18/04/2008

Espressione di p16INK4a in 246 pap-test anomali come indicatore di

lesioni CIN2+; suo possibile ruolo nel triage di ASC-US ed LSIL

Dott.ssa Daniela Gustinucci,Az.USL 2 dell’Umbria

Dipartimento di Patologia clinica U.O.C. Citologia

Congresso Nazionale GISCi – Orvieto 3-4 aprile 2008

18/04/2008

Pap-test buona specificità ma sensibilità non molto elevata. Si basa su caratteristiche morfologiche visibili che fotografano la lesione come fosse un evento statico e non un processo dinamico

Test HR-HPV ottima sensibilità ma bassa specificità; HR-HPV è causa necessaria del cervicocarcinoma ma rappresenta una delle infezioni più comuni tra quelle sessualmente trasmesse

Necessità di test in grado di fornire informazioni più dettagliate sulla lesione ( es: possibilità di progredire) eche vadano al di là del solo aspetto morfologico

18/04/2008

Table 1.Suggested regression/persistence/progression likelihoods of pre-cancerous lesion (Ostor, 1993)

Severiti of the regression persistence progression progression to Lesion to CIN3 invasive cancer

CIN 1 60% 30% 10% 1%

CIN2 40% 40% 20% 5%

CIN3 33% <55% -- >12%

18/04/2008

p16INK4a

importante regolatore del ciclo cellulare

18/04/2008

Ciclo cellulare

p16INK4a

ImmunocitochimicaCyclin-CDK 4/6

da DakoCytomation

18/04/2008

….quindi p16INK4a èmarker dell’innesco del processo ditrasformazione tumorale

18/04/2008

Materialiesaminati 246 pap-test (151 convenzionali e 95 in strato sottile)di donne di età 25-64 anniinviate II° livello Screening con ASC +tutte con follow-up colposcopico od istologicoperiodo: maggio 2005-giugno 2007

18/04/2008

Metodopap-test convenzionali ed in fase liquida

colorazione

valutazione citologica

mappatura

smascheramento (forno a microonde)

reazione immunocitochimica (i6000TM BioGenex)

colorazione di contrasto: Papanicolau

18/04/2008

La reazione era considerata positiva se almeno una cellula con atipie,1 colorata immunocitochimicamente, era contenuta all’interno dei campi mappati ed indipendentemente se la colorazione era solo nucleare o nucleare e citoplasmatica

1) TRUNK MJ et al.- Morphologic characteristics of p16INK4apositive cells in cervical cytology samples - Acta Cytol.2004

18/04/2008

18/04/2008

18/04/2008

18/04/2008

18/04/2008

18/04/2008

ASC-US 91

LSIL 60

ASC-H 36

HSIL-CIN2 22

HSIL-CIN3+ 37

Totale 246

Frequenza delle categorie diagnostiche

18/04/2008

Distribuzione delle Valutazioni Citologiche in 121 pap-test saggiati per p16

VALUTAZIONECITOLOGICA

p16 + (%) p16 - (%) TOTALE

ASC-US 42 (46%) 49 (54%) 91

LSIL 32 (53%) 28 (47%) 60

ASC-H 35 (97%) 1 ( 3%) 36

HSIL-CIN2 19 (86%) 3 (14%) 22

HSL-CIN3 + 37 (100%) 0 (0%) 37

TOTALE 165 (67%) 81 (33%) 246

18/04/2008

Distribuzione delle diagnosi istologiche rispetto alle diverse categorie diagnostiche ed alla reattività per

p16INK4a

Negativi CIN1 CIN2 CIN3+p16+ p16- p16+ p16- p16+ p16- p16+ p16-

ASC-US 11 19 11 26 13 3 7 1

LSIL 8 10 14 16 6 2 4 0

ASC-H 4 0 9 0 9 0 13 1

HSIL + 3 1 7 2 13 0 33 0

TOTALE( % )

26(47%)

29(53%)

41(48%)

44(52%)

41(89%)

5 (11%)

57(97%)

2 (3%)

18/04/2008

Test p16INK4a

Sensibilità vs CIN2+ASC-US / LSIL: 83% (30/36)Tutte categorie diagnostiche: 93% (98/105)

SpecificitàASC-US / LSIL: 62% (71/115)Tutte categorie diagnostiche: 52% (74/141)

18/04/2008

Valore predittivo positivo (VPP) vs CIN2 +

Tutti p16 + ASC-US 26% 48%LSIL 20% 31%ASC-H 64% 63%HSIL-CIN2 68% 80%HSIL-CIN3 84% 84%Tutte.cat.diag. 43% 59%

18/04/2008

p16INK4a

Valore Predittivo Negativo(VPN)

ASC-US / LSIL 92%

Tutte cat. Diagnostiche 91%

18/04/2008

Distribuzione delle diagnosi istologiche rispetto alle diverse categorie diagnostiche ed alla reattività per

p16INK4a

Negativi CIN1 CIN2 CIN3+p16+ p16- p16+ p16- p16+ p16- p16+ p16-

ASC-US 11 19 11 26 13 3 7 1

LSIL 8 10 14 16 6 2 4 0

ASC-H 4 0 9 0 9 0 13 1

HSIL + 3 1 7 2 13 0 33 0

TOTALE( % )

26(47%)

29(53%)

41(48%)

44(52%)

41(89%)

5 (11%)

57(97%)

2 1(3%)

1) Lea JS et al.- American Journal of Obstetrics Ginecology 2004

18/04/2008

Test p16INK4a : altri studi

Wentzensen N et al -Cancer Cytopathology 2007137 ASC-US : sensibilità 95% 88 LSIL : sensibilità 100%

specificità 81% specificità 84%VPP 49% VPP 29%VPN 99% VPN 100%

Holladay EB et al - Cancer Cytopathology 2006100 ASCUS : sensibilità 89% 100 LSIL : sensibilità 75% 100 HSIL : sensibilità 78%

specificità 68% specificità 59% specificità 25%

Carozzi F et al - Cancer Cytopathology 2006154 casi (ASC-US, LSIL e Negativi F.UP) HR-HPV positivi : sensibilità 88%

specificità 61% VPP 30%

Meyer JL et al - Cancer Cytopathology 200673 casi (ASC-US, LSIL ed HSIL) : sensibilità 81% (dopo revisione 96%)

specificità 62%

18/04/2008

Distribuzione delle diagnosi istologiche rispetto alle diverse categorie diagnostiche ed alla reattività per

p16INK4a

Negativi CIN1 CIN2 CIN3+p16+ p16- p16+ p16- p16+ p16- p16+ p16-

ASC-US 11 19 11 26 13 3 7 1

LSIL 8 10 14 16 6 2 4 0

ASC-H 4 0 9 0 9 0 13 1

HSIL + 3 1 7 2 13 0 33 0

TOTALE( % )

26(47%)

29(53%)

41(48%)

44(52%)

41(89%)

5 (11%)

57(97%)

2 (3%)

18/04/2008

Negri G et al.- p16INK4a expression and progression risk of low-grade intraepithelial neoplasia of the cervix uteri. Virchows Arch 2004

Bibbo M et al.- Procedure for Immunocytochemical detection of p16INK4a antigen in Thin-layer liquid-based specimens. Acta Cytologica 2001

Bibbo M et al.- p16INK4a as an adjunct test in liquid-based cytology. Anal Quant Cytol Histol. 2003

Altri studi

18/04/2008

CONCLUSIONI

p16INK4a risulta un marker sensibile e specifico nell’individuare lesioni

istologiche CIN2+ anche in presenza di atipie citologiche ASC-US ed LSIL ed un valido aiuto nella prognosi delle

lesioni della cervice uterina.

18/04/2008

18/04/2008

…circa i n. 5 campioni con diagnosi istologica di CIN2 (n. 3 ASCUS e n. 2 LSIL ) e n. 2 CIN3 1 (n. 1 ASCUS e n.1 ASC-H), p16 negativi risultavano alla revisione:

• n. 3 casi con poco materiale diagnostico• n. 1 caso con materiale mal conservato 2

1) Lea JS et al.- American Journal of Obstetrics Ginecology 20042) Pietong C et al.-Acta Cytol.2003

18/04/2008

18/04/2008

18/04/2008

Distribuzione delle diagnosi istologiche nelle diverse categorie diagnostiche

Valutazione Negativo CIN1 CIN2 CIN3+ Totale Citologica

ASC-US 30 37 16 8 91

LSIL 18 30 8 4 60

ASC-H 4 9 9 14 36

HSIL-CIN2 2 5 10 5 22

HSIL-CIN3 2 4 3 28 37

Totale 55 85 46 59 246