ELIMINA I LIPIDI, RECUPERA GLI ANALITI riduzione della soppressione ionica, miglior rapporto...
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Rimozione potenziata dei lipidi dalla matrice Agilent ELIMINA I LIPIDI, RECUPERA GLI ANALITI
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Rimozione potenziata dei lipidi dalla matrice Agilent
ELIMINA I LIPIDI, RECUPERA GLI ANALITI
Figura 1. Sovrapposizione di cromatogrammi GC/MS a scansione completa di un estratto di avocado QuEChERS non trattato (nero) e confronto con una purificazione tradizionale C18/PSA (rosso) e un estratto trattato con Enhanced Matrix Removal—Lipid di Agilent (blu).
Conteggi vs. tempo di acquisizione (min)
1,6
1,5
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1,3
1,2
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1
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0,8
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0,4
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0,2
0,1
0
x106
5 76 8 109 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35
Avocado: estratto Quechers pre-dSPEAvocado: estratto Quechers con purificazione C18/PSAAvocado: estratto Quechers con purificazione EMR—Lipid
Rimozione del 92% di matrice con EMR—Lipid
I LIPIDI APPESANTISCONO I TUOI CAMPIONI?
L'interferenza dovuta ai lipidi rappresenta un problema per i laboratori che eseguono misure di residui di pesticidi presenti in tracce in alimenti grassi o matrici biologiche complesse. I lipidi possono accumularsi nello strumento e nella colonna, riducendone la durata e diminuendo la sensibilità per gli analiti a causa dei fenomeni di soppressione ionica. Inoltre, in seguito alla formazione di depositi di lipidi sulla sorgente, è necessario aumentare la frequenza degli interventi di manutenzione sul sistema MS. La necessità di rimuovere i lipidi è ormai ben chiara, ma i metodi attuali spesso sacrificano il recupero degli analiti; insieme ai lipidi vengono infatti rimossi alcuni degli analiti target.
Ora non è più necessario scegliere tra rimozione dei lipidi e recupero degli analiti: l'innovativo prodotto Enhanced Matrix Removal—Lipid di Agilent consente la più completa rimozione della matrice e il più alto recupero degli analiti rispetto a qualsiasi prodotto per la preparazione del campione.
Enhanced Matrix Removal—Lipid, A DIFFERENZA di altri tipi di preparazione del campione, è un adsorbente unico che rimuove in maniera selettiva i lipidi da matrici complesse e campioni ad alto contenuto di grassi come l'avocado, consentendo la rimozione dei lipidi senza la perdita degli analiti.
RIMOZIONE POTENZIATA DEI LIPIDI DALLA MATRICE AGILENT
2
QuEChERS STANDARDEstrazione/ripartizione (6 passaggi)
Miscelazione e centrifugazione
Trasferimento su dSPE (adsorbenti)
Miscelazione e centrifugazione
Evaporazione/ricostituzione o diluizione
Eliminazione per filtrazione del precipitato
Trasferimento in vial A/S
L'innovativo adsorbente del prodotto EMR—Lipid sostituisce la fase C18/PSA nella metodologia QuEChERS riducendo in misura significativa gli effetti della matrice e migliorando il recupero degli analiti. Questo adsorbente è ampiamente compatibile con l'analisi di analiti target polari, a polarità intermedia e non polari e assicura quindi un'efficace rimozione della matrice.
*Nota: il passaggio di purificazione viene omesso nel caso dell'analisi di tetracicline.
QUECHERS EMR—LIPIDEstrazione/ripartizione (6 passaggi)
Miscelazione e centrifugazione
Trasferimento su dSPE (EMR—Lipid e H2O)
Miscelazione e centrifugazione
Purifica e asciuga*
Evaporazione/ricostituzione o diluizione
Trasferimento in vial A/S
Tipo di campione Rimozione (%)
Avocado 92
Olio d'oliva 73
Olio di avocado 82
Olio di colza 75
Fegato di bovino 97
Cibo per gatti umido 91
Paprica 91
Cumino 72
Luppolo 57
Curcuma 47
Pepe nero 22
Cipolla 41
Fragola 10
Prugna 12
Peperone 61
Spinaci 61
Arancia 52Mela 66
33
LIPIDI AL MINIMO. RISULTATI AL MASSIMO.
Recu
pero
% d
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(n=6
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50 p
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ticidi 120
100
80
60
40
20
0Metamidofos
Purificazione EMR—LipidPurificazione dSPE C18/PSAPurificazione con adsorbente in zirconio
Tiofanato metile
Acido 2,4-DBentazone TPPDiclorprop Penconazolo EPN Captafol
EMR—Lipid rimuove una frazione significativa del contributo della matrice, migliorando il recupero di un'ampia varietà di analiti e riducendo al minimo la necessità di preparazioni e metodi separati.
La maggior efficienza di rimozione della matrice ottenuta con EMR—Lipid assicura una precisione superiore e una maggiore accuratezza dei risultati.
Figura 2. Dati sul recupero dall'analisi di vari residui di pesticidi in avocado; sono mostrati alcuni dei 73 pesticidi analizzati. Utilizzando Enhanced Matrix Removal–Lipid di Agilent, il 92% dei pesticidi presenta valori di recupero che rientrano nell'intervallo accettabile compreso tra 70 e 120%.
Figura 3. Numero di analiti per i quali il recupero % rientra nell'intervallo accettabile compreso tra 70 e 120% per l'analisi di farmaci veterinari in fegato bovino; è evidente il numero più alto di risultati accettabili in seguito alla purificazione con Enhanced Matrix Removal—Lipid di Agilent rispetto alla purificazione con adsorbente in zirconio.
Recu
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% d
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30
25
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15
10
5
0
Purificazione EMR—Lipid
REC<70%REC tra 70 e 120%REC>120
Purificazione C18/PSA Purificazione con adsorbente in zirconio
EMR-LIPID
4
Vantaggi per la cromatografia della preparazione del campione tramite EMR—Lipid
L'efficienza nella rimozione dei lipidi dai campioni, senza rimuovere al tempo stesso gli analiti, è il fattore cruciale per migliorare le prestazioni cromatografiche e ottenere dati della massima qualità, in particolare nel caso dei rivelatori a selezione di massa ad alta sensibilità.
Il ricorso a un protocollo QuEChERS EMR—Lipid migliora drasticamente l'accuratezza, la riproducibilità e la quantificazione a bassi livelli di concentrazione con le tecniche GC/MS e LC/MS (Figura 4).
Figura 4. I miglioramenti nella cromatografia sono evidenti nell'analisi di campioni preparati con Enhanced Matrix Removal—Lipid di Agilent: miglior sensibilità grazie alla riduzione della soppressione ionica, miglior rapporto segnale-rumore e meno interferenze per un'integrazione accurata con i sistemi GC o LC a triplo quadrupolo.
VANTAGGIO MIGLIOR SENSIBILITÀ PER GLI ANALITI
MIGLIOR RAPPORTO SEGNALE-RUMORE
MENO INTERFERENZE PER UN'INTEGRAZIONE ACCURATA
Esempio EPN in avocado su LC-QQQ
Captano in avocado su GC-QQQ
Permetrina in avocado su GC-QQQ
Purificazione EMR—Lipid
Purificazione con adsorbente in zirconio
Purificazione C18/PSA
3.2
3
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2.6
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+MRM (324,1 -> 296,1)AVBVR POQ4.d
x103
1,0
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0
Tempo di acquisizione (min)14,2 14,46 15 15,4 15,6
Coun
ts
14,863 min
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Tempo di acquisizione (min)12,7 13 13,2 13,4 13,6
13,163 min
+MRM (151,0 -> 79,1) AVMBPI-a-CD C2 arricchito 50 ppb-1.D x104
5
4,25
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-0,25
Tempo di acquisizione (min)20,4 20,6 20,8 21 21,2
20,788 min
+MRM (183,1 -> 168,1) AVMBPI-a-CD C2 arricchito 50 ppb-1.D
3.2
3
2.8
2.6
2.4
2.2
2
1.8
1.6
1.4
1.2
1
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0.6
0.4
0.2
0
x103
1,0
0,5
0
Tempo di acquisizione (min)14,2 14,46 15 15,4 15,6
Coun
ts
+MRM (324,1 -> 296,1)AVZ-Sep+ POQ 4.d
14,863 min
+MRM (151,0 -> 79,1)AV Z-Sep+ C5 arricchito 50 ppb-1.dx105
1,6
1,2
1,0
0,8
0,5
0,2
-0,1
Tempo di acquisizione (min)12,7 12,9 13,2 13,4 13,6
Coun
ts
13,163 min
x104
7
6
5
4
2
1
0
Tempo di acquisizione (min)20,4 20,6 20,8 21 21,2
20,819 min
+MRM (183,1 -> 168,1) AVMZ-Sep+ C5 arricchito 50 ppb-1.D
x103
1,0
0,5
0
Tempo di acquisizione (min)14,2 14,46 15 15,4 15,6
Coun
ts
+MRM (324,1 -> 296,1)AVC8 PR-Q3.d
14,855 min
+MRM (151,0 -> 79,1)Post-S 50 ppb grassi cSPE C1-2.Dx105
1,4
1,2
1,0
0,8
0,5
0,2
-0,1
Tempo di acquisizione (min)12,7 12,9 13,2 13,4 13,6
Coun
ts
*13,174 min
x104
7
6
5
4
2
1
0
Tempo di acquisizione (min)20,4 20,6 20,8 21 21,2
20,833 min
+MRM (183,1 -> 168,1) AVarricchito grassi dSPE 50 ppb-1R.D
5
In assenza di un'efficace purificazione del campione, l'efficienza e la qualità di analisi si deteriorano rapidamente a causa dell'accumulo di matrici grasse nello strumento e nella colonna. EMR—Lipid assicura prestazioni costanti del sistema anche dopo 100 iniezioni di campioni in matrici grasse come l'avocado. La frequenza ridotta degli interventi di manutenzione migliora la velocità di analisi dei campioni e consente di utilizzare al meglio le risorse di laboratorio, ottenendo la massima produttività.
La maggior rapidità di preparazione del campione semplifica la produttività del laboratorio
Figura 5. Risposta dell'analita su 100 iniezioni di campioni di avocado. Il trifenil fosfato (TPP) è uno standard interno di uso comune. L'incremento o la soppressione del segnale possono derivare da una purificazione insufficiente dei campioni, con possibili conseguenze in termini di scarsa qualità dei dati, errori e necessità di analizzare nuovamente i campioni. La capacità superiore di rimozione della matrice di Enhanced Matrix Removal—Lipid di Agilent si traduce in una sorgente più pulita e in una maggiore uniformità della risposta MS nel tempo per dati di qualità più elevata, un minor numero di analisi ripetute e meno interventi di manutenzione della sorgente e risoluzione dei problemi.
Figura 6. Condizioni della sorgente GC/MS nel corso di 2.500 iniezioni di campioni di avocado: il grafico evidenzia la netta riduzione della frequenza di manutenzione della sorgente MS (pulizia o sostituzione) associata all'uso di Enhanced Matrix Removal—Lipid di Agilent.
EMR—Lipid riduce le esigenze di calibrazione e manutenzione del sistema grazie alla minor interferenza dovuta alla matrice del campione. Pertanto si riduce anche il numero di campioni per i quali è necessario ripetere l'analisi. Ciò significa che è possibile operare con una maggiore produttività, risparmiando sui costi e incrementando l'efficienza del laboratorio.
Area
del
picco
di T
PP
20.000
18.000
16.000
14.000
12.000
10.000
8.000
6.000
4.000
2.000
0
0
Purificazione EMR—Lipid. Calo della risposta: 4%Purificazione C18/PSA. Aumento della risposta: 35%Purificazione con adsorbente in zirconio. Calo della risposta: 50%
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100
Iniezioni di campioni estratti da avocado su GC/QQQ
Abbo
ndan
za re
lativa
dell
o io
ne d
i cali
braz
ione
(%)
130
120
110
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0 500 1.000 1.500 2.000 2.500
Iniezioni di campioni di avocado dopo la purificazione QuEChERS EMR—Lipid
Tens
ione
EM
1.600
1.400
1.200
1.000
800
600
400
200
0
CRITERI DELLE PRESTAZIONI DEL METODO
>1.600 V richiede la sostituzione EM Min 70 Min 5
Tensione EMAbbondanza relativa dello ione 219Abbondanza relativa dello ione 502
PARAMETRO
6
La maggior rapidità di preparazione del campione semplifica la produttività del laboratorio Su oltre cento analisi di campioni contenenti grassi, la maggior efficacia e uniformità della purificazione con EMR—Lipid ha permesso di ottenere risultati più affidabili e con valori RSD % più bassi rispetto alle procedure QuEChERS alternative. La maggiore qualità e la precisione superiore dei dati riducono la necessità di ulteriori verifiche e giustificazioni, nonché l'esigenza di ripetere costose analisi.
Figura 7. Riproducibilità dell'analisi di pesticidi (RSD %) per più iniezioni di campioni di avocado su GC/QQQ. Campioni di avocado arricchiti con 50 ppb di pesticidi sono stati analizzati ogni cinque iniezioni, intervallandoli all'iniezione di matrici in bianco di avocado. Valori RSD > 20% sono considerati inaccettabili e sono evidenziati in rosso.
PesticidiRSD analiti per 100 iniezioni su GC/QQQ (n = 20)
Purificazione EMR—Lipid
Purificazione C18/PSA
Purificazione con adsorbente in zirconio
Dichlorvos 6,2 10,5 16,8
2-fenilfenolo 7,0 13,6 19,5
Etalfuralina 12,4 18,8 32,0
Sulfotep 7,1 11,8 17,2
Atrazina 6,8 12,2 19,1
Lindano 8,5 10,8 20,0
Clorotalonil 12,5 11,7 37,4
Diazinone 6,6 11,7 16,9
Clorpirifos metile 8,4 8,9 14,9
Diclofluanide 11,7 9,0 25,9
Aldrin 9,8 19,3 25,7
Tolilfluanide 10,5 6,6 17,8
Captano 29,9 51,9 47,1
Procimidone 6,8 14,3 22,5
Bupirimato 6,8 10,4 20,7
Endrin 8,3 12,6 24,1
Endosulfan solfato 8,5 12,1 22,4
DDT 21,6 22,4 42,6
Iprodione 11,0 10,7 40,0
Permetrina 6,8 11,8 18,8
Paration etile 11,8 7,2 13,0
TPP 9,1 19,9 28,3
Gli indiscutibili vantaggi dell'utilizzo del nuovo e innovativo EMR—Lipid Maggiore produttività: la maggiore sensibilità e il miglior rapporto segnale-rumore, associati alla riduzione dell'interferenza dovuta alla matrice, accelerano l'elaborazione dei dati e incrementano la produttività per l'analisi dei campioni.
Riduzione dei costi di laboratorio: EMR—Lipid permette di ottenere campioni più puliti, riducendo drasticamente gli interventi di manutenzione della sorgente MS e consentendo di dedicare più tempo all'analisi dei campioni e meno tempo a costosi interventi di risoluzione dei problemi, riparazione degli strumenti e fermo macchina.
Codice Descrizione 5982-1010 Bond Elut EMR—Lipid - dSPE 5982-0101 Bond Elut EMR—Lipid - Tubo Final Polish 5982-0102 Bond Elut EMR—Lipid - Bustina Final Polish MgSO4
Semplificazione dei flussi di lavoro: procedura standardizzata e facile da usare basata su un unico adsorbente che incrementa al massimo il recupero degli analiti da un'ampia varietà di campioni contenenti grassi. Risparmia tempo e denaro riducendo i costi di materiale, l'inventario, i tempi della formazione e la documentazione, semplificando così la produttività del laboratorio.
Maggiore qualità dei risultati: Un profilo dei campioni più pulito equivale a una maggiore integrità dei dati, una più alta affidabilità dei risultati, un'elaborazione più rapida dei dati e a un minor numero di analisi ripetute.
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