Nessun titolo diapositiva - uniroma2.it · La variabilità genetica può essere osservata a diversi...
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I II III 1 2 1 1 2 2 3 3 4 A 1 A 2 A 3 A 4 A 2 A 3 A 1 A 3 A 2 A 5 A 3 A 5 A 1 A 5 A 1 A 2 A 3 A 2 1
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I
II
III
1 2
1
1
2
2
3
3 4
A1 A2
A3 A4
A2 A3
A1 A3
A2 A5
A3 A5
A1 A5
A1 A2
A3 A2
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La variabilità genetica può essere osservata a diversi livelli:
• morfologico macroscopico o microscopico
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Striatura e colore delle conchiglie della chiocciola Cepaea nemoralis (a) Striata gialla; (b) non striata rosa
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La variabilità genetica può essere osservata a diversi livelli:
• morfologico macroscopico o microscopico
• funzionale (ad esempio daltonismo)
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La variabilità genetica può essere osservata a diversi livelli:
• morfologico macroscopico o microscopico
• funzionale (ad esempio daltonismo)
• di proprietà cinetiche di enzimi
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La variabilità genetica può essere osservata a diversi livelli:
• morfologico macroscopico o microscopico
• funzionale (ad esempio daltonismo)
• di proprietà cinetiche di enzimi
• di comportamento elettroforetico o cromatografico di molecole proteiche
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La variabilità genetica può essere osservata a diversi livelli:
• morfologico macroscopico o microscopico
• funzionale (ad esempio daltonismo)
• di proprietà cinetiche di enzimi
• di comportamento elettroforetico o cromatografico di molecole proteiche
•direttamente sul materiale genetico (sequenza di basi o analisi citogenetica)
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La variabilità genetica può essere analizzata con differenti tecniche, alcune di queste sono:
• sierologiche (es. agglutinazione dei globuli rossi)
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La variabilità genetica può essere analizzata con differenti tecniche, alcune di queste sono:
• sierologiche (es. agglutinazione dei globuli rossi)
•elettroforesi di proteine
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La variabilità genetica può essere analizzata con differenti tecniche, alcune di queste sono:
• sierologiche (es. agglutinazione dei globuli rossi)
•elettroforesi di proteine
•analisi dell’attività enzimatica
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La variabilità genetica può essere analizzata con differenti tecniche, alcune di queste sono:
• sierologiche (es. agglutinazione dei globuli rossi)
•elettroforesi di proteine
•analisi dell’attività enzimatica
•analisi di frammenti di DNA
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digestione DNA genomico
con BamHI
soggetti 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
elettroforesi
sonda o probe
DNA
genomico SfiI SfiI * SfiI
6.4kb 14.6kb
Analisi di un marcatore che determina l’eliminazione di un sito di restrizione per l’enzima SfiI
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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M
-
+
Southern blotting
Elettroforesi su gel di agarosio
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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M
-
+
2.0 kb
3.0 kb
4.0 kb
5.0 kb
6.0 kb 7.0 kb
Southern blotting
Elettroforesi su gel di agarosio
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Southern blotting
supporto
carta assorbente
gel di agarosio
peso da circa 500 g piastra di vetro
tampone di trasferimento
membrana di nylon
carta assorbente
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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M
ibridazione
membrana di nylon
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M
esposizione del filtro su lastra autoradiografica
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autoradiografia
sonda o probe
DNA
genomico SfiI SfiI * SfiI
6.4kb 14.6kb
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M
14.6 kb
6.4 kb
8.0 kb
13.0 kb
16.0 kb
18.0 kb 21.0 kb
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Amplificazione del DNA mediante Polymerase Chain Reaction (PCR)
nuovo DNA
II ciclo III ciclo
28
denat.
anneal.
+
extens.
0.4kb 0.7kb
SfiI*
DNA genomico primer
forward
primer reverse digestione
prodotto della PCR con SfiI
elettroforesi
soggetti
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Analisi di un marcatore che determina l’eliminazione di un sito di restrizione per l’enzima SfiI mediante Polymerase Chain Reaction (PCR)
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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M
0.7 kb
0.4 kb 0.35 kb
0.50 kb
0.75 kb
1.25 kb
1.1 kb
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Analisi di una mutazione nota mediante sequenziamento del DNA
Lys Asn Lys Pro Leu Lys
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Analisi di una mutazione nota mediante sequenziamento del DNA
Lys Asn Lys Pro/ Leu Leu Lys
T
Lys Asn Lys Leu Leu Lys
Paziente
eterozigote
Paziente
omozigote
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