VALUTAZIONE DEI PRODOTTI BIOCIDI:

CRITICITA' E NOVITA' LEGISLATIVE

Roberto Romi

& Luciano Toma

Istituto Superiore di Sanità

Dipartimento M.I.P.I.

Reparto Malattie Trasmesse

da Vettori

e Sanità internazionale

ESEMPI PRELIMINARI DI PROTOCOLLI DA STANDARDIZZARE

PER L’ESECUZIONE DEI SAGGI D’EFFICACIA DI PREPARATI

BIOCIDI

16-12-2011

… LOST

IN THE

JUNGLE…

Rispetto a 11 mesi fa

abbiamo fatto molti

passi in avanti…

se allora ci sentivamo come persi nella giungla

”...oggi abbiamo poche idee…

…..ma confuse!”

Ennio Flaiano (1910-1972)

LIMITI E POSSIBILITA’ DI MIGLIORAMENTO

•Mancano buona parte dei test di campo per gli adulticidi

•Vengono riportati protocolli WHO che però andrebbero adattati alle realtà europee

•I test indicati per PULCI e CIMICI DEI LETTI non sono facilmente realizzabili in Europa

•Repliche dei test e numeri degli insetti utilizzati non sono sempre coerenti con quanto riportato in letteratura

•I test relativi agli IGR sulle blatte presentano difficoltà oggettive di realizzazione

•Anche I test relativi agli IGR di campo per zanzare e mosche sembrano difficilmente ralizzabili

•Alcuni metodi sono desueti (Peet grady)

•Problema dei test di invecchiamento

Cosa abbiamo fatto e a che punto siamo

Presso l’ISS si sta cercando di realizzare linee guida

per la standardizzazione di test di efficacia per i

prodotti biocidi in Italia e in Europa

Attraverso:

lo scambio di esperienze e l’interazione con realtà già

impegnate nella realizzazione di test di efficacia

(Entostudio);

l’interlocuzione con alcune Aziende per capire le

difficoltà di chi deve realizzare i test per il dossier;

la realizzazione volontaria di incontri, brainstorming e

giornate di studio

Problemi emergenti

soglia di efficacia e soglia ambientale;

test di semicampo/campo per insetticidi liquidi su Blatta

orientalis in fogna con termo nebbiogeno;

nuovi test di campo e semicampo per adulticidi su

fogliame contro la zanzara tigre;

problematica fondamentale di come testare gli articoli

trattati con insetticidi nelle condizioni d’uso per cui vengono

proposti.

problema dei Repellenti: sono PT19 ma spesso

contengono anche p.a. biocidi: quali test richiedere?

Ma quali devono essere le caratteristiche di un

formulato biocida per uso in campo civile?

Sono prodotti commerciali insetticidi-acaricidi il cui

principio attivo è stato già incluso nell’allegato 1 della

direttiva GRUPPO 3: Controllo degli animali nocivi (pt 18 e 19)

Cosa distingue un potenziale “CIDA” di

comune impiego da una molecola speciifca ??

1) L’entità della dose minima attiva

sull’organismo bersaglio nei test di

laboratorio e/o di semicampo

2) I livelli di efficacia nelle prove di

campo

Da stabilire per ogni gruppo di prodotti

VALUTAZIONE DEI PARAMETRI DI

EFFICACIA IN LABORATORIO

DOSE LETALE 50/90 (DL)

ESPOSIZIONE AD ALMENO 4 CONCENTRAZIONI DIVERSE

PER TEMPI UGUALI CHE DIANO ALTRETTANTI PUNTI DI

MORTALITA’ VARIABILE TRA 0 E 100% ESCLUSI

TEMPO LETALE 50/90 (TL) ESPOSIZIONE PER ALMENO 4 INTERVALLI DI TEMPO AD

UNUNICA CONCENTRAZIONE CHE DIA ALTRETTANTI PUNTI

DI MORTALITA’ VARIABILE TRA 0 E 100% ESCLUSI

TEMPO DI KNOCK DOWN 50/90 (KD) ESPOSIZIONE PER ALMENO 4 INTERVALLI DI TEMPO AD

UNUNICA CONCENTRAZIONE CHE DIA ALTRETTANTI PUNTI

DI ABBATTIMENTO CHE RISULTINO IN UNA MORTALITA’

VARIABILE TRA 0 E 100% ESCLUSI, A 24 H

CALCOLAI

VANNO CALCOLATI STATISTICAMENTE DATI SPERIMENTALI

p.a e tipo di formulato ORGANISMO e tipo di test

Zanzare

Aedes e Ochlerotatus

Culex Anopheles

IGR

Diflubenzuron

s-metohprene

piryproxifen

Liquidi

Semicampo

e campo

(urbano e rurale)

Laboratorio Semicampo

e campo (urbano e rurale)

Labo e

campo:

( Risaia?)

Solidi

Bti h14

BS 2353

Liquidi

solidi

Altri

(etofenprox)

liquido

Zanzare: test specifici per genere o specie

FORMULATI

USO

PRODOTTI BIOLOGICI

IGR (e assimilati)

ALTRE MOLECOLE

LARVICIDI

USO

DOMESTICO

Per entrambi SAGGIO DI

LABORATORIO WHO

SOLO PER FORMULATI

LIQUIDI, IN PARALLELO

CON LO STANDARD

(VECTOBAC WG?)

Soglia di efficacia DL95<

PER TUTTI I FORMULATI

TEST SEMICAMPO E

CAMPO1 (tombini)

Per entrambi

PER TUTTI I

FORMULATI

TEST

SEMICAMPO

Soglia di

efficacia

EL95<

E DI CAMPO1

(tombini),

soglia di

accettabilità

riduzione

densità >60%

Per entrambi SAGGIO DI

LABORATORIO WHO

SOLO PER

FORMULATI LIQUIDI

Soglia di efficacia DL95<

PER TUTTI I

FORMULATI TEST

SEMICAMPO E

CAMPO1 (tombini),

USO

PROFESSIONALE

SAGGI CAMPO 2 E 3

(risaia e fossi) soglia di

accettabilità % di

riduzione > 80%

TESt CAMPO 2 E 3

(risaia e fossi)

Soglia di efficacia

DL95<

Canale: 5 pescate in 5 stazioni ogni 20m sui 100m di trattamento

Risaia: 5 pescate in 10 stazioni ogni 20m sui 200m del lato trattato

ZANZARE 2

ADULTICIDI

USO DOMESTICO

E

PROFESIONALE

SOLO

DOMESTICO

1) SAGGIO DI LABORATORIO STANDARD

WHO TRAMITE CONTATTO FORZATO

PER valutare l’efficacia dei FORMULATI

SPRAY (DL50/90 eTL 50/90) 2) SAGGI IN STANZA DI 30 m3 per l’efficacia

abbattente (domestico), dimensioni maggiori

(professionale)

PER ELETTROEMANATORI SAGGIO IN

CAMERA DA 30m3 (semicampo) SENZA

FINESTRA E SAGGIO CON DOPPIA STANZA

CON FINESTRA APERTA

SOLO

PER USO

PROFESSIONALE

SAGGIO DI LABORATORIO STANDARD WHO

TRAMITE CONTATTO FORZATO

AMBIENTE ESTERNO. Prove di campo.

Valutazione dell’efficacia abbattente e residuale

su muro e vegetazione

ADULTICIDI

USO

PROFESSIONALE

(piretroidi o altre eventuali molecole di sintesi)

SAGGIO DI LABORATORIO STANDARD WHO TRAMITE

CONTATTO FORZATO

AMBIENTE ESTERNO

1) SPACE SPRAYING -ABBATTENTI

Prove di campo.

-due aree di studio uguali di cui una non viene trattata;

-monitoraggio pre e post trattamento (trappole a CO22 e su

uomo);trattamento con atomizzatore (volume basso o termo

nebbiogeno); stima delle variazioni di densità tra pre post

trattamento a 24h: il test viene considerato valido in presenza di

una diminuzione della densità > 80% rispetto all’area non

trattata.

-2)Valutazione dell’efficacia su muro e stima dell’attività residua

contatto forzato su muro per intervalli di tempo crescenti (24 e

48h poi ogni settimana) fino a sopravvivenza > 20%.

3) VERDE. Prova mista campo / semicampo

-Campo. Scelta delle aree da trattare con monitoraggio pre e post

trattamento e valutazione come punto uno; L’azione residuale del

prodotto depositato sulle piante viene valutata portando in

laboratorio campioni del fogliame trattato su cui applicare i coni

con stessa frequenza considerata per le prove su muro.

-Semicampo. Piante in vaso dello stesso tipo vengono trattate con

le stesse modalità e poi poste al riparo dalla pioggia (ma sempre

all’aperto), per valutare l’effetto dal dilavamento sull’efficacia

residua del prodotto.

Zanzare 3

ECHE ALIMENTARI

PER BLATTE E FORMICHE

(OECD)

Arrivare all’eliminazione dei p.a ad

azione residua, privilegiando Prodotti in gel o esche alimentari

SONO STATI STANDRDIZZATI DUE

“ARENA TEST”

PROVE DI SEMICAMPO IN AMBIENTI

RICOSTRUITI IN LABORATORIO

insetti

ineti

INSETTI STRISCIANTI FORMULATI LIQUIDI O SPRAY

SI RICORRE AL VECHIO TEST DI CONTATTO FORZATO SU

MATTONELLE CON SUPERFICI DIVERSAMENTE ASSORBENTI

FORMULATI

SPECIE TEST DI CAMPO (solo P. Americana)

INSETTICIDI

LIQUIDI

Blatta orientalis

o Periplaneta amricama

In fognature, fosse biologiche o ambienti comunque infestati

(non ambienti domestici, ristorazioni o commerciali).

3 repliche in luoghi diversi o nello stesso luogo se è possibile creare sottoinsiemi indipendenti + controllo

In fognature, biologiche o ambienti comunque infestati (non ambienti domestici, ristorazioni o commerciali). Monitoraggio pre e post trattamento con trappole adesive (stessa trappola e attrattivo). A 24 h collocazione trappole e lettura dopo 24 e 48h.

Ripetizione rilievi a distanze di una settimana. Il numero di settimane dipende dal claim, in ogni caso non meno di 3 per definirsi residuale.

Blatte: prove di campo e semicampo

Per le blatte di piccola taglia (blattella e supella) si

ricorre ad una prova di semicampo in stanza da

almeno 10-20 m2, con ripari, fonti di cibo, areee

trattate e non. Da standardizzare

FORMULATI SPECIE

USO

TEST DI LABORATORIO

Elettroemanatori, candele, zampironi,

statici, spray ad azione

insetticida abbattente

Zanzare

Aedes albopictus,

Culex pipiens

DOMESTICO

3 gabbie (sub repliche) in stanza di 30 m3, posizionate ad altezze diverse e in diversi punti della stanza + 1 controllo; l’applicazione del prodotto avviene senza spruzzare direttamente le gabbie e in modo omogeneo nella stanza

3 repliche, 10 insetti x gabbia: totale di 9 gabbie e 90 insetti

Valutazione abbattimento ogni 5 minuti per al massimo 30 minuti. Le zanzare abbattute alla fine dei 30 minuti vengono ricoverate

Mortalità a 24 ore = 100%

Repellenti/insetticidi ambientali

FORMULATI SPECIE

TEST DI CAMPO

OUTDOOR

ELETTRO- -EMANATORI, ZAMPIRONI

CANDELE ET SIMILIA

Aedes albopictus

E ALTRE SPECIE MOLTO

AGGRESIVE

In un ambiente simile a quelli normalmente trattati si posizionano n° 5 gabbie (=repliche)

con 10 zanzare cad. L’applicazione avviene in modo omogeneo nell’ambiente indipendentemente dalla presenza delle gabbie; contemporaneamente, in area protetta (sufficientemente distante) si lasciano 3 gabbie come controllo

3 repliche, 10 zanzare x 5 gabbie ogni prova

Valutazione abbattimento a mezz’ora e a 30 minuti e mortalità a 24 ore. Mortalità a 24 ore = o >80%

Valutazione abbattimento a mezz’ora e a 60 minuti e mortalità a 24 ore.

Vi prendono parte membri dell’ISS (MIPI e CSNC), del’industria

ACTIVA, GUABER, INDIA,dell’Università di Padova (AGRARIA) e

soprattutto dei servizi terziari ENTOSTUDIO

Ma l’attività è lunga e difficile e necessità di una propria autonomia

gestionale ed economica, di supporto logistico e finanziario che

permetta al gruppo una maggiore autonomia

In conclusione credo che meriti e vada trasformata in un progetto specifico con,”in primis”, il riconoscimento da parte del Ministero della salute

Questa attività è nata e va avanti su base esclusivamente

volontaria, come iniziativa individuale di pochi, sebbene

col pieno appoggio del CNSC del’ISS, e che giunta ad un

certo livello deve fare un salto di qualità se vuole ottenere

risultati concreti

Da “Stagecoach” di John Ford, 1939

Grazie dell’ascolto

R.R.

Un sentito ringraziamento allo sparuto ma agguerrito gruppo di volontari

che partecipa a questa iniziativa:

Simone Martini e Andrea Drago – ENTOSTUDIO; Marzio Boldrini - GUABER;

Alberto Baseggio – INDIA; Paolo Manella -ACTIVA; Luca Mazzon -

UNIPADOVA; Luciano Toma, Francesco Severini, - ISS MIPI; Maristella

Rubbiani, Laura Fornarelli, Susanna Bascherini - ISS CNSC

…ma insomma, quando arriva la cavalleria ?