Strumentazione per analisi cliniche da laboratorio

Viene determinata la composizione del fluido biologicoper ottenere informazioni utili per la diagnosi e stimare l’efficacia di una terapia

Tipi di strumentazione

• Preparazione del campione– riscaldatori, centrifughe, dispositivi per cromatografia ed elettroforesi

• Analisi del campione– Plasma (che contiene numerose sostanze in soluzione e in

sospensione)• Fotometro (colorimetro)• Spettrofotometro• Analizzatore

– Elementi corpuscolari del sangue (globuli rossi, globuli bianchi, piastrine)

Analisi del plasmaLa concentrazione delle sostanze presenti nel plasma viene determinata da specifiche tecniche analitiche tramite reazioni chimiche in grado di produrre derivati colorati, la cui concentrazione viene determinata con una misura di assorbanza (A)

I0 I I = I0exp(-CL)

L

C concentrazione della sostanza coefficiente di assorbimento per unità di lunghezza e unità di concentrazione

A=ln(I0/I)=CL

Analisi cliniche del plasmaEsame Campo di Normalità Unità di misura

Azotemia 8-16 mgN/100ml

Glucosio 70-90 mg/100ml

Fosfati 3-4,5 mg/100ml

Calcio 9-11,5 mg/100ml

Creatina 0,6-1,1 mg/100ml

Acido Urico 3-6 mg/100ml

Proteine 6-8 g/100ml

Albumina 4-6 g/100ml

Colesterolo 160-200 mg/100ml

Bilirubina 0,2-1 mg/100ml

SGOT 20-50 mU/ml

Sodio 135-145 mEq/l

Potassio 3,5-5 mEq/l

Cloro 95-105 mEq/l

CO2 totale 24-32 mEq/l

Fotometro (colorimetro)

V0 = k I0

V1 = k I1I1 = I0exp(-) A=ln(V0/V1)

Fotometro a fiamma

concentrazione di metalli puri (sodio, potassio)

Spettrofotometro

Fluorometro• Fenomeno della fluorescenza

Vantaggi:

•sensibilità•specificità

Svantaggi:

•sensibilità al pH e a T

Elettrochemiluminescenza

In ECL technology, this electrochemiluminescent quality is integrated with conventional antigen (Ag) and antibody (Ab) reactions. These reactions take place on the surface of a streptavidin-coated paramagnetic microparticle during two incubations. The incubation time is dependent upon the assay.

Analizzatore

• Caricatore di campioni

• Pompa e il collettore

• Riscaldatore

• Colorimetro

• Registratore

Elementi corpuscolari del sangue• globuli rossi (RBC), globuli bianchi (WBC), piastrine

10HCTMCV

RBCcount

10HbMCH

RBCcount

100HbMCHC

HCT (%)(pg)(m3)

Conteggio RBC, WBC, Hb

Analyzer computer

RBCbath

WBCbath

Hgb

Datamanagement

system

Laboratorycomputersystem

Printer

Lysingagent

Diluter IDiluting

fluid

Diluter II

Hemoglobin-ometer

C CC C CC

Lysingand

mixing

Apparecchiature

Internalelectrode

Bloodcellsuspension

Aperture tube

Detail ofaperture(WBC)

Aperture

Samplebeaker

Externalelectrode

Vacuum (6"Hg)

+

-

Aperturecurrent

100 m

75 m

Differenziazione dei globuli bianchi• Neutrofili, linfociti, monociti, eosinofili e basofili• Diffrazione della luce laser: il campione viene iniettato in una cella a flusso e le cellule allineate singolarmente diffrangono una luce laser

Angolo e intensità della luce diffratta dipendono dal volume e caratteristiche della cellula.

Emoglobinometro

0ln( / )

( )sI I

cd

L’emoglobina reagisce con il cianuro di potassio o con il ferrocianuro di potassioper produrre cianometaemoglobina.

Pulsossimetro

2

2

HbO

Hb HbO

cS

c c

0 exp( )i i iI I cd 2 20 exp( ( ) )r r r r

Hb Hb HbO HbOI I c c d

0ln( / ) /i ic I I d

2Hb HbOc c c

22 0( ) ln( / ) /r r r rHb HbO Hb HbOc c I I d

2

0

0

ln( / )( )

ln( / )Hb HbO

r riHb

r r i i

I IS

I I