DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER-2 NEL CARCINOMA MAMMARIO. TECNICHE A CONFRONTO. RISULTATI...
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DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER-2 NEL CARCINOMA MAMMARIO. TECNICHE A CONFRONTO. RISULTATI PRELIMINARI.
D Reghellin, V Rucco, MG Zorzi, A Brighenti, M Lestani
U.O.C. di Anatomia PatologicaULSS 5 “Ovest-Vicentino”
Introduzione
• la determinazione dello stato di HER2 nel carcinoma della mammella ha un significato sia prognostico che predittivo di risposta alla terapia con Trastuzumab
• requisito indispensabile per la somministrazione di tale farmaco è la dimostrazione di un'iperespressione della proteina HER2 e/o di un’amplificazione del gene HER2
• lo stato di HER2 può essere attualmente indagato studiando:
a) la presenza di iperespressione della proteina HER2 con:
ICH (immunoistochimica)
b) la presenza di un’amplificazione del gene HER2 con:
FISH (Ibridazione In Situ Fluorescente)
CISH (Ibridazione In Situ Cromogenica)
SISH (Ibridazione In Situ Argentica)
Metodi
• descriviamo i risultati ottenuti paragonando su casistica di routine i risultati ottenuti con ICH, SISH e FISH
• sono stati selezionati 30 casi di carcinoma mammario infiltrante (27 carcinomi duttali, 2 carcinomi mucinosi e 1 carcinoma midollare), pervenuti fissati in formalina tamponata al 10%, inclusi in paraffina
• tutti i casi sono stati analizzati in sistema robotizzato secondo protocollo ICH standard (RE; RP; Ki67; ERB2) (PATHWAY®, Ventana)
• la valutazione dell’amplificazione del gene HER2 è stata eseguita utilizzando la metodica SISH (INFORM®, Ventana)
• in 10/30 casi (33%) è stata eseguita anche analisi FISH
Valutazione colorazione ICH• I casi con score ICH 3+ sono stati considerati
positivi, i casi con score 0 e 1+ negativi ed i casi con score 2+ come dubbi (sec. ASCO 2007)
Valutazione SISH
• la metodica SISH è stata valutata con metodo semiquantitativo
• in presenza di isoforme del Chr17 l’analisi è stata ripetuta scegliendo un diverso campo o prelievo
• nei casi con ratio HER2/Cr17 compresa tra 1.4 e 4, si è proceduto ad una seconda valutazione con metodo quantitativo (sec. Ventana 2007)
SISH per gene HER2 positiva con clusters di segnali nei nuclei delle cellule neoplastiche e SISH per cromosoma 17 (Chr17) con uno, due o tre segnali per ogni nucleo di cellula neoplastica (40x)
HER2Chr17
Risultati
SISH + SISH -SISH
incertaSISH
non valutabileTotale
ICH pos (3+) 4 1 0 3 8
ICH neg (0, 1+) 0 4 0 0 4
ICH incerta (2+) 2 10 1 4 17
ICH non valutabile
0 1 0 0 1
Totale 6 16 1 7 30
Commenti alla tabella:
Dei casi con ICH 3+ e SISH valutabile (n=5):• 4/5 (80%) sono positivi con SISH• 1/5 (20%) è negativo con SISH
Dei casi con ICH 2+ e SISH valutabile (n=13):• 2/13 (15%) sono positivi con SISH• 10/13 (77%) sono negativi con SISH• 1/13 (8%) è incerto con SISH
Tutti i casi con ICH negativa (n=4) si confermano negativi con SISH
In 10 casi è disponibile il dato FISH:
• tra i casi positivi alla FISH (n=6), la SISH è valutabile in 3: 2/3 sono SISH-positivi ed 1/3 SISH-negativi
• tutti i casi negativi alla FISH (n=4) sono risultati negativi anche alla SISH
SISH vs FISH:
Conclusioni• I dati preliminari confermano la buona concordanza
tra ICH e SISH (singolo caso discordante)
• Il 15% dei casi con ICH 2+ (incerta) ha una SISH positiva, confermando la necessità di un approfondimento dello studio dello stato di HER2 con metodiche di ibridazione in situ
• La SISH si propone come una valida metodica di analisi dello stato del gene HER2
Bibliografia:
• Wolff AC et al. American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists guidelines recommendations for Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 testing in breast cancer. J Clin Oncol 2007; 25(1): 118-145
• Grogan TM et al. Interpretative guide for Ventana INFORM® HER2 DNA Probe staining of breast carcinoma. Ventana 2007