Emoderivati

• soluzione di albumina umana• conc. di fVIII / fIX• conc. di complesso protrombinico (CCP)– fII + fIX + fX (+fVII)

• conc. di fattori della coagulazione attivati – trattamento emofilici con presenza di inibitore del

fVIII• IgG per uso ev• Ig anti-D per la profilassi della MEN• fibrinogeno umano • fVII

Trattamento delle malattie emorragiche congenite

• I diversi concentrati dei fattori della coagulazione si distinguono in:– A/C) prodotti da plasma fresco– D1) concentrati plasma derivati– D2) prodotti da tecniche di

ricombinazione genetica

A) Prodotti da plasma fresco

• A) Plasma fresco congelato– la dose standard (200 ml) contiene:• da 70 a 90 U/dl di fVIII, fIX, vWF e fV

• C) Crioprecipitato– la dose standard (20 ml) contiene: • 80 U di fVIII e vWF, circa 200 mg di

fibrinogeno e quantità significative di fXIII

D1) Concentrati plasma derivati di fVIII

• Il fVIII … viene separato da pool di plasma umano per crioprecipitazione … quindi con tecniche …– di adsorbimento – precipitazione ► prodotto di

purezza intermedia … virus safe (pastorizzato) • HAEMATE P ® (ricco in vWF x 2,54 rispetto al

fVIII) – Aventis – Behring: 500U (391€) / 1000U (768€)

– cromatografiche a scambio ionico ► prodotto altamente purificato … virus safe (solvente – detergente)• EMOCLOT D.I. ® (vWF x 1,16 rispetto al fVIII)

– Kedrion: 500U (392€) / 1000U (771€)– cromatografiche per immunoaffinità (ac

monoclonali) ► altamente purificato … virus safe (solvente – detergente)• HEMOFIL M ® (no vWF) … non più in

commercio!! – Baxter: 500U (391€) / 1000U (770€)

D2) prodotti da ricombinazione genetica di fVIII

• Sono i migliori prodotti da impiegare!!– RECOMBINATE ® il gene del fVIII viene inserito

in linee cellulari stabilizzate di ovaio di criceto (no vWF) … ormai fuori produzione!!• Baxter: 250U (276€) / 500U (552€) /1000U

(1105€)– ADVATE ® idem, ma non necessita di colture a

base di albumina o altro di origine umana • Baxter: 250U (309€) / 500U (618€) / 1000U

(1237€) / 1500U (1856€)

D1) Concentrati plasma derivati di fIX

• Il fIX … viene separato da pool di plasma umano per crioprecipitazione … quindi con tecniche …– cromatografiche ► prodotto purificato … virus safe

(solvente – detergente)• AIMAFIX ®

– Kedrion: 500U (326€) / 1000U (676€)

D2) prodotti da ricombinazione genetica di fIX

• Sono i migliori prodotti da impiegare!!

– BENEFIX ® il gene del fIX viene inserito in linee cellulari stabilizzate di ovaio di criceto in assenza di albumina o altro di origine umana • Genetics Institute B.V.: 250U (284€) / 500U

(568€) / 1000U (1137€)

Piastrine (Plt)

• Si ottengono da: plasma ricco, buffy coat e aferesi

• Contaminazione del prodotto: soprattutto leucociti

• Conservazione a 22°C per max 5gg • Turn over: esiste un pool splenico = 1/3 della

massa Plt totale, in equilibrio dinamico con le Plt circolanti

• Emivita da 8 a 12 gg / • Caratteristiche generali della cellula: vita

breve e antigeni di membrana che non vincolano la necessità di prove di compatibilità. A meno che…

• Antigeni di membrana: la struttura trilaminare è simile alle altre cellule…

piastrina e suoi componenti

attività procoagulante piastrinica

• Viene rappresentata dalla ideale disposizione delle piastrine aggregate: nel formare una superficie ottimale per

l’assemblaggio dei vari complessi enzimatici della cascata coagulativa …

che presiedono alla formazione della trombina …

che genera fibrina … che a sua volta si organizza in tralci complessi (in un tempo variabile da 30 a 60”)

secrezione piastrinica

• Nei granuli citoplasmatici α e δ sono contenuti: fattore piastrinico 4 (PF4) β tromboglobulina trombospondina platelet derived growth factor fibrinogeno, vWF e fattore V (20%) ADP e ATP calcio e pirofosfato di calcio serotonina (agonista dell’aggregazione)

principali fattori di crescita (gfs) prodotti e secreti dalle piastrine

PDGF-AB (Platelet-Derived Growth Factor-AB)

TGF-Beta1 (Tranforming Growth Factor-Beta1)

IGF-I (Insulin-like Growth Factor I)

… Medicina Rigenerativa

PRODOTTI TRASFUSIONALI CONTENENTI PIASTRINE

1. PIASTRINE RANDOM DA PLASMA RICCO (PR) / BUFFY COAT

(BC)

2. PIASTRINE DA AFERESI

3. GEL PIASTRINICO

1. PIASTRINE RANDOM DA PLASMA RICCO (PR) / BUFFY COAT (BC)

2. PIASTRINE DA AFERESI

Conservazione a 22°C per max 5gg Emivita da 7 a 10 gg

Contaminazione del prodotto = leucocitiPLT da PR < 200x106 (DM)

PLT da BC < 50x106 (DM)PLT da AFERESI (LastGen) < 105

Controlli di qualità sul preparato:

Swirling … presenza di piastrine libere

Conta … DM 3 marzo 2005

pH … compreso tra 7,4 e 6,4

Sterilità … controllo contaminazione batterica

TRASFUSIONE PIASTRINICA (emocomponente indicato)

1) POOL DI PIASTRINE DA PR o BC:

contenuto medio = 3x1011 (DM > 2,5x1011) vengono sospese in plasma o in soluzione additiva

possono provocare reazioni allergiche da plasma

vanno impiegate in pazienti per cui non è previsto un trattamento prolungato nel tempo,

nei pazienti chirurgici e nelle emergenze

TRASFUSIONE PIASTRINICA (emocomponente indicato)

2) ConcPLT da PIASTRINOAFERESI:

contenuto medio >3,5x1011 (DM >3,0x1011) vengono leucodepleti (GB<105) prestorage

vanno sospesi in plasma o soluzione additivapossono causare reazioni allergiche da plasma

sono indicati nei pazienti politrasfusi o candidati a trasfusioni multiple (TMO e onco-ematologici) e nei

pazienti refrattari (PLT da donatore HLA compatibile)

3) GEL PIASTRINICO o PRP (plasma ricco di piastrine) emocomponente ad uso

topico

In relazione all’impiego può essere:

AUTOLOGO

OMOLOGO potenziale rischio infettivo in un prodotto

non salvavita (previsti gli esami di validazione biologica e l’applicazione delle tecniche di

riduzione dei patogeni)

Razionale

per accelerare la rigenerazione dei tessuti e la riparazione delle lesioni …

gli α granuli delle piastrine contengono numerosi fattori di crescita

… che stimolano la crescita di:fibroblasti, cheratinociti, melanociti, condrociti, osteociti, osteoclasti, cell. mesenchimali e endoteliali, periciti, cell. secretrici di collagene e molecole stromali

Applicazioni

prime applicazioni cliniche in campo odontostomatologico,

quindi in dermatologia, ortopedia e maxillo facciale …

ormai si dispone di prodotti in grado di coniugare le proprietà del gel piastrinico e della colla di fibrina, che possono essere

somministrati contemporaneamente in modo uniforme, insieme a farmaci (antibiotici) e/o cellule autologhe in coltura (fibroblasti) o

frammenti di osso

… in praticaImplantologia e protesica dentale e ossea

Cardiochirurgia (rimodellamento muscolare e s.mediastinica)Ulcere cutanee (vascolari e da decubito)

PseudoartrosiChirurgia plastica ed estetica

Traumatologia sportivaNeuroendocrinochirurgia

Grazie dell’invito,

Gianluca Lodi