1 '

2 '

2 3

4

5 6

7

3 '

8

4 ' 5 '

6 '

7 '

8 ' 1 '

1 '

2 '

2 '

3 '

3 '

4 '

4 '

5 '

5 '

6 '

6 '

(p-IDROSSIFENILETANOLO) ETANOLO

(p-HPEA = tIrosolo)

(3,4-DIIDROSSIFENIL) ETANOLO

(3,4-DHPEA = (idrossitirosolo)

8

7 1

2

3

4 5

6 H O

O H

8

7 1

2

3

4 5

6 H O

H O

O H

O

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7

6 5

4

3

1 9

8

1 0

O H O

O

O

H O

FORMA DIALDEIDICA DELL’ACIDO DECARBOSSIMETIL ELENOICO LEGATO AL

3,4-DHPEA (3,4-DHPEA-EDA)

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0

500

1000

1500

2000

2500

3000

3500

4000

4500

mg/

kg

Spanish-style Californian-style Naturally olives

351.0 791.1

4261.0

COMPOSTI FENOLICI BIOATTIVI

metodo-Spagnolo metodo-Californiano olive al Naturale

Valori medi dei composti fenolici bioattivi of (mg/Kg) presenti nelle olive da tavola deamarizzate con diversi metod (Unpublished data).

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Box and whisker plots: Limiti in percentile: box = lower 25th, upper 75th; whiskers =lower 10th, upper 90th; punti = lower 5th, upper 95th. La linea all’interno del box rappresenta la mediana.

0

1000

2000

3000

4000OLIVE FERMENTATE AL NATURALE

2592.1

3475.2

850.0

3,4-DHPEA P-HPEA verbascoside 3,4-DHPEA-EDA

47.7

529.0

4.4

482.5

2484.0

91.1

657.4

1113.2

34.0

VARIABILITÀ DEI COMPOSTI FENOLICI (mg/kg s.f.) VALUTATA SU 45 CAMPIONI DI OLIVE DA TAVOLA AL NATURALE APPARTENENTI A DIVERSE CULTIVARS (unpublished data).

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OLIVE DA TAVOLA OLIO VERGINE DI OLIVA

3783.0

547.3

CONFRONTO TRA I VALORI MEDI (mg/Kg) DEI COMPOSTI FENOLICI VALUTATI NELLE OLIVE DA TAVOLA E NEGLI OLI VERGINI DI OLIVA.

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Il frutto dell’oliva è una fonte di molecole bioattive

Valorizzazione dei prodotti e dei coprodotti dell’oliva ricchi di sostanze fenoliche dalle numerose e riconosciute proprietà funzionali , per il miglioramento del

benessere animale ed umano .

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8

7 1

2

3

4 5

6 H O

O H

O

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7

6 5

4

3

1 9

8

1 0

O H O

O

O

H O

8

7 1

2

3

4 5

6 H O

H O

O H

VERBASCOSIDE

OLEUROPEINA

H O H O

O H

O

O H

O

H O

H O

O

O O C H 2 O H

H 3 C O

O H

O H

1 9

1 '

2 '

2 3

4

5 6

7

3 '

8

4 ' 5 '

6 '

7 '

8 ' 1 '

1 '

2 '

2 '

3 '

3 '

4 '

4 '

5 '

5 '

6 '

6 '

O

O C O O C H 3

H O

O O

H O

H O

O

1 '

O H

O H C H 2 O H

2 ' 3 '

4 ' 5 '

6 '

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7

6 5

4 3

1 9

8

1 0

TIROSOLO IDROSSITIROSOLO

3,4-DHPEA-EDA

Formule di struttura dei principali composti fenolici presenti nelle foglie di olivo e nelle acque di vegetazione

DEMETILOLEUROPEINA

O

H O O H

O H O C H 2 O H

O 1 ' 2 ' 3 '

4 ' 5 '

6 '

6 5

O C O O H H O

H O

O

8 '

7 ' 1 '

2 '

3 '

4 ' 5 '

6 '

7 4

3

1 9

8

1 0

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0

50

100

150

200

250

fenoli totali idrossitirosolo 3,4-DHPEA-EDA oleuropeina verbascoside

198.9

99.9

22.5

168.0

13.3 13.3

34.8 53.4

0.8

41.1

4.0 11.7

2.3

VARIABILITÀ DEI COMPOSTI FENOLICI (g/kg s.f.) VALUTATI SU 32 CAMPIONI

DI FOGLIE DI OLIVO PROVENIENTI DA DIVERSE CVs. (dati non pubblicati).

Box and whisker plots: Limiti in percentile: box = lower 25th, upper 75th; whiskers =lower 10th, upper 90th; punti = lower 5th, upper 95th. La linea nera all’interno

del box rappresenta la mediana mentre la linea rossa la media.

VARIABILITÀ DEI COMPOSTI FENOLICI (g/L) VALUTATI SU 40 CAMPIONI Di

ACQUE DI VEGETAZIONE RACCOLTE IN DIVERSE ANNATE E PROVENIENTI DA

DIFFERENTI CVs. (dati non pubblicati).

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

fenoli totali idrossitirosolo tirosolo verbascoside 3,4-DHPEA-EDA

8.0

16.9

0.6 0.1

5.0

1.6 2.6

1.0

9.9

0.5

5.8

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Estrazione a caldo in H2O a 45 °C per 30 min

Foglie tritate

Estratto acquoso da foglie di olivo( EFFO)

FOGLIE INTERE

ETRAZIONE DEI FENOLI DALLE FOGLIE DI OLIVO.

LIOFILIZZATO

(EFFOL)

Raffreddamento rapido

Blanching in H2O a 100 °C per 2-3 min

Essiccamento a 55°C

Foglie essiccate

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Composizione fenolica media degli estratti da foglie di olivo (EFFO), liofilizzato (EFFOL) ed essiccato (EFFOE) (dati non pubblicati)

EFFOE (mg/g)

EFFOL (mg/g)

(0.6) 18.7 (1.3) 149.1 (0.9) 21.7 Fenoli totali

(0.04) 0.3 (0.2) 1.9 (0,1) 2.8 Verbascoside

(0.1) 0.1 (0.01) 0.4 (0,002) 0,21 p-HPEA

(0.01) 0.5 (0.3) 7.2 (0.2) 2.3 3,4-DHPEA*

(0.5) 14.2 (1.3) 139.6 (0.8) 16.5 Oleuropina

EFFO (g/L)

(0.2) 3.8 - - Demetioleuropina

* I valori rappresentano il valore medio di 4 campioni ± la deviazione standard.

Purezza (%) 14.9 1.8

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AV

Microfiltrazionecut-off 0.1-0.3 μm

Ultrafiltrazione cut-off 7 kDa

osmosi inversa (IO)

permeato

CF da AV

concentrato

permeato

permeato concentrato

aggiunto alle sanse per la

produzione di compost

basso impatto ambientale

L’intero processo è stato effettuato a

temperatura controllata e sotto gas

inerte (N2)

Trattamento enzimatico

•liofilizzato (CFL)

• spray dry (CFSD)

• estratto purificato (EFP)

FILTRAZIONE TANGENZIALE SU MEMBRANA DI ACQUE DI VEGETAZIONE (AV) FRESCHE SU IMPIANTO INDUSTRIALE (Servili et al., 2011).

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Composizione fenolica media concentrato fenolico (CFAV), estratto purificato (EFP), liofilizzato (EFL) e dello spray dry (EFSD) (dati non pubblicati).

(1.0) 42.8 (1,7) 19,30 Fenoli totali

(0.4) 14.4 (0,2) 2,40 Verbascoside

(0.9) 19.8 (1,7) 16,90 3,4-DHPEA-EDA

(0.1) 1.6 (0,001) 0,01 p-HPEA

(0.1) 7.0 (0,003) 0,03 3,4-DHPEA

CFL (mg/g)

CFAV (g/L)

(1.0) 35.5

(0.3) 20.2

(0.05) 4.7

(0.08) 2.0

(0.2) 8.6

CFSD (mg/g)

* I valori rappresentano il valore medio di 4 campioni ± la deviazione standard.

Purezza (%) 4.2 3.5

(8.5) 707.8

(2.3) 62.8

(8.1) 606.6

(0.1) 8.6

(0.9) 29.7

EFP (mg/g)

70.7

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l’industria alimentate per l’ottenimento di alimenti funzionali

Oleario

Lattiero caseario

l’industria alimentare quale additivo di origine naturale ad attività antiossidante ed antimicrobica

Pesce

Trasformazione delle carni

Trasformazione dei vegetali

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OEVO

SANSE AV

ESTRAZIONE

GRAMOLATURA

OLIVE

(Moraiolo, Peranzana, Ogliarola and Coratina Cvs.)

FRANGITURA

(25°C , 40 min)

AGGIUNTA DI CFAV (5%)

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CONTROLLO OEVO

CFAV OEVO

CONTROLO OEVO

CFAV OEVO

Moraiolo

Coratina

3.4-DHPEA* 6,5 (0.32)a 11,0 (0.6)b 1,9 (0.1)a 2,9 (0.2)b

p-HPEA 10,3 (0.5)a 11,7 (0.9)a 6,3 (0.4)a 5,3 (0.5)a

3.4-DHPEA-EDA 114,4 (5.4)a 251,7 (12)b 281,7 (13.4)a 480,8 (39.1)b

p-HPEA-EDA 103,0 (7.2)a 119,0 (8.9)a 216,0 (10.8)a 220,1 (19.9)a

(+)-1-acetossipinoresinolo 13,2 (0.9)a 15,4 (1.1)a 13,2 (0.7)a 14,4 (1.2)a

(+)-1-pinoresinolo 15,0 (1.1)a 17,4 (1.2)a 18,4 (1.2)a 18,8 (1.3)a

3.4-DHPEA-EA 136,3 (6.8)a 140,6 (7.1)a 278,3 (23.9)a 297,0 (24.1)a

Fenoli totali 392,7 (11.4)a 566,8 (16.7)b 815,8 (22.2)a 1039,3 (50.1)b

Peranzana Ogliarola 3.4-DHPEA 2,6 (0.1)a 5,2 (0.3)b 1,7 (0.1)a 5,5 (0.3)b

p-HPEA 4,5 (0.2)a 5,1 (0.2)b 9,1 (0.4)a 7,5 (0.4)a

3.4-DHPEA-EDA 69,6 (3.3)a 173,2 (8.2)b 56,9 (2.7)a 137,9 (6.6)b

p-HPEA-EDA 48,4 (2.4)a 52,1 (2.6)a 72,3 (3.6)a 80,2 (4.01)a

(+)-1-acetossipinoresinolo 17,7 (0.9)a 17,1 (0.9)a 12,5 (0.6)a 15,0 (0.8)b

(+)-1-pinoresinolo 19,5 (0.9)a 19,9 (0.9)a 22,1 (1.1)a 25,8 (2.6)a

3.4-DHPEA-EA 148,4 (7.4)a 151,9 (7.6)a 182,9 (12.2)a 213,3 (15.2)a

Fenoli totali 310,6 (8.6)a 424,5 (-11,6)B 357,4 (10.3)a 485,3 (17.3)b

COMPOSIZIONE FENOLICA (mg/kg) DEGLI OEVO CONTROLLO ED OEVO “FUNCTIONAL FOOD” (Servili et al., 2011).

*Il contenuto fenolico è la media di tre determinazioni indipendenti ± deviazione standard. I valori in ogni riga con la stessa lettera non sono significativamente differenti l’uno dall’altro (P < 0.05).

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Moraiolo Coratina Esanale* 671 (61,6)a 512.0 (49,4)b 1815.0 (33,9)a 1574.0 (12,7)a

(E)-2-Pentanale 28.0 (1,4)a 13.0 (2,8)b 209.5 (4,9)a 188.5 (10,6)a

(E)-2-Esenale 8678.0 (632,2)a 8509.0 (207,9)a 116300.0 (1414,2)a 116950.0 (2757,7)a

1-Penten-3-olo 613.5 (0,7)a 628.0 (1,4)a 689.5 (6,4)a 754.0 (36,8)a

1-Pentanolo 148.5 (2,1)a 147.5 (0,7)a 37.5 (0,7)a 28.5 (3,5)b

(E)-2-Penten-1-olo 474.5 (1106,5)a 506.5 (2,1)a 478.0 (1,4)a 524.5 (2,1)a

1-Esanolo 14385.0 (959,2)a 12785.0 (829,6)a 3208.5 (217,6)a 3062.0 (205,4)a

(E)-3-Esen-1-olo 72.0 (0,7)a 85.0 (7,1)a 23.0 (1,4)a 23.0 (1,2)a

(Z)-3-Esen-1-olo 1125.5 (318,2)a 1606.5 (2,1)b 245.5 (6,4)a 272.0 (4,2)a

(E)-2-Esen-1-olo 15235.0 (4,2)a 15275.0 (106,1)a 5232.5 (21,9)a 6052.0 (280)a

Esil acetato 43.0 (4,2)a 45.0 (2,1)a - - - -

(Z)-3-Esen-1-olo acetato 310.0 (20,5)a 432.0 (37,1)b 11.0 (0,9)a 9.0 (1,4)a

Peranzana Ogliarola 1129 (106,4)a 1237 (115,9)a 1141 (103,9)a 919 (89,4)b

301 (4,2)a 306 (9,2)a 101 (6,2)a 117 (11,3)a

59320 (1470,8)a 58150 (1046,5)a 30650 (1983,8)a 32595 (2109,7)a

741 (56,9)a 711 (45,7)a 148 (17,2)a 184 (14,2)b

214 (19,4)a 276 (25,7)b 12 (2,1)a 13 (2,1)a

577 (49,9)a 647 (56,9)a 150 (9,7)a 191 (12,3)b

6314 (460)a 6095 (443,1)a 824 (79,3)a 672 (63,5)a

98 (8,1)a 86 (7,1)a - - - -

2093 (201,1)a 2562 (245,2)a 89 (5,8)a 113 (10,3)b

10720 (724,7)a 10739 (732,2)a 1460 (127,5)a 1297 (113,2)a

1764 (114,2)a 1522 (98,5)b 10 (2,1)a 15 (1,3)b

3640 (235,6)a 3328 (215,4)a - - - -

COMPOSIZIONE VOLATILE (μg/kg) DEGLI OEVO CONTROLLO ED OEVO “FUNCTIONAL FOOD” (Servili et al., 2011).

CONTROLLO OEVO

CFAV OEVO

CONTROLO OEVO

CFAV OEVO

*La composizione volatile è la media di tre determinazioni indipendenti ± deviazione standard. I valori in ogni riga con la stessa lettera non sono significativamente differenti l’uno dall’altro (P < 0.05).

Esanale*

(E)-2-Pentanale

(E)-2-Esenale

1-Penten-3-olo

1-Pentanolo

(E)-2-Penten-1-olo

1-Esanolo

(E)-3-Esen-1-olo

(Z)-3-Esen-1-olo

(E)-2-Esen-1-olo

Esil acetato

(Z)-3-Esen-1-olo acetato

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COMPOSIZIONE FENOLICA (mg/Kg) DELLO YOGURT CONTENENTE EFP DA AV (Servili et al., 2011).

STADIO INIZIALE

3,4 DHPEA (mg/kg) 20.5 ± 1.0 d 26.6 ± 1.2 c

p-HPEA 0.8 ± 0.1 c 3.1 ± 0.2 a

3-4 DHPEA-EDA 53.9 ± 3.7 c 138.7 ± 8.4 a

Verbascoside 1.9 ± 0.1 a 4.1 ± 0.3 b

Fenoli totali 77.2 ± 3.9 c 172.5 ± 3.9 a

3,4 DHPEA 30.4 ± 1.3 b 43.9 ± 2.3 a

p-HPEA 4.1 ± 1.4 d 1.8 ± 0.1 b

3-4 DHPEA-EDA 11.7 ± 0.1 d 68.2 4.1 b

Verbascoside

Fenoli totali 47.0 ± 1.9 d 113.9 ± 4.7 b

n.d. n.d.

DOPO UN MESE DI CONSERVAZIONE

YOGURT +

100 mg/L EFP

YOGURT +

200 mg/L EFP

n.d.

±

±

±

±

±

I risultati sono la media di tre determinazioni indipendenti ± deviazione standard. a–d, I valori nella stessa riga con lettere diverse in apice differiscono significativamente (P <0.01). nd: non trovato.

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COMPOSTI VOLATILI TROVATI TRAMITE HS-SPME/GC-MS NELLO SPAZIO DI TESTA DI YOGURT CONTENENTE EFPA DA AV (Servili et al., 2011.)

AlLDEIDI ACIDI GRASSI Acetaldeide acido Acetico Esanale Nonanale

CHETONI

ALCOLI

2,3-Butanedione

4-Penten-1-olo

3-Idrossi-2-butanone

1-Pentanolo

2,3-Pentanedione

3-Penten-2-olo 1-Esanolo

2-CHETONI 1-Eptanolo

Acetone 2-Etil-1-Esanolo

2-Butanone 1-Ottanolo

2-Eptanone 2-Nonanone

COMPOSTI AROMATICI

2-Undecanone

Etil-benzene Acetofenone

LATTONI

Fenolo

d-Decalattone

MONOTERPENI Limonene 6-Metil-5-epten-2-one acido Butanoicoc

acido Esanoico

Alcol fenil-etilico

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YOGURT CONTROLLO

YOGURT + 100 mg/L EFP

YOGURT + 200 mg/L EFP

19485.4 ± 413.3a 28168.3±398.4c 15731.6±333.7e 4520.0 ± 80.0a 4040.0 ± 409.0b 4906.0 ± 69.0c 11400.0 ± 241.8a 13350.5±188.8b 13300.0± 282.1b

103.8±1.9 a 74.0±2.3c 127.8±4.1d 27.9±1.0a 33.0±1.2b 38.6±1.7d 16.1±0.7ac 18.2±1.5bc 20.3±1.1b 17.9±0.8a 8.5±0.4c 14.8±0.4d 18.0±0.8a 14.7±0.6b 20.9±0.9c 4.7±0.2a 6.0±0.6b 5.2±0.2ad

18000.0±381.8b 24000.0±339.4d 12000.0±254.6f 4551.5 ± 81.9a 4068.1 ± 73.2b 4872.0 ± 74.0c 11356.9±160.6a 12164.4±172.0c 13700.0±193.7b

108.1±3.8a 80.6±2.9c 124.8±3.1d 32.5±1.2b 32.2±1.1b 38.1±1.3d 14.9±0.6a 15.6±0.6a 16.3±0.7ac 11.4±0.5b 9.6±0.4c 18.3±0.8a 14.5±0.6b 15.8±0.7b 24.0±1.0d 4.9±0.2a 8.3±0.3c 5.7±0.2bd

COMPOSIZIONE VOLATILE DELLO SPAZIO DI TESTA (µg/Kg) DELLO YOGURT CON E SENZA AGGIUNTA DI EFP DA AV (Servili et al., 2011).

Acetaldeide

Diacetile

Acetoino

2-Pentanone

2-Eptanone

2-Nonanone

1-Pentanolo

1-Esanolo

1-Ottanolo

STADIO INIZIALE

Acetaldeide

Diacetile

Acetoino

2-Pentanone

2-Eptanone

2-Nonanone

1-Pentanolo

1-Esanolo

1-Ottanolo

DOPO UN MESE DI CONSERVAZIONE

I risultati sono la media di tre determinazioni indipendenti ± deviazione standard. a–d, I valori nella stessa riga con lettere diverse in apice differiscono significativamente (P <0.01).

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Effetto di un concentrato fenolico da acque di vegetazione (CFSD) di olive sulla

qualità e sulla shelf-life di una caciotta vaccina

Campioni di Formaggio

1. Controllo

2. CFSD 0.5 – Latte + EFSD (0.5 g/L)

3. CFSD 1 – Latte + EFSD (1 g/L)

Evoluzione della Shelf-life a diversi tempi (T=0, T=3, T=6 ,T=10 e T15)

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3,4-DHPEA-EDA

3,4-DHPEA

Verbascoside

P-HPEA

Ripartizione percentuale dei fenoli contenuti nel CFSD (dati non pubblicati).

Ripartizione delle frazioni fenoiche tra siero e cagliata (mg/L) (dati non pubblicati).

Contenuto fenolico (mg/L) totale del latte (dati non pubblicati).

Latte controllo Latte CFSD 0.5 Latte CFSD 1 CFSD 0.5 CFSD 1

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76.6

24.931.7

0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

50.0

60.0

70.0

80.0

90.0

100.0

Cagliata vs T 15

Caciotta Controllo Caciotta CFSD 0.5 Caciotta CFSD 1

DECREMENTO (%) DELL’ α-

TOCOFEROLO NELLE CACIOTTE CONTENENTI POLIFENOLI DA

CFSD CONSERVATE PER 15 GIORNI (dati non pubblicati).

DECREMENTO (%) DEI FENOLI TOTALI CACIOTTE CONTENENTI POLIFENOLI DA CFSD CONSERVATE PER 15 GIORNI

(dati non pubblicati).

42.9

27.8

0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

50.0

60.0

70.0

80.0

90.0

100.0

Cagliata vs T 15

Caciotta CFSD 0.5 Caciotta CFSD 1

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Analisi sensoriale delle caciotte conservate 15 giorni (dati non pubblicati).

Durezza

Caciotta CFSD 0.5 Caciotta Controllo Caciotta CFSD 1

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l’industria alimentate per l’ottenimento di alimenti funzionali

Oleario

Lattiero caseario

l’industria alimentare quale additivo di origine naturale ad attività antiossidante ed antimicrobica

Pesce

Trasformazione delle carni

Trasformazione dei vegetali

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PROTOCOLLO SPERIMENTALE (Esposto et al., 2015).

Antiossidante aggiunto mg/kg nell’olio raffinato

(RO)

Estratto fenolico (EFP)

BHT

ROPE(1) ROBHT(1)

ROPE(2) ROBHT(2)

ROPE(3) _

ROPE(4) _

100

200

1.200

400

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Evoluzione dei composti fenolici (mg/kg) e dei prodotti dell’ossidazione (area counts) nell’ olio RO addizionato con 200 mg/kg di EFP (ROPE(2) durante la simulazione del processo di frittura* (Esposto et al., 2015).

Forma dialdeidica dell’acido elenolico ossidata

Forma ossidata del 3,4-DHPEA-EDA

Fenoli totali

Somma dei derivati dell’oleuropeina

Verbascoside

Tirosolo

0.0

50.0

100.0

150.0

200.0

250.0

ROPE (2) 4h

ROPE (2) 8h

ROPE (2) 12h

ROPE (2)

0.00E+00

2.00E+08

4.00E+08

6.00E+08

8.00E+08

1.00E+09

1.20E+09

1.40E+09

1.60E+09

1.80E+09

ROPE (2) 4h

ROPE (2) 8h

ROPE (2) 12h

ROPE (2)

* I valori sono la media di tre determinazioni indipendenti ± la deviazione standard.

Page 43: Variabilità dei composti fenolici bioattivi dalla materia ... 30 giugno/7 MAURIZIO SERVILI.pdf · Maurizio Servili , Sonia Esposto, Agnese Taticchi, Stefania Urbani Dipartimento

0.0

50.0

100.0

150.0

200.0

250.0

300.0

350.0

400.0

450.0

ROPE (3) 4h

ROPE (3) 8h

ROPE (3) 12h

ROPE (3)

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

ROPE (4) 4h

ROPE (4) 8h

ROPE (4) 12h

ROPE (4) 0.00E+00

5.00E+09

1.00E+10

1.50E+10

2.00E+10

2.50E+10

3.00E+10

ROPE (4) 4h

ROPE (4) 8h

ROPE (4) 12h

ROPE (4)

Fenoli totali

Somma dei derivati dell’oleuropeina

Verbascoside

Tirosolo

0.00E+00

2.00E+09

4.00E+09

6.00E+09

8.00E+09

1.00E+10

1.20E+10

1.40E+10

1.60E+10

ROPE (3) 4h

ROPE (3) 8h

ROPE (3) 12h

ROPE (3)

Forma dialdeidica dell’acido elenolico ossidata

Forma ossidata 3,4-DHPEA-EDA

* I valori sono la media di tre determinazioni indipendenti ± la deviazione standard.

Evoluzione dei composti fenolici (mg/kg) e dei prodotti dell’ossidazione (area counts) nell’ olio RO addizionato con 400 e1200 mg/kg di EFP

(ROPE(3) e ROPE(4)) durante la simulazione del processo di frittura* (Esposto et al., 2015).

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Evoluzione della somma dell’Acroleina e della β- β-Dimetilacroleina (µg/kg di olio) nell’ olio rettificato e in quelli arricchiti con EF e con BHT durante la simulazione di frittura*

(Esposto et al., 2015).

*La composizione volatile veniva valutata mediante HS-SPME-GC come riportato da Esposto et al., et al., 2013. I risultati sono la media di tre determinazioni indipendenti ± la deviazione standard.

RO ROBHT (1) 100 mg/kg

ROBHT(2) 200 mg/kg

ROPE (2) 200 mg/kg

ROPE (4) 400 mg/kg

ROPE (4) 1200 mg/kg

0

50

100

150

200

250

300

350

400

450 0

'

4h

8h

12

0'

4h

8h

12

0'

4h

8h

12

0'

4h

8h

12

0'

4h

8h

12

0'

4h

8h

12

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Evoluzione del α-tocoferolo (mg/kg di olio) nell’ olio rettificato e in quelli arricchiti con EF e con BHT durante la simulazione di frittura* (Esposto et al., 2015).

0.0

50.0

100.0

150.0

200.0

250.0

0 4 h 8 h 12 h 0 4 h 8 h 12 h 0 4 h 8 h 12 h 0 4 h h 12 h 0 4 h 8 h 12 h 0 4 h 8 h 12 h

La composizione volatile veniva valutata mediante HS-SPME-GC come riportato da Esposto et al., et al., 2013. I risultati la media di tre determinazioni indipendenti ± la deviazione standard.

RO ROBHT (1) 100 mg/kg

ROBHT(2) 200 mg/kg

ROPE (2) 200 mg/kg

ROPE (4) 400 mg/kg

ROPE (4) 1200 mg/kg

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Campioni di olio

1. OR olio rettificato

2. OR – olio rettificato + BHT (100 mg/kg)

3. OREF1 - olio rettificato + estratto fenolico (400 mg/kg)

4. OREF2 - olio rettificato + estratto fenolico (600 mg/kg)

PROTOCOLLO SPERIMENTALE UTILIZZO DELL’ EFP DA AV IN FRITTURA

Prova di frittura

• 4 cicli: T=0h,T=2h,T=4h, T=6h;

• 250 g di patate prefritte surgelate;

• frittura per 8’ a 180°C

Simulazione di un processa di frittura prolungato

(ristorazione)

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Evoluzione dei composti volatili (area counts) positivi dello spazio di testa delle patate sottoposte a frittura (dati non pubblicati).

0

200000

400000

600000

800000

1000000

1200000

OR ORBHT OREF1 OREF2

Composti Furanici

0

100000

200000

300000

400000

500000

600000

OR ORBHT OREF1 OREF2

Furfurale

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Evoluzione dell’acrilammide (mg/Kg) nelle patate sottoposte a frittura (dati non pubblicati).

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-passata di pomodoro.

-trito di carote, sedano, cipolla. -estratto fenolico (EF). -olio di oliva rettificato (OR), olio extravergine d’oliva (OEVO).

OR+ EF (OREF)

(OR)

(OEVO)

(Sugo con OR): Sugo con olio di oliva rettificato.

(Sugo con OREF): Sugo con olio di oliva rettificato contenente EF.

(Sugo con OEVO): Sugo con olio extravergine d’oliva.

Trito di verdure soffritto con 100 g di olio per 10 min. 800 g di passata di pomodoro portata a bollore, il tutto fatto cuocere per 20 min.

SUGO DI POMODORO CONTENENTE EF DA AV.

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COMPOSIZIONE FENOLICA DI OEVO E OREF (dati non pubblicati).

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

OLIO (mg/100 g) SOFFRITTO (mg/100 g) SUGO (mg/880 g)

Somma delle frazioni fenoliche di OEVO Somma delle frazioni fenoliche di OREF

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(OR) (OEVO)

(OR + EF (OREF)

EVOLUZIONE DI E-LICOPENE E β-CAROTENE DURANTE LA COTTURA DEI SUGHI (dati non pubblicati).

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

1800

2000

2200

POMODORO SUGO OR SUGO OEVO SUGO OREF

(mg/800 g) (mg/880 g) (mg/880 g) (mg/880 g)

E-licopene β - Carotene

a a a

a

b b

0.0

20.0

40.0

60.0

80.0

100.0

120.0

OR OREF1 OREF2

Passata di pomodoro tal quale Sugo (pomodoro + olio dopo cottura)

(olio raffinato + 600mg/kg di EFP)

(olio raffinato + 400mg/kg di EFP)

(olio raffinato)

EVOLUZIONE DELLA SOMMA DEGLI ISOMERI (Z)-LICOPENE (mg/100g) NELLA PASSATA DI POMODORO PRIMA E DOPO COTTURA (dati non pubblicati).

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FONTI ED EVOLUZIONE DI α-TOCOFEROLO DURANTE LA COTTURA DEL SUGO (dati non pubblicati).

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

POMODORO OR OEVO OREF SUGO OR SUGO OEVO SUGO OREF

(mg/800 g) (mg/100 g) (mg/100 g) (mg/100 g) (mg/880 g) (mg/880 g) (mg/880 g)

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INSACCATI CONTENENTI ESTRATTO FENOLICO (EFP) DA ACQUE DI VEGETAZIONE.

EF • 750 mg/kg • 1500 mg/kg

EVOLUZIONE SUL PRODOTTO CRUDO E COTTO A DIVERSI TEMPI DI CONSERVAZIONE (0, 7, 15 giorni

di conservazione)

EVOLUZIONE A DIVERSI TEMPI DI STAGIONATURA (0, 3, 10 e 20 giorni

di stagionatura)

Effetto antiossidante e antimicrobico Effetto antiossidante e antimicrobico

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L1= 0.075% (750 mg/Kg) di estratto fenolico L2= 0.15% (1500 mg/Kg) di estratto fenolico

(concentrazioni non sensorialmente percepibili)

EVOLUZIONE DEI MICRORGANISMI SUL PRODOTTO A DIVERSI TEMPI DI CONSERVAZIONE (0, 7, 15 GIORNI DI

CONSERVAZIONE)

La TVC (conta totale della carica batterica), muffe, lieviti, Pseudomonas e LAB sono stati influenzati dai livelli di EF, dopo 7 giorni. In particolare, l'estratto fenolico ha inibito la crescita di tutti i microrganismi in modo dose correlato, con un effetto più marcato al 0,15% rispetto a 0,075%. È interessante notare che i campioni L2 hanno mostrato una riduzione di 1 log10 CFU / g della TVC: questi risultati sono confrontabili con altri studi sul salumi crudi in cui hanno utilizzato nitrato / nitrito di sodio o come additivi

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The data significance was evaluated by one way ANOVA using the Fisher LSD test (p ≤ 0.05). The lowercase letters indicate the differences between the various thesis (control, L1 and L2), while the uppercase letters indicate the differences between the different seasoning time (0, 3, 10 and 20 days)

Controllo L 1 (750 mg/kg di EFP) L 2 (1500 mg/kg di EFP)

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5

4.0

4.5

5.0

Control L1 L2

T=0 T=7 T=15a A

a b A

b A

a B b B a B

b B a B a B

Effetto antiossidante: Evaluzione del numero di perossidi (meq O2/kg ) nella frazione grassa delle salsicce dopo cottura (dati non pubblicati).

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a

c d

b

c d

e

a

b

c

c c

e

a a c b c a c b

b c

a b c c

d e

0

100

200

300

400

500

600

T= 0 T=7 T=15 T= 0 T=7 T=15

crudo cotto

Fenoli totali

Derivati dell’oleuropeina (3,4 DHPEA e 3,4 DHPEA-EDA)

Verbascoside

p-HPEA

Effetto antiossidante: Evoluzione dei composti fenolici prima e dopo cottura delle salsicce addizionate con 750 mg/kg di EFP (dati non pubblicati).

z I valori sono la media di tre indipendenti valutazioni analitiche, la deviazione standard è riportata in parentesi,i valori nella stessa riga con lettere diverse (a–e )differiscono significativamente per (P<0.01). nd: non determinato.

Effetto antiossidante: Evoluzione dei composti fenolici prima e dopo cottura delle salsicce addizionate con 1500 mg/kg di EFP (dati non pubblicati).

a

c d

b

c d

e

a

b

c c c

e

a a c b c a c b b c

a b c c d e

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

T= 0 T=7 T=15 T= 0 T=7 T=15

crudo cotto

Fenoli totali

Derivati dell’oleuropeina (3,4 DHPEA e 3,4 DHPEA-EDA)

Verbascoside

p-HPEA

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INSACCATI CONTENENTI ESTRATTO FENOLICO (EFP) DA ACQUE DI VEGETAZIONE.

EF • 750 mg/kg • 1500 mg/kg

EVOLUZIONE SUL PRODOTTO CRUDO E COTTO A DIVERSI TEMPI DI CONSERVAZIONE (0, 7, 15 giorni

di conservazione)

EVOLUZIONE A DIVERSI TEMPI DI STAGIONATURA (0, 3, 10 e 20 giorni

di stagionatura)

Effetto antiossidante e antimicrobico Effetto antiossidante e antimicrobico

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INSACCATI CONTENENTI EFP DA AV.

EVOLUZIONE DEI COMPOSTI FENOLICI E DELLA STABILITÀ OSSIDATIVA A DIVERSI TEMPI DI STAGIONATURA (0, 3, 10 e 20 giorni di stagionatura)

Effetto antiossidante e antimicrobico

EF • 750 mg/kg • 1500 mg/kg

Impasto per salame, a -20°C sotto vuoto per 2 giorni

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0

200

400

600

800

1000

1200

T= 0 T=3 T=10 T= 20 T= 0 T=3 T=10 T= 20

L 1 (750 mg/kg) L 2 (1.500 mg/kg)

Polifenoli Totali 3-4 DHPEA-EDA 3,4 D-HPEA Verbascoside p-HPEAPolifenoli Totali Verbascoside P-HPEA 3,4-DHPEA 3,4-DHPEA-EDA

A

B

A

A

B

A

A B

A A

C

D A

C D C

D A

A B

B

C

A

A

B

A

A

B

D

A A

C

A A A A

A A

C

D

Effetto antiossidante e antimicrobico: evoluzione dei composti fenolici (mg/kg) nei salami con aggiunta di estratto fenolico (L 1 750 mg/kg, L 2 1500 mg/kg) in funzione della stagionatura .

La significatività dei dati è stata analizzata tramite one way ANOVA utilizzando il test di Fisher LSD (p≤0,05). Le diverse lettere (A-D) indicano che il dato è diverso rispetto a tempi di stagionatura differenti (0, 3, 10, 20).

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Effetto antiossidante : evoluzione del numero dei perossidi (Meq. O2/Kg di salame) nei salami controllo e in quelli con aggiunta di estratto fenolico (L 1 750 mg/kg; L 2

1500 mg/kg) in funzione dei giorni di stagionatura (Novelli et al., 2014).

La significatività dei dati è stata analizzata tramite one way ANOVA utilizzando il test di Fisher LSD (p≤0,05). Le lettere minuscole diverse indicano che il dato è diverso rispetto alle differenti tesi (Controllo, L1, L2), mentre le lettere maiuscole diverse indicano che il dato è diverso rispetto a tempi di stagionatura differenti (0, 3, 10, 20).

0,0

0,5

1,0

1,5

2,0

2,5

3,0

3,5

4,0

4,5

5,0

control L 1 (750 mg/kg of OVWPE) L 2 (1500 mg/kg of OVWPE)

T=0 T=3 T=10 T=20

a B

a A

a C

a D

b A b B

b C

B

b A b A b B

c C

Controllo L 1 (750 mg/kg di EFP) L 2 (1500 mg/kg di EFP)

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GRAZIE PER L’ATTENZIONE