DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER2 E VALIDAZIONE METODICA SISH IN CARCINOMI

MAMMARI, OVARICI, PROSTATICI, POLMONARI E COLICI: STUDIO PRELIMINARE

MT Ramieri, R Murari, E Pica, PL AlòUOC Anatomia Patologica

ASL Frosinone

Introduzione

Gli studi sullo stato di HER2 nei carcinomi non mammari riportano dati molto variabili e ancora di scarso rilievo clinico, anche data la variabilità e la mancanza di standardizzazione

delle metodiche utilizzate

• Il nostro studio ha valutato lo stato di HER2 tramite metodica SISH su casi di neoplasie mammarie, ovariche, polmonari, prostatiche e coliche, con due finalità: – a) validazione della metodica nella UOC di Anatomia Patologica

di Frosinone – b) valutazione diagnostica della sovraespressione di HER2 in

neoplasie non mammarie, in prospettiva di studi prognostici e terapeutici

Materiali e metodi

• 50 casi di carcinomi mammari, ovarici, polmonari, prostatici e colici, 10 consecutivi per ciascun organo; dai campioni, tutti fissati in formalina per più di 6 ore e meno di 48 ed inclusi in paraffina, sono state allestite sezioni consecutive per lo studio morfologico, immunoistochimico (IHC) e per la SISH.

• Per lo studio IHC è stato utilizzato l’ anticorpo HER2 clone 4B5 (Ventana) e per lo studio SISH il KitINFORM HER2/Neu (Ventana).

Criteri di valutazione e algoritmi

• IHC Sono stati applicati i seguenti criteri: negativo per score 0 e 1+: assenza o debole, incompleta, colorazione di membrana; equivoco, score 2+: colorazione di membrana completa, debole o non uniforme, in almeno il 10% delle cellule neoplastiche; positivo, score 3+: uniforme ed intensa colorazione di membrana in più del 30% delle cellule neoplastiche.

• SISH Sono stati applicati i seguenti criteri: non amplificato con ratio HER2/Chr17 < a 1.8; equivoco con ratio HER2/Chr17 compresa tra 1.8 e 2.2; amplificato con ratio superiore a 2.2.

Mammella Polmone

EE EE

IHC: Score 0 IHC: Score 0

Mammella Polmone

SISH HER2: non amplificato SISH HER2: non amplificato

SISH Chr 17 SISH Chr 17

Prostata Colon

EE EE

IHC: Score 1 IHC: Score 1

Prostata Colon

SISH HER2: non amplificato SISH HER2: non amplificato

SISH Chr 17 SISH Chr 17

Colon Polmone

EE EE

IHC: Score 2 IHC: Score 2

Colon Polmone

SISH HER2: non amplificato SISH HER2: non amplificato

SISH Chr 17 SISH Chr 17

Mammella Ovaio

EE EE

IHC: Score 3 IHC: Score 3

Mammella Ovaio

SISH HER2: amplificato SISH HER2: amplificato

SISH Chr 17 SISH Chr 17

Risultati

SISH amplificato equivoco non amplificato

m p o pr c m p o pr c m p o pr c

IHC 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 5 6 5

1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 2 4 2 1

2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 1 0 0 2

3 4 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

m: mammella; p: polmone; o: ovaio; pr: prostata; c: colon

Conclusioni

Nel nostro studio è stata rilevata una concordanza tra immunoistochimica e SISH pari al 100% nei casi con

score 3+ e al 97,14% nei casi con score 0 e 1+

La SISH potrebbe sostituire, vista la facilità di esecuzione e la concordanza dei risultati, la FISH e la CISH

E’ inoltre auspicabile che la standardizzazione delle metodiche su ampie casistiche possa consentire di

conoscere il reale impatto prognostico e predittivo di HER2 anche in neoplasia non mammarie

Bibliografia

Dietel M et al. Comparison of automated silver enhanced in situ hybridisation (SISH) and fluorescence ISH (FISH) for the validation of HER2 gene status in breast carcinoma according to the guidelines of the American Society of Clinical Oncology and the College of American Pathologists. Virchows Arch 2007;451(1):19-25

Ménard S et al. HER2 overexpression in various tumor types, focussing on its relationship to the development of invasive breast cancer. Ann Oncol 2001; 12(Suppl.1): S15-S19

Wolff AC et al. American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists guideline recommendations for human epidermal growth factor receptor 2 testing in breast cancer. J Clin Oncol 2007;25(1):118-45