This article was downloaded by: [The UC Irvine Libraries]On: 07 November 2014, At: 23:33Publisher: Taylor & FrancisInforma Ltd Registered in England and Wales Registered Number: 1072954Registered office: Mortimer House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH,UK

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Gli elementi figuratinell'emolinfa delle larve diLimnephilus rhombicus L.(Trichoptera limnophilidac)Maria Teresa La Cava aa Istituto di Zoologia - Idrobiologia e Pesciculturadella Università di PerugiaPublished online: 14 Sep 2009.

To cite this article: Maria Teresa La Cava (1964) Gli elementi figurati nell'emolinfadelle larve di Limnephilus rhombicus L. (Trichoptera limnophilidac), Bolletino dizoologia, 31:2, 1361-1370, DOI: 10.1080/11250006409441166

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MARIA TERESA LA CAVA Istituto di Zoologia - Idrobiologia e Pescicoltura della Uuiverrita di Perugia

Direttore : Prof. G. A I O I ~ K I . I I

Gl i eleiiiciiti figurnti nell'emolinfa delle lnrre

di Liritii ephilrts rh on1 bicrrs L. (Trich o p tera li m i 1 o philidac) .

(COII 4 Tav. f. testo)

L'eniolinfa tlegli insetti i: stata oggetto tli studio (la parte cli niolti riccrcatori. G i i CUEKOT (4 ) ncl 1895, tlnva n n pririio cpatlro tlegli elementi fignrati 1il)eri lie1 fhricln circolante clcgli Ortotteri, clistinguen- tlovi vari tipi tli an iehc i t i . In segiiito HOLLAXDE ( 5 , 6, 7) 611 LEPIDOT-

sii COLEOTTERI, YEACER (29) su LEPIDOTTERI, AMOURIQ (1) su DITTERI, ela1)oravano i ina classificazione clegli elenienti fignrati tlell'eniolinfa, distingucntlovi diverse classi c tipi tli cellulc e proponentlo piii accurate sisteni a zio n i .

I1 riletotlo piii larganiente nsato era la rolorazione sii striscio, coacliiivata poi clalla gorcia ~)cnclente e sussicliata infine clal niicrosco- pin a contrasto cli fase.

JOKES (8 , cfr. WICCLESWORTII, 24) tlescrisse cliiaramcnte tro tipi tli cellnlc : plasniatociti, cistociti ecl enocitoitli, trovatc nell'eniolinfa clcl &en. TeneLrio. I n seguito lo stcsso A. (lava percentuali/'rnni3 (lei plasmatociti, eniociti granulari e cellule sfericlle, trovate nella larva cli Sarchophaga I i i l l n ~ a Park., all'nltinio starlio larvale. AMOURIQ ( I), AKESSOX, DEKKEL (cfr. WIGCLESWOIITII, M), lianno accresciuto la lista tlelle fornic conoscinte con stiitli si t iiltri Ditteri.

L'elenco (lei lavori tlell'eniolinfa clcgli insetti esigcre1)Le troppo spazio e pertanto ci sianio liiiiitnti a citariie solo parte cli cpelli ritenuti piti inclicativi agli cffctti tlcllc nostre riccrclie.

Nor] clisponenclo cli nn cInacIro rnorfologico tlcgli elenienti figurati dell'eniolinfa tlei Tricotteri, noi al)l)iamo tleclicato particolare interesse

TERI C COLEOTTERI, I'AILLOT (16) $11 LEPIDOTTERI, b I E T A L K I h O V (10)

Ringrazio il Prof. Ginrnpnolo hlorctti, clie mi h n proposto questo studio, guitlantlorni irella soluzione e classificazione clelle larve.

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- 1362 - agli stutli fatti da YEACER (29) su P r o c h i n eritlartia Cram. e da altri AA. (7 , 8, 9, 10, 16, 19, 30) sii varie specie cli Lepiclotteri, data la vicina posizione sisteinatica cli questo orcline con i Tricoltcri (al) , (*).

L’originc clcgli cleiiicnti figurati tlcll’cn~olinfa seiiil)ra essere nioso. (24). Essi appaiono liberi nel

fluiclo circolantc o raccolti in agglomcrati celliilari ( 14). SemLra inoltrc clie gli cmociti non giocliino un ruolo tleteriiiinantc sulIa quantith tQtak? cli liquiclo circolante (24).

Questa prima nota riguarcla la inorfologia clegli emociti clelle larve dell’ultimo staclio di Lininephilus rhonibictis L.

derniica o tipica dclle a lynipli glands

MATERIALE I< TECKICA.

Sono state scclte le larvc di ultimo stadio rli Limnephiliis rlionibiciis L. perch& cli notcvoli dirnensioni ( 15-18 mm) e facilmcnte atlatlabili allc condizioni tli allevamento. Esse inoltre abbonclano in natura ; ci6 conscnte tli potcr clisporre cli iina cpantil i tli iiiaterialc prezioso data I’esiguiti cli cmolinfa rcpcri1)ile in ciascun eseniplare. L’dtinio stadio inoltre b particolarnicntc icloneo per lo studio niorfologico clegli elementi fignrati, in clunnto rappresenta il ternline tlella vita Iarvale.

Gli intlivitlui esarninati crano inrleiini (la qualsiasi process0 infettivo e non avevano ancora iniziato il proccsso clella ninfosi, in moclo cia 1’0- tersi encluclcre iiiotlificazioni clella crasi cmolinfatica.

La larva estratta clal foclero, veniva imniersa in H202 a 10 vol. e subito asciugata SU carta l~ i l~ula . Si proccrieva qiiincli alla puntura clcl vaso clorsalc in corrispontlcnza (lei Ir urite, punto cli piii facile inter- vcnto. La plinlura veniva fntta in diastolc; la sistole siiccessiva espel- leva una gocciolina cli fluiclo che, posta sii 1111 vetrino portaoggetti, veni- va tlistcsa con la solita tecnica clcllo striscio. E’ intcrcssante rilevarc d i e le larve operate conipletavano il ciclo tli sviluppo fino a110 sfarfallamento.

I preparati, previo essiccaniento all’aria ( per circa 4O’), venivano colorati con il metorlo panottico cli PappciiIieim (col. fiIap.Griin\vald- Giemsa).

(+) Sono state condotte ricerclie sull’equilibrio osmotico e ionico dell’emo- Iinfr dellc larvc di Limnephilus ulfinis Curtis in soluzioni saline (23).

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- 1363 - I tempi ottimali dei coloranti usati in una prima serie di prove (I),

erano di 5’ per la fissazione e di. 3’ per la colorazione ( May-Griinwalcl) ; per il Giemsa, diluito in ragione cli XX gocce in 15 em3, erano neccssari GO’.

I n una seconda serie di prove (2), i tempi cli colorazione venivano ridotti a 3’ per la fissazione con May-Gninwalcl, a 1’ per la colorazione e a 12’-15’ per i l Giemsa diluito in ragione di X gocce in 10 cm3.

Si 6 fatto ricorso altresi, alla tecnica della goccia pcnclcnte, sia senza colorazione osservando le cellule nl microscopio a contrast0 di Ease, sia con l’ausilio di coloranti vitali ( BIu rli metilene, Rosso Congo, Vcrde Janus), clie ci lianno consentito di rilcvarc sottili strutture cel- lulari.

RJSULTATI.

Gli elernenti figurati clel fluido circolantc, riconosciLili nci prcpa- rati, presentano il citoplasnia colorato in azzurro e i l nucleo in russo, con cvidenti granuli di cromatina regolarniente disposti. La Itiiiggior parte rlegli elenicnti cellulari lianno citoplasma vacuolizzato.

I n particolare riteniamo di poter descriscre i scgucnti tipi (ti cellule :

Proleiicociti - Cellule rotondeggianti con scarso alone citoplasma- tic0 intensamente cromofilo, tanto da renclcrc, alcune volte, poco cliffe- renziato lo stesso nucleo, clie pi16 presentarsi dccentrato.

(Tav. I, 1, 2 ; Tav. 11, fig. 6, Pr). RIisura media = p 10,75 (3). Rinvenuti in ragione clel G 9’0.

Eoplasrnatociti - Di forma ovoidale, citoplasma a volte vacuoliz- zato. Nucleo piii o nieno rotondeggiante ora cccentrico, ora ccntrale.

(Tas. I, 3, 4 ; Tov. 11, fig. 5 , Eo). Misura media = p 12,23. Rinsenuti in ragione del 7,l 9’0.

(1) Eooin metliilenblaul6sung; Azur eosin - Chroma-Gesellscllaft Sclimid S; Co Stuttgart. Si indicano i nomi dene Ditte produttriei, per mettere in rilievo IC

clifferenti rese, second0 i tempi e le concentmzioni. (2) Coloranti rlella E. Merck AG. Darmastadt. (3) Le misure max. e min. dei S dclle cellule e dei nuclei sono riportrti

nella Tnbella.

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- 1364 -

Microplasmatociti - Celliile cli forma ovoidale, clotate cli scarso citoplasma in generale finenientc sacuolizzato. I1 nuclco i! generalnientc ovoiclale.

(Tav. I, 5). Alisum meclia = p 10,70. Rinvenuti in ragione clc11'1,4 YO. Rapporlo nucleoplasmatico 0,58 (1).

Afesoplnsmafocifi - Di forina ovalnre. Citoplasnia albontlante a

sohe mpprcscnlato da ponli clelimitanti grossi vacuoli. Niiclei grossola- namente ovalari, spcsso clecentrati.

(Tav. I, 6, 7, 8; Tav. 11, fig. 2, 4, ills). Blisiira meclia = p 15,89. Rinveniiti in ragione clel 16,s) 9'0. Rapporto niicleoplasmatico 0,28.

Illacroplosnzatocifi - Celliile voluniinosc cli forma nettamcnte ovoiclale, con abbondantc citoplnsma, ricco tli vacuoli piccoli e grilntli. Niicleo centrale cli forma ovale.

(Tav. I, 9; Tav. 11, fig. 3, dfc). Alisnra media = p 21,93. Rinveniiti in ragione clel 2,7 %. Rapporto niicleopla-.matico 0,17.

Cellirle poligonali - Celliile cli forma poligonalc. I1 citoplasnla i: costituito (la niimerose trabecole c h intersecantlosi fra Ioro formano numerosi erl ampi vaeuoli. NTucleo rotonclo, centrale.

(Tav. I, 10; Tav. 11, fig. 5. C p ) . AIisura media = p 15,49. Rinveniitc in ragiorie clcl1'1,2 O/n.

Plasiiiatociti nionopolori pirilormi - Sono ccllule piir o meno allungate in corrisponclenza cli un polo. I1 citoplasma & ora scarso, ora piii al)l)onciante, con vaeuoli preeenti in talune forme. Niiclci o roton- cleggianti o marcatamente ovoiclali.

(Tav. I, 11, 12, 13, 1 4 ; Tav. 11, fig. 2, 5, Pni) . BIisura iiicdia = p 14,23. Rinvcniiti in ragione cleI 1.3.J YO.

(1) Si i prefcrito ealrolare iI rapporto nucleoplasmatico secoiitlo le .ciiper- fici anzirhb seeondo i volumi, trattandosi cli strisei e non cli sczioni.

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Plnsniatociti bipoluri /rcsi/oraii - Cellulc alltingate ai clue poli con citoplasnia vacnolizzato piii o iiienn alhontlante. Niicleo oralare.

(Tar. I, 15, 16; Tar . 11, fig. 3, 6, PI)). BIisiira nieclia = p 17,85. Rinrenute in raginne tlel 6,4 Yo.

A'einatocitoicIe - Cellula cli fornia iiiolto alliingata coil citoplasnia Bcarso, filifornie e vaciiolizznto. Niiclco ol)liiiigo.

(Tav. I, 17 ; Tar. 11, fig. 4, A'iii).

AIieura nictlia clian:ctro inassirno = p G2,13. Alinnra nietlia clianietro iiiininio = p. 5,8G. Hinveniiti in ragionc tlello O,1 O/o.

Plrismutociti rumilicuti - Cclliile poliniorfe piii o iiieno ramifi-

(Tar. I, 18, 19, SO). X s i i r a nicclia = p 24,30. Rinvenuti in ragione dcI 3,'5 Yo.

cntc con grossi vnciioli citoplasniatici. Xuclco rotonrleggiante.

Cellale cfi transidone - CeIIiile pnliniorfe con coiitorni rotondeg- gianti. 11 citoplasma i! spcssn vaciiolizzato. I1 nucleo piib a~siiiiiere clivcrsc posizioiii nella celliila.

(Tar. I, 21, 22, 23; Tav. 11, fig. 6, Ct) . Misiira iiietlia = p 14,93. Rinvenriti in ragione clel S18 Yo.

CeZluie bincicZeate - Hanno fornia variahile~ con citoplaenia vaciio- lizzato. I cliie iiiiclei si preeentano rotonclegginnti, e cli granclezza qiiaei iiguale. Sono state viste anclie cellule polinucleate, ma essenclo iiiolto searse t l i niiiiiero non sono state calcolate.

(Tav. I, 24). Misura nieclia = p 18,iO. I h v e n u t e in ragioiic tlel 3 , l %.

Cellule degenerative ( irtcertae sedis) - Celliile poliinorfe con cito- plasma piii o ineno abboiiclante c vacuolizzato. Nncleo rotondo a voltc ovalare.

(Tar. I, 25, 2 G ; Tav. 11, fig. 4, 5 , 6 , Ccl). AIisura media = p 14,39. Rinrenute in ragione clcl 21,7 %.

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- 1366 -

TABELLA T

Tipi e climcnsioni dci principali clcmcnti figorati clell’cmolinfa di Limnephilris rhombicris L. (Iarre ultimo statlio).

Celluie I l’roleucocita

Jlicroplasmatocits Alesoplnsmatocita

* ,,

l lI~croplasmatocit i Cell. poligoiiale Plasm. monopolare

1,

7

9

Plasm. bipolare

Nematocitoide I’lasnr. raniificato

1,

.. .. Cell. traneizione

, t

Cell. binucleata Cell. degeiierntira

Regmatocitoide

Enocitoide Nucleo

>>

n

-

rav. I

-

1 2 3 4 5 6 7 8 9

10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

‘adniax

--

11,39 11,20 14,40 13,80 11,60 16,99 20,32 20,80 32.40 16,99 19,20 11,79 19,55 26.80 17,12 36,20 62.13 17,05 23,79 18.40 16,60 17,20 23.00 23.80 23,20 14,93 28,16 26,65 38,40 -

10.19 10,21 10,72 10,oo 9,80

10,72 11,36 15,20 l l , J7 14,OG 11,oo 9,30 9-95 9,04

10.40 7,68 5,86 7,60 7,79

11.20 14,20 10.40 8,20

13.60 12.00 7,45

21,76 14.40 27,20 -

N*dmax

10, l l 8,48

11.68 9.60 8,40 8,60 9,20

10,40 8,19 8,OO 6,40 8,35 9.60 7,52 8,16 8,27 7,20 7,68 6.40 7,87

8,OO 9,OO 9,60 9,33

11 20 LO:93 I5,ZO

10.4 0

7,79

10.20

N.dmiu

8,64 8,16 8,80

7,87 7,20 7,20 8,OO 7,60 8.19 7,04 6.40 7,30 6.24 7,28 6.72 5.6 6,99 T,OO 6.00 7.47 7.65 7.20 9,no 8,80 6.92

10.08 10,66 13,44 9,07

9,oo

Percen

CAI. max = Media diamctri massimi delle cellule. C.d. min = fi1cdia diametri minimi dcllc cellule. N.d. max = hleclia diametri massimi dei nuclei. N.d. min = AIcdia diamctri minimi dei nurlci. Percent. = Pcrcentuali. Tat-. I = Numero progressivo relativo alle cellole clisegnate nclla Tavola 1.

Regniatocitoicli - IIanno contorni celliilari inclefiniti e citoplasnia

(Tav. I, 27, 28; Tab-. 11, fig. 3, Rg). AIisura media = 22,47. Rjnvenuti in ragione clel 6,O Yo.

in fase di disfacimento. I1 nucleo i lien visihile e rotontleggiante.

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Enocitoidi - Grancli cellule con citoplasma fortemente cromofilo. I1 nucleo generalniente & rotondeggiante, pi16 essere con cromatina in solle clistanziate.

(Tav. I, 29; Tav. 11, fig. 1, E). AIiwra media = p 32,80. Rinvenuti in ragione de11’1,8 Yo.

A’ciclei - Hanno contorno citoplasniatico in fase cli clisfacimento. (Tav. I, 30). Misum media = p 9,95. Rinvenuti in ragione dcl A€, .€ O/o.

Concluclentlo quintli, I’cniolinfe tlcllc larvc tli Lintnephiliis rhoni- bictrs L. prescnta tutta line serie tli elementi figurnti la cui nomencla- tura B presa in partc tlagli AA. c in parte, proposta (la noi.

Nella Tavola I Ic ccllule sono state raggruppate sulla scorta di un ipotctico process0 evoltitiro la cui valicliti clev’esser controllata attra- verso una congrua indagine hasata suIIa cultlira i n v i m (30, 31). E’ possibile clie si sia eccecluto nell’eIencazionc clclle forme, poicli8, coine si pi16 notare clalla stessa tavola,’it palese la possibiliti di un iilteriore raggrirppainento in categorie imprenta te tra loro. A cib si agginnga I’effetto clcll’artefatto doruto aMo etriscio, alla fiosazione, alla colora- zione e a1 fenomeno clella a laccatura a ; benclii? tutti gli elementi figu- rati cliscgnati nella Tavola I, siano stati riconosciuti con quasi iclentico aspctto attraverso l’esame in goccia penclentc eon il \7erclc Janm.

Con cpesta prima nota ci si Iimita a proporre una serie oricntativa cli elementi figurati clell’emoIinfa cli iin Limnofilide, siilla q i d e potri csserc elaliorata un’ulteriore classificazione.

R I A 5 S U K T 0

L‘A. ha conclotto rirerrhe dl’emolinfa t l i larvc tli ultimo stailio c l i Limne- pliilus rhonrbicus L. Sono stati rinvcnuti tlivcrsi tipi cli ccllulc sullc qtiali si sono cscguiti rontcggi pcrccntuali e misnrazioni.

S U M M A R Y

The A. have inquire into Iicmolympl~ of larvcs of last stagc of Linrnephilcrr rAom6icus L. Several types of cells, are discovered, wiclr arc measured and counted per cent.

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DISCUSSIOXE

SACCIII - Cliiccle se I'alto Yo cli plasniatoeiti tlrgrnerativi n ( in tutalc il 20% circa) s i r in relazionc con un particolare staclio fiinzionale tlella larva.

LA C.\YA TICISTAISO - L'alta pcrcentiiale dclle celliile clcgenerativr, tion & in relazione con iino stoclio fiinzionale in quantn l e larve sccltc crano lontanc clalls ninfosi ecl iiiclenni rla forinc morbose in atto. Xnlla rappirmo aticora dcgli stadi preceded .

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SPIEGAZIOXE DELLE TAVOLE

TAVOLA I

Quadro degli emoeiti d i Limnephilus rhombicus L. Le colonnine nere in- dicano le pereentuali. Le cellule sono state dipinte senza rispettare i reali rap. porti di grandezza. Le misure in micron indicano i valori verticali ( 5 ) e oriz- zontali ( M), massimi (prima eifra) c mininii (seeondil cifra). A destrr sono ripor- tati i nomi tlegli emociti eon i relativi numeri delle figure eui essi si riferiscono.

TAVOLA I1

Fig. 1. - Emociti clelle larve di L. rhombicus. E = Enocitoidi. Colorazione panottica di Pappenlieim (~Ia)--Griinwaltl-Giemsa), 300 i( .

Fig. 2. - Emoeiti clelle larve di L. rhombicus. Pm = Plasmatocita monopolare piriformc. &Is = Mesoplasmatocita. 600 X .

TAVOLA I11

Fig. 3. - Emociti tlelle larve cli L. rhombicus. hlc = hlacroplasniatocitn. 1% = Plasmatocita liipolare. Rg = Regmatoeitoicle. = 1.300 x .

Fog. 4. - Emociti tIellc larve cli L. rhombicus. hls = Mrsoplasrnatociti. Nm = Kematocitoicle. Ctl = Cellula degenerativa. 1.300 X .

TAVOLA I\’

Fig. 5. - Emociti delle larve tli L. rhombibrts. Cp = Cellula poligonale. Eo = Eoplasmatorita. Pm = Plasmatocita monopolare piriforme. Ctl = Cel- lule degenerative. 1.300 X .

Fig. 6. - Emociti delle larve cl i L. rhombicus. Pr = Proleucocita. Ct := Cel- lula d i transizione. Cd = Cellule degenerative. Pb = Plasmatoeita hipolare. 1.300 X .

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UOLLETTIXO DI Zoor.oc~a - Vol. SSXI , fasc. 11 (1964). Tar. 11.

LA CAVA M. T. - Gli elernenti (igurati nell'ernolinla delle larve ecc.

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BOLLETTINO DI ZOOLOCIA - Vol. XXXI, fasc. I1 (1964). TAV. 111.

LA CAVA M. T. - Gli elernenti figurati oell'ernolinfa delle larve ecc.

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BOLLETTINO DI ZOOLOCIA - Vol. XXXI, fclsc. I1 (1964). T A v . 1V.

LA CAVA M. T. - Gli elementi figurati nell'emolinfa delle larve ecc.

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