DOTTORATO IN SCIENZE BIOCHIMICHE E … · -colture cellulari e trasfezione di...
-
Upload
nguyenkhue -
Category
Documents
-
view
216 -
download
0
Transcript of DOTTORATO IN SCIENZE BIOCHIMICHE E … · -colture cellulari e trasfezione di...
Bari, 25 Febbraio 2011
Capogrosso Roberta Francesca
DOTTORATO IN SCIENZE BIOCHIMICHE E
FARMACOLOGICHE
GIORNATA PUGLIESE su FARMACO E PRODOTTI per la
SALUTE II EDIZIONE
“IL FARMACO PER DIAGNOSI PRECOCI E MALATTIE RARE”
Sezione di Farmacologia
Dottorandi
Roberta CAPOGROSSOTeresa COSTANZA
Valeriana SBLENDORIOGianluca GRAMEGNAGianluigi CANNONE
Roberta CARBONARAAntonia SCARAMUZZI
Sara CALZOLAROMaria CANNONE
Sezione di Farmacologia Dipartimento Farmaco-Biologico
Facoltà di Farmacia
DOTTORATO IN SCIENZE BIOCHIMICHE E
FARMACOLOGICHE Sezione di Farmacologia
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
PRINCIPALI METODOLOGIE
-trattamenti farmacologici cronici
-modelli animalitopo mdxtopi transgeniciratto depletato di K+roditore sospeso
-gabbie metaboliche
-elettromiografia
-Misuratore della forza muscolare degli arti di roditore
-traedmill orizzontale
STUDI IN VIVO in modelli animali
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
-Microelettrodi intracellulari parametri di cavopotenziale d’azionesoglia meccanica di contrazione
-"Hille- Campbell" voltage clampcorrenti ioniche in fibre muscolari isolati
-Patch Clampcorrenti ioniche in cellule native e linee cellulari
PRINCIPALI METODOLOGIE Ex-vivo – in vitro
ELETTROFISIOLOGIA
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
-Determinazione dell’omeostasi del calcioin cellule native e linee cellulari
-Contrazione del muscolo scheletrico
-Contrazione del muscolo liscio
PRINCIPALI METODOLOGIE
CITOFLUORIMETRIA IN IMAGING
ORGANO ISOLATO
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
-Real-time PCR: espressione genica
-DNA ricombinante e mutagenesi
-colture cellulari e trasfezione di proteine
-Spettrometria in cuvette e piastre 96-pozzi
- ELISA
PRINCIPALI METODOLOGIE
BIOLOGIA MOLECOLARE E BIOCHIMICA
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
Modelli indotti e/o secondariroditore sospesoratto ipocalemicomiopatie da farmaci (statine)
Modelli animali genetici di malattie raretopo mdxtopo adrtopi transgenici
MODELLI ANIMALI E
STUDI FARMACOLOGICI PRE-CLINICI IN VIVO ED EX VIVO
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
Paziente DMD e topo mdx: stesso difetto genetico e biochimicoTotale assenza della proteina distrofina,
che conferisce stabilità meccanica alla fibra muscolare durante la contrazione
DistroficoNormale
MODELLO GENETICOTOPO MDX
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
Il topo mdx esercitato mostra i tipici i marcatori molecolari, morfologici e funzionali di danno muscolare che si osservano nei pazienti DMD
Valutazioneeffetto terapeutico
Identificazione dinuovi bersagli
Marcatori della patologia Meccanismi patogenetici
Farmaci che bersagliano eventi patologici+
Approccio multidisciplinare
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
..durante il dottorato
Valutazione dell’efficacia di trattamentifarmacologici:
saggi funzionali in vivo, in vitro, ex vivo
utilizzo di appropriati strumenti da laboratorio
Ricerca bibliografica
Valutazione critica di lavori scientifici
Seminari e congressi
EFFETTO DELL’ESERCIZIO E DI TRATTAMENTI FARMACOLOGICI SULLE PROPRIETA’ CONTRATTILI DEI MUSCOLI DI TOPO DISTROFICO MDX, MODELLO
ANIMALE DELLA DISTROFIA MUSCOLARE DI DUCHENNE: CORRELAZIONE CON GLI INDICI
FUNZIONALI, BIOCHIMICI E MORFOLOGICI DELLA PATOLOGIA PER LA VALIDAZIONE IN TEST FARMACOLOGICI PRE-CLINICI
Docente guida: Prof.ssa Annamaria De Luca
Dottoranda: Capogrosso Roberta Francesca
UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI BARI ALDO MORO
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di Farmacologia, Dip. Farmaco-Biologico
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
Studi ex vivo
Studi in vivo
Nella DISTROFIA MUSCOLARE DI DUCHENNE (DMD)
Parametri Contrattili Alterati Dalla Patologia
Efficacia di trattamenti farmacologici In Vivo su muscoli isolati di topi mdx
MDX: modello animale della DMDMDX: modello animale della DMD
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
MUSCOLO EDL
PARAMETRI CONTRATTILI ALTERATI DALLA PATOLOGIA
wt mdxwt mdx wt mdxwt mdx
wt mdxwt mdxwt mdxwt mdx
Forza di contrazione singola
Forza di contrazione tetanica
MUSCOLO DIAFRAMMA
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
SUSCETTIBILITA’ DELLE FIBRE DISTROFICHE ALLO STRETCH MECCANICO INDOTTO DA CONTRAZIONE ECCENTRICA
wt mdxwt mdx
CONTRAZIONE ECCENTRICA
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
DIFFERENZE FUNZIONALI TRA CONDIZIONE PATOLOGICA E
CONTROLLO
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
wt mdx Mdx + PTXwt mdx Mdx + PTX
Forza di contrazione singola
Forza di contrazione tetanica
J Appl Physiol 106: 1311-1324, 2009Multiple pathological events in exercised dystrophic mdx mice are targeted by pentoxifylline: outcome of a large array of in vivo and ex vivo testsRosa Burdi,1,* Jean-François Rolland,1,* Bodvael Fraysse,1 Karina Litvinova,1 Anna Cozzoli,1
Viviana Giannuzzi,1 Antonella Liantonio,1 Giulia Maria Camerino,1 Valeriana Sblendorio,1,2
Roberta Francesca Capogrosso,1 Beniamino Palmieri,2 Francesca Andreetta,3 Paolo Confalonieri,3 Leonarda De Benedictis,4 Monica Montagnani,4 and Annamaria De Luca1
wt mdx Mdx + PTXwt mdx Mdx + PTX
Effetti specifici dei farmaci sulle proprietà contrattili …
wt mdx Mdx + Resveratrolo
wt mdx Mdx + Resveratrolo
wt mdx Mdx + Resveratrolo
wt mdx Mdx + Resveratrolo
TRATTAMENTO FARMACOLOGICO CON RESVERTAROLO
nessun effetto su parametri contrattili…
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
mdxmdx
Effetto del trattamento con Resveratrolo sui livelli di anione superossido a livello muscolare e sui livelli di Creatina Chinasi
plasmatica
Dottorato in Scienze Biochimiche e Farmacologiche
Sezione di farmacologia
TRATTAMENTO FARMACOLOGICO CON RESVERTAROLO
wt mdx Mdx+ Resveratrolo