Ed. EGI clinica gastrointestinale · Anticorpi IgA/IgG anti-gliadina (AGA) EIA, ELISA ... 60 min...
16
1 UNIGASTRO Ed. EGI www.unigastro.it 2 Il laboratorio nella pratica clinica gastrointestinale 3 4 Il ruolo storico della Secretina Scoperta da Bayliss e Starling all’inizio del 1900, fu il primo “ormone” ad essere descritto scaricato da www.sunhope.it
Transcript of Ed. EGI clinica gastrointestinale · Anticorpi IgA/IgG anti-gliadina (AGA) EIA, ELISA ... 60 min...
1
UNIGASTRO Ed. EGI
www.unigastro.it2
Il laboratorio nella pratica clinica gastrointestinale
34
Il ruolo storico della Secretina
Scoperta da Bayliss e Starling all’inizio del 1900, fu il primo “ormone” ad essere descritto
scaricato da www.sunhope.it
5
Tutti gli aspetti delle funzioni digestive, dalle secrezioni
all’assorbimento, dalla circolazione locale alla motilitàe al trofismo d’organo, sono apparsi connessi all’uno o
all’altro ormone.
6
7
Origine delle cellule endocrine gastrointestinali
Ghiandola endocrina diffusa (Feyrter, anni ’20)Concetto APUDSistema neuroendocrino diffuso (DNES): programmate per produrre peptidi regolatori cellule GEP
8
Cellule GEPAperteChiuse
scaricato da www.sunhope.it
9 10
Meccanismi di azione dei messageri biologici
Endocrino: azione sul target dopo trasporto per via ematicaParacrino: modulazione locale su cellule viciniori mediante diffusione negli spazi intercellulariNeurocrino: azione sul target dopo trasporto mediante fibre nervoseAutocrino: informazione intracellulare, nelle stesse cellule neuroendocrine
11
La relazione schematica
un ormone un livello ematico
un fenomeno fisiologico
non è di regola valida
12
Ormoni e trasmettitori nel sistema enterico IPeptidi gastrointestinali con funzione ormonale
InsulinaGastrinaPeptide insulinotropici glucosio dipendente (GIP)Glucagone e prodotti genici collegati (GLP-1, glicentina, oxintomodulina) Motilina Polipeptide pancreatico (PP)Peptide Tirosinico (PYY)Secretina
Peptidi gastrointestinali che possono agire come ormoni, neuroptidi o agenti paracrini
o Colecistochininao Fattore rilasciante la corticotropinao Endotelinao Neurotensinao Somatostatina
scaricato da www.sunhope.it
13
Ormoni e trasmettitori nel sistema enterico II
Peptidi gastrointestinali che agiscono principalmente come neuro trasmettitoriPeptide derivante dalla calcitoninaDinrfina e i suoi prodotti geniciEncefalina ee i suoi prodotti geniciGalaninaPeptide rilasciante Gastrina (GRP)Neuromedina UNeuropeptide YPeptide istidina isoleucina (PHI) o peptide istidina metionina (PHM)Peptide attivante l’adenilato ciclasi pituitariaSostanza P ed altre tachichinineOrmone rilasciante tirotropina (TRH)Peptide Intestinale vasoattivo
14
Trasmettittori non peptidici prodotti nel tratto gastroentericoAcetilcolinaAdenosina trifosfato (ATP)Acido gamma-amino butirrico (GABA)Istidina5-Idrossitriptamina (5-HT), serotoninaOssido nitricoNorepinefrinaProstaglandine ed altri eicosanoidi
Ormoni e trasmettitori nel sistema enterico III
Nuovi ormoni o neuro trasmettitoriAmilinaGualinina e uroguanilinaGrielinaLeptina
15
Azioni fisiologiche degli OGI
Un ormone > un livello ematico > un fenomeno fisiologico = non valido! Quale significato ha il livello ematico?
16
Dosaggio radioimmunologico (RIA)
Ab + Ag + Ag* AbAg + AbAg*
Alta specificità (isoforme)Alta sensibilità (pmol di Ag)
scaricato da www.sunhope.it
17
FAMIGLIE ORMONALI
Gli OGI si raggruppano in famiglie:Per similitudini di struttura (sequenze aminoacidiche)Perché possono legarsi agli stessi recettori (con affinità diverse)Perché esercitano azioni simili sulle funzioni GI
18
19 20
scaricato da www.sunhope.it
21
Gastrin Releasing Peptide
GRPBombesinaNeuromedina B
22
23
STOMACO E SECREZIONE ACIDA GASTRICA
GastrinaSomatostatinaGRP
24
scaricato da www.sunhope.it
25 26
27 28
scaricato da www.sunhope.it
29 30
3132
Secrezione acida gastrica
“Quando il cibo entra nello stomaco stimola la produzione
e la secrezione di acido cloridrico per la digestione,
riducendo il pH dello stomaco da 4 a 2…..”
scaricato da www.sunhope.it
33 34
Secrezione acida gastrica
“Quando il cibo entra nello stomaco stimola la produzione e la secrezione di acido cloridrico per la digestione, riducendo il pH dello stomaco da 4 a 2…..”
…. Ma, quale è la concentrazione di acido necessaria a fare ciò?
35
Secrezione acida gastrica
Non è sufficiente conoscere il pH della secrezione acida gastrica, ne va determinata la concentrazione idrogenionica
36
titolazione
scaricato da www.sunhope.it
37
Come si esegue una titolazione?
38
Sondaggio gastricosi preleva il succo gastrico, tramite sondino
nasogastrico, ad intervalli di 15 min’
2 basali e 4 dopo stimolo, per es. con pentagastrina Determinazione del volumeDeterminazione del pHTitolazione dei campioni = determinazione concentrazione idrogenionica (mmol/l)Calcolo dei parametri di valutazione (BAO, MAO, PAO)(mmol/h)
39
Sondaggio gastrico
0
5
10
15
20
25
30
35
-30' -15' 15' 30' 45' 60'
output
A BC D E F
BAO=A+B MAO=D+E PAO=D+F40
Malattia da reflusso gastroesofageo (MRGE)
Esofago-gastro-duodenoscopia (EGDS)Rx esofagogramma (pasto baritato)Manometria esofagea (posizionamento SEI)pHmetria delle 24 ore (gold standard)Tempi di svuotamento gastrico (radionuclidi)
scaricato da www.sunhope.it
41
Reflusso gastroesofageo
42
Reflusso gastroesofageo
43
Il piccolo intestino
DuodenoDigiunoIleo
Digestione e assorbimento
44
La Malattia CeliacaTEST DIAGNOSTICIMARKERS SIEROLOGICI METODO
ANALITICOAnticorpi IgA/IgG anti-gliadina (AGA) EIA, ELISA
Anticorpi IgA anti-endomisio IF
Transglutaminasi tissutale (tTG) ELISA
TEST GENETICIHLA DQ2 - DQ8 Elettroforesi +
PCR
Esame istologico biopsie
scaricato da www.sunhope.it
45
Malassorbimento
Intolleranza a: lattosio, fruttosio, ecc. (breath test)Sindrome del leaky gut (associazione con altre patologie sistemiche) (permeabilitàintestinale)Malassorbimento di grassi (grassi fecali)Sovracrescita batterica (breath test)Alterazione del tempo di transito (breath test)
46
Breath test
Test basato sul dosaggio di una sostanza nell’espirato, che rappresenta il prodotto di una reazione enzimatica, avvenuta nel tubo digerente dopo ingestione di un adatto substrato.
47
Breath tests attualmente disponibili
H2 breath test
13C breath test
48
H2 breath test: razionale
Normalmente i carboidrati semplici ingeriti vengono completamente assorbiti a livello digiuno-ileale, per cui non giungono nel colon.
Se invece, per qualsiasi motivo, sfuggono all’assorbimento ileale, arrivano inalterati nel grosso intestino, dove vengono fermentati dalla flora batterica con produzione di energia, acqua e vari gas tra cui H2 , CO2 e CH4.
scaricato da www.sunhope.it
49
H2 breath test: razionale Di questi gas:
Una parte viene eliminata per via rettaleUna parte viene ulteriormente metabolizzataUna piccola parte viene assorbita e, attraverso il sangue, arriva ai polmoni dove viene eliminata per via alveolare
l’H2 breath test misura l’idrogeno assorbito dopo l’ingestione di carboidrati .
50
Tecnica
Raccolta del campione: Consiste nel far soffiare il paziente, ad intervalli prestabiliti, in un sacchetto che raccoglie l’aria espirata.
Immissione di un campione di espirato in un gas cromatografo per quantificare la concentrazione idrogenionica espressa in ppm (parti per milione)
51
Parametri valutati
Fasting: concentrazione di idrogeno alveolare (espressa in ppm) misurata prima della somministrazione della sostanza da testarePeak: massimo valore di H2 rilevatoDelta: differenza tra il peak e fasting (patologico oltre 20 ppm)Latenza: intervallo tra l’inizio del test e la comparsa del picco massimo
52
H2 breath test al Lattosio(valori di H2 nell’espiro prima e dopo un
pasto contenente 50 g di lattosio)
05
10152025303540
basale
30 min
60 min
90 min
120 min
150 min
180 min
210 min
240 min
ppm
Fasting=5; Peak=12; Delta=7; Latenza=180 min
scaricato da www.sunhope.it
53
H2 breath test al Lattosio(valori di H2 nell’espiro prima e dopo un
pasto contenente 50 g di lattosio)
05
10152025303540
basale
30 min
60 min
90 min
120 min
150 min
180 min
210 min
240 min
ppm
Fasting=10; Peak=40; Delta=30; Latenza=120 min 54
Applicazioni dell’H2 breath testIntolleranza al lattosioIntolleranza al fruttosioIntolleranza ad altri zuccheri
Diagnosi di sovraccrescita batterica nel tenueMisura del tempo di transito oro-cecale
55
H2 breath test al Lattulosio(valori di H2 nell’espiro prima e dopo un
pasto contenente 25 g di lattulosio)
05
10152025303540
basale
30 min
60 min
90 min
120 min
150 min
180 min
210 min
240 min
ppm
Fasting=10; Peak=30; Delta=20; Latenza=60 e 210 min 56
13C Breath test: razionale
Somministrazione per os di un substrato marcato con 13C.
L’emissione di 13CO e indice di una metabolizzazione di tale substrato.
Il substrato varia a seconda dello scopo dell’indagine
scaricato da www.sunhope.it
57
Applicazioni del 13C breath test
Aminopirina breath test
Acido octanoico breath test
Trigliceridi breath test
Urea breath test
58
Diagnosi di infezione gastrica da HP
L’Helicobacter pylori è in grado di difendersi dal succo gastrico sia ricoprendosi del muco-gel presente sulla superficie epiteliale, sia, grazie all’ureasi di cui dispone, in grado di catalizzare la produzione di ammoniaca e quindi di rendere meno acido il suo habitat.
5960
COLON
Test di screening: sangue occulto nelle feci
Problematiche:-provenienza del sangue
-interferenze
scaricato da www.sunhope.it
61
Malattie Infiammatorie Croniche (MICI o IBD)
il supporto del laboratorioINDAGINE FONTE VARIAZIONEVES sangue aumentoMucoproteine (orosomucoide)
siero aumento
Proteina C-reattiva (PCR)
siero Rapido aumento
Calprotectina feci Forte aumentoASCA - pANCA siero presenzaNOD2/CARD15 Sangue (DNA) mutazioneEmogasanalisi Sangue arterioso Alterazione pH,
pCO2, pO2 62
FEGATO E VIE BILIARIBILIRUBINA (indiretta >> aumento):- ittero pre-epatico da iperemolisi- aumento intramidollare produzione bilirubina- difetto di captazione- glicuronoconiugazione
BILIRUBINA (diretta >>aumento):- Colestasi- Sofferenza epatocellulare
BILIRUBINA (tutte >>aumento):- Compromissione parenchimale di tipo epatocellulare (epatopatie acute e
croniche)
BILIRUBINURIA (presenza): - Deriva daiperbilirubinemia (diretta, idrosolubile)= colestasi o sofferenza
epatocellulare
BILINE urinarie e fecali
COLALEMIA e COLALURIA (aumento): - Stasi biliare- Ittero ostruttivo extraepatico
63
FEGATO E VIE BILARI
ENZIMI:Aspartato amino transferasi (AST)Alanina amino transferasi (ALT)Fosfatasi alcalina (ALP)Gamma glutamil transferasi (γGT)Lattico deidrogenasi (LDH)5’ nucleotidasi (5’NT)Pseudo colinesterasi (p-CHE)Leucina amino peptidasi sierica (LAP)
PROTEINE PLASMATICHE:Proteine totali – Albumine – α1 e α2 globuline –β globuline – γ globuline – Protrombina (PT) – Fibrinogrno(fattore I coagulazione)
64
FEGATO E VIE BILARILIPIDI:Colesterolo
METALLI:Ferro e Rame (plasma): Ferritina e Ceruloplsmina
IMMUNOGLOBULINE:- IgG: Epatite Cronica Attiva, Cirrosi Postepatitica- IgM: Cirrosi Biliare Primitiva (CBP), Epatite Virale Acuta- IgA: Epatopatia Alcolica
ALTRE:α fetoproteina, ammoniemia
scaricato da www.sunhope.it
