SIMT-POS 046 S.I.M.T. Viterbo Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati Analisi Immnunoematologiche Validazione Emocomponenti

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Prima Stesura Redattori: Gasbarri, Rizzo

Data: 11-10-2016

SIMT-POS 046

ANALISI IMMUNOEMATOLOGICHE

Validazione Emocomponenti

Indice 1 SCOPO ............................................................................................................................ 2

2 CAMPO D’APPLICAZIONE ............................................................................................. 2

3 DOCUMENTI DI RIFERIMENTO ..................................................................................... 2

4 DESCRIZIONE ATTIVITÀ ............................................................................................... 3

4.11 Flow-Chart .............................................................................................................. 3

4.1.2 Accettazione campioni di sangue e schede donazioni ............................................... 4

4.1.3 Valutazione e controllo campioni ............................................................................ 4

4.1.4 Processazione campioni ........................................................................................ 4

4.2 Controllo gruppo sacca donatori ................................................................................ 5

4.3 Validazione e controllo finale ..................................................................................... 6

4.4 Rilascio schede validate ............................................................................................ 6

4.5 Gestione test non conclusi ......................................................................................... 6

4.6 Conservazione e smaltimento dei campioni .............................................................. 6

5 INDICATORI .................................................................................................................... 7

6 RESPONSABILITA’ ......................................................................................................... 7

7 ABBREVIAZIONI ............................................................................................................. 8

8 ALLEGATI ....................................................................................................................... 8

Stato delle Modifiche Rev. Descrizione Modifica Redige Verificato Approvato Emette Data 00 Prima Redazione De Angelis, Rizzo Gasbarri Riscaldati Gasbarri 11-10-2016 01 i i 02 03 04 05

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1 SCOPO Descrivere le attività inerenti la qualificazione biologica delle unità di sangue ed emocomponenti.

2 CAMPO D’APPLICAZIONE La procedura si applica ai campioni di sangue prelevati ad ogni donazione di sangue intero di tipo omologo, ad ogni donazione di emocomponenti mediante aferesi.

3 DOCUMENTI DI RIFERIMENTO - DL 03 marzo 2005 “Protocolli per l’accertamento dell’idoneità del donatore di sangue ed emocomponenti” GU N.85, 3-4-2005 - DL 19 agosto 2005, n. 191: “Attuazione della direttiva 2002/98/CE che stabilisce norme di qualità e di sicurezza per la raccolta, il controllo, la lavorazione, la conservazione e la distribuzione del sangue umano e dei suoi componenti” - Legge 21 ottobre 2005, n.219: “Nuova disciplina delle attività trasfusionali e della produzione nazionale degli emoderivati” GU n. 251, 27-10-2005 - Raccomandazione n.R(95) 15 del Comitato dei Ministri del Consiglio d’Europa: ”Guida alla preparazione, uso e garanzia di qualità degli emocomponenti” 15^ Edizione, 2009 - Deliberazione Giunta Regione Lazio n.343 del 20 giugno 2006 “Piano Regionale Sangue e Plasma per il triennio 2006-2008” - Technical Manual. AABB. 16^ Edizione, 2009 - Standard di Medicina Trasfusionale – SIMTI, II Edizione 2010 - Linee Guida TRALI – Centro Nazionale Sangue, 1 Aprile 2011 - Manuale Operativo – GALILEO IMMUCOR - Metodiche prodotti GALILEO – IMMUCOR - Procedure di Verifica e Manutenzione – GALILEO IMMUCOR - Manuale di Assistenza “Don’t panic!” – GALILEO IMMUCOR - Foglietti Illustrativi e Master List dei reattivi e kit emodiagnostici Marchio CE: Direttiva 98/79/CE Standard SIMTI 2° edizione

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4 DESCRIZIONE ATTIVITÀ

4.11 Flow-Chart

Controlli di qualità Controlli di qualità

Refertazione

Test Conclusi

Validazione e

Controllo Finale

Gestione Test

non Conclusi

Rilascio Schede

Validate

Conservazione

Campioni

Archiviazione Dati

Accettazione

Campioni e Schede

Anamnestiche

Donatori

Valutazione e

Controllo Campioni

Avvio Seduta Analitica

Test I LIVELLO

Metodiche

Automatiche

Metodiche

Manuali

Controllo Gruppo

Unità

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4.1.2 Accettazione campioni di sangue e schede donazioni Il TSLB accetta dalla sala prelievi 2 provette con anticoagulante (EDTA) più una provetta trasparente vuota. Le provette accettate hanno le seguenti caratteristiche: − 1 provetta(EDTA) da 2.6 ml prelevata all'atto della donazione per la tipizzazione

AB0/RH/K e la ricerca di anticorpi irregolari;

− 1 provetta(EDTA) da 2.6 ml; prelevata all'atto della donazione per l’esecuzione

dell’emocromo e il controllo del gruppo in schedina dei donatori sconosciuti.

− 1 provetta trasparente vuota per l’esecuzione del controllo gruppo sacca, in automatico

(IH 1000), utilizzando un segmento del tubicino della sacca stessa.

4.1.3 Valutazione e controllo campioni Il TSLB valuta l’idoneità e l’eventuale non conformità (NC) dei campioni di sangue secondo i criteri riportati nell’istruzione operativa correlata (SIMT IO 047).

4.1.4 Processazione campioni Vengono eseguiti i seguenti test immunoematologici di I e II livello:

− determinazione del gruppo sanguigno AB0 con prova diretta mediante l'utilizzo di

reagenti monoclonali IgM anti-A, anti-B e anti-AB e prova indiretta su siero o plasma con

emazie A1, A2, B, 0, controllo autologo (test I livello)

− definizione varianti A1/A2 dei gruppi A e AB (test II livello)

- determinazione tipo RhD con due reagenti anti-D: IgM e IgM+IgG

determinazione del fenotipo Rh completo (test I livello)

- determinazione dell'antigene Kell – I livello (con determinazione dell'antigene Cellano sui

campioni Kell positivi- test II livello)

- lo screening degli anticorpi irregolari anti-eritrocitari (test I livello).

I test immunoematologici vengono eseguiti con gli analizzatori automatici NEO e IH-1000

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L’esecuzione dei test avviene secondo i seguenti step consecutivi:

- Centrifugazione dei campioni di sangue

- Preparazione dello strumento NEO

- Avvio del CQ giornaliero su NEO

− Programmazione degli esami (interfacciamento DNA: EMONET-NEO)

− Stampa della lista di lavoro da EmoNet

- Avvio della seduta analitica campioni di donatori su NEO-Test di I livello

- Approvazione dei campioni con i test di I livello completati da eventuali controlli manuali

- Selezione automatica (reflex testing) o manuale dei campioni per i test di II livello.

- Avvio dei campioni di donatori selezionati su NEO-Test di II livello

- Approvazione dei campioni con i test di II livello completati da eventuali controlli manuali.

- Refertazione, trasferimento risultati NEO-Emonet, validazione e stampa dei test approvati

- Rilascio delle schede, archiviazione dei dati, conservazione e smaltimento dei campioni dei

sangue.

- Sospensione dei campioni con gli esami “non determinati” e prosecuzione del trattamento

del campione secondo quanto descritto negli algoritmi allegati

4.2 Controllo gruppo sacca donatori Su tutte le unità di emazie omologhe pervenute, sulla venula della sacca, vengono eseguiti i seguenti test immunoematologici prima che venga effettuata la validazione di tutti i test di I e II livello effettuati sul donatore:

• Determinazione diretta del gruppo sanguigno AB0 con metodica automatica in colonna (IH-1000);

• Determinazione tipo RHD con metodica automatica in colonna (IH-1000) Le unità vengono accettate e vengono segnalate le eventuali NC dovute a mancato barcode, barcode danneggiato, venula priva di emazie, coaguli, ecc. Con la modalità manuale, da ogni unità di CE viene tagliato un segmento del tubicino satellite utilizzando un dispositivo pungitubo monouso inserito nella provetta vuota trasparente senza tappo (da 3ml) precedentemente accettata con i campioni di sangue dei singoli donatori. Viene controllata attentamente la corrispondenza del N.identificativo sacca-provetta e si procede alla puntura della venula e al riempimento della provetta con sangue della sacca. Sulla lista di lavoro vengono evidenziate le unità di EC controllate e segnalati con un cerchio gli eventuali controlli non eseguiti con la motivazione dello scarto dell’unità da parte dell'Area Preparazione Emocomponenti (sacca interrotta, peso insufficiente, peso eccedente, presenza di coaguli, rottura sacca, sacca chilosa,ecc).

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4.3 Validazione e controllo finale Il dirigente in servizio interpreta le reazioni del CQ, dei controlli interni, approva i test dei campioni e del controllo sacca, referta e trasferisce i risultati NEO-Emonet. Valida e stampa i test approvati, rilascia le schede e sospende i campioni con gli esami “non determinati” secondo sia quanto riportato nella SIMT-IO 025 che nella SIMT-POS 027. Il TSLB: - archivia i dati -si occupa della conservazione e dello smaltimento dei campioni di sangue. ll dirigente in servizio valuta, sui campioni di sangue con risultati non determinati, dubbi o invalidi, la necessità di eseguire ulteriori controlli immunoematologici con metodiche manuali. Inoltre, dopo l’interpretazione dei test manuali effettua le modifiche dei risultati non determinati dallo strumento riportando un breve “commento” sul controllo effettuato; consulta gli esami delle donazioni precedenti, “approva” i risultati sullo strumento e li stampa. Trasferisce in automatico i risultati approvati ad Emonet tramite interfacciamento (DNA NEO-EMONET) referta e valida i test su Emonet.

4.4 Rilascio schede validate Il dirigente stampa, controlla la congruenza dei risultati di NEO con quelli presenti in Emonet e firma i risultati validati. In presenza di discrepanze tra dati di NEO e/o dati di Emonet e/o scheda anamnestica del donatore si sospende la validazione degli esami immunoematologici, si avverte il RQ e il Settore Preparazione Emocomponenti sulla eventuale NC. L'inserimento manuale dei test in EMONET (SIMT-IO 036 Inserimento in manuale dati in Emonet ) viene fatto in doppio Medico-Tecnico

La programmazione ed il trasferimento dei test Neo-Emonet avviene secondo le modalità descritte in SIMT-IO 037 Trasferimento dati NEO-EMONET.

Il dirigente infine rilascia le schede con gli esami validati di 1°, 2° livello ed il controllo sulla sacca.

4.5 Gestione test non conclusi Il dirigente sospende le schede dei donatori con gli esami non determinati o dubbi. Inoltre sospende le schede con discrepanze nella determinazione ABO e RH o di altri antigeni, con ricerca di anticorpi irregolari positiva/dubbia e/o con test di Coombs diretto positivo/dubbio. Lo studio viene approfondito successivamente con l’eventuale eliminazione dell’unità di sangue per motivi sanitari e richiamo del donatore (Settore Controllo Donatori) per eseguire ulteriori controlli su nuovi campioni di sangue.

4.6 Conservazione e smaltimento dei campioni I campioni di sangue vengono conservati a 4°C sino alla tipizzazione e successivamente vengono eliminati negli appositi contenitori in polietilene per rifiuti sanitari pericolosi a rischio infettivo (RSPRI).

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4.12 Controlli di qualità

Il TSLB secondo le raccomandazioni del Consiglio d'Europa esegue giornalmente e mensilmente i controlli di qualità interni per i reattivi utilizzati sullo strumento e nelle metodiche manuali i controlli validati dal dirigente.

5 INDICATORI Indicatore Modalità di raccolta Responsabilità

raccolta - tempi

Responsabilità

analisi - tempi

- N° NC Richieste-Campioni

-------------------------------------

- N° Richieste e Campioni

Reparto Richiedente

- Tipologia NC

Medico

- Giornaliero

- Settimanale

RQ

- Mensile - Annuale

6 RESPONSABILITA’ Responsabilità: le responsabilità per le attività e gli operatori previsti nella presenta procedura sono indicate dalla seguente tabella secondo la priorità: C = Collabora, R = Responsabile

ATTIVITA' TSLB DIRIGENTE

RESP.

Accettazione campioni R C

Processazione campioni: avvio seduta analitica R

Controllo gruppo unità: accettazione sacche e avvio seduta

analitica

R C

Refertazione R

Validazione e controllo finale R

Gestione test non conclusi R

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7 ABBREVIAZIONI

Abbreviazione Descrizione

NC Non Conformità

TSLB Tecnico Sanitario di Laboratorio Biomedico

SIMT Servizio Immunoematologia e Medicina Trasfusionale

CE-PREF- BD Emazie concentrate prefiltrate prive di buffycoat

EC Emazie congelate

SI Sangue Intero

RQ Responsabile Qualità

Nomenclatura UNI Descrizione

AB0 Gruppo Sanguigno AB0

A1 A2 Varianti gruppo A

RhD Antigene D

D-weak Varianti antigene D

D-Partial, D-mosaic Varianti Antigene D

Fenotipo Rh Antigeni C,c,E,e

K Antigene Kell

K Antigene Cellano

Fya Fyb Antigeni Duffy

Jka Jkb Antigeni Kidd

Lea Leb Antigeni Lewis

Lua Lub Antigeni Lutheran

Kpa Kpb Antigeni Kell-Penney (Kp)

M N S s Antigeni MNSs

P1 P2 Antigeni P

Cw Antigene Cw

8 ALLEGATI SIMT-IO 025 Algoritmo SIMT-POS 027 Analisi Immunoematologiche eritrocitarie SIMT-IO 036 Inserimento in manuale dati in Emonet