Metodi di osservazione dei microrganismi. 1 m = 0,001mm 1nm = 0,000001mm 1A = 0,0000001 mm Le...

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11m = 0,001mmm = 0,001mm1nm = 0,000001mm1nm = 0,000001mm1A = 0,0000001 mm1A = 0,0000001 mm

Le dimensioni dei microrganismi

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Limite di risoluzione dell’occhio umano (a 25 cm): 0,2 mm

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Microscopio ottico

Microscopio elettronico

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I microscopi ottici

•microscopi semplici: un solo sistema di lenti (lenti di ingrandimento, i primi microscopi…);

•microscopi composti: due sistemi di lenti (i microscopi moderni con obiettivi e oculari)

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Anatomia di un microscopio

stativo

fonte di illuminazione

fotocamera o telecamera

oculari

diaframma di campo

revolver con obiettivi

tavolino traslatore

vite macrometrica e micrometrica

condensatore

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Ingrandimento

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La luce visibile

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Risoluzione e ingrandimento

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POTERE DI RISOLUZIONE vs INGRANDIMENTOPOTERE DI RISOLUZIONE vs INGRANDIMENTO

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Il limite di risoluzione dei microscopi

d 0,5Nsen

: è 400-700 nm per la luce visibileN: è 1 quando il mezzo interposto fra lente e preparato è l’aria: nelle lenti migliori si avvicina ad 1

= ~0,25m: lunghezza d’onda della luceN: indice di rifrazione del mezzo interposto fra lente e preparato: semiangolo della lente dell’obiettivo

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Il limite di risoluzione dei microscopi

Il limite di risoluzione può essere migliorato Il limite di risoluzione può essere migliorato (diminuito):(diminuito):

• diminuendo diminuendo (200-400 nm per la luce UV) (200-400 nm per la luce UV)

• aumentando il prodotto Nsenaumentando il prodotto Nsen (apertura (apertura numerica, NA) per esempio interponendo fra numerica, NA) per esempio interponendo fra obiettivo e campione un olio con un indice di obiettivo e campione un olio con un indice di rifrazione simile a quello del vetro (1,518)rifrazione simile a quello del vetro (1,518)

d 0,5Nsen

= ~0,16m

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Microscopio ottico in campo oscuro

Campo chiaroCampo chiaro Campo oscuroCampo oscuro

Treponema pallidum

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Microscopio ottico a fluorescenza

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Microscopio elettronico

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Gli elettroni si comportano come onde

La lunghezza d’onda degli elettroni è di 0,1-0,04 nm

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Fonte di elettroni

Condensatore

Condensatore

Fonte di elettroni

Campione

Campione

Obiettivo

Lente delproiettore

Lente delproiettore

Fascio di elettroni

Fascio di elettroni

Immagine sullo schermo fluorescente

Immagine sullo

schermo televisivo

Microscopio elettronico a trasmissione

Microscopio elettronico a scansione

Deviazione degli elettroni

Detector

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http://www.losfoglio.it/foto%5CMicroscopio%20elettronico.gif
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Microscopio elettronico a trasmissione

Microscopio elettronico a scansione

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Microscopio elettronico


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