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Determinación de IgG específica en neumoalérgenos

María Jesús Cruz

Laboratorio de Investigación en Neumología

Institut de Recerca-Hospital Vall d’Hebron

Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014

NEUMONITIS POR HIPERSENSILIDAD

Síndrome complejo, de intensidad, presentación clínica e

historia natural variables. Es producido por la inhalación de

sustancias, en su gran mayoría orgánicas, que, en algunos

individuos susceptibles, desencadenan una reacción

inflamatoria a nivel de los alvéolos, bronquiolos e intersticio

pulmonar, con un marcado componente linfo-histiocitario (ó

monocítico-macrofágico).

La sensibilización y exposición con ausencia de síntomas (ej: fiebre o pérdida

de peso) no definen la enfermedad. Los sujetos expuestos pueden desarrollar

anticuerpos IgG al antígeno frente al cual están expuestos o un elevado número

de linfocitos en el pulmón sin desarrollar la enfermedad.


ETIOLOGÍA Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2014

MECANISMOS PATOLÓGICOS

Los anticuerpos IgG específicos presentes en la NH

sugieren un mecanismo de hipersensibilidad tipo III,

aunque en la actualidad se conoce que también esta

presente un mecanismo de hipersensibilidad tipo IV

mediado por células T.

De hecho algunos autores han descrito un mecanismo

Th1 en los casos de NH aguda o subaguda y un

mecanismo Th2 en los casos que evolucionan a fibrosis

pulmonar.


Exposición antigénica conocida

Signos y síntomas consistentes con NH

Rx de tórax y PFR consistentes

Determinación de anticuerpos IgG específicos (Precipitinas / ELISA)

Pruebas cutáneas específicas de hipersensibilidad inmediata

Ambas (-) (+) / (-) Ambas (+)

No NH TAC tórax y/o

LBA2 + BTB3 y/o

P. provocación bronquial específica

Evitación antigénica

No mejoría Sí mejoría

PFR1 PFR1

NH

BPQ4 si no se alcanza un diagnóstico de certeza

1 Mejoría en las pruebas funcionales respiratorias: incremento 20% en FVC, FEV1 y/o DLCO, 2 LBA: lavado broncoalveolar, 3 BTB: biopsia transbronquial, 4 BPQ: biopsia pulmonar quirúrgica.


PREDICTORES DE NH

1- Exposición a un agente sospechoso.

2- Anticuerpos específicos frente al antígeno sospechoso

positivos.

3- Episodios de síntomas recurrentes.

4- Crepitantes en la auscultación.

5- Síntomas entre las 4-8 h tras la exposición.

6- Pérdida de peso.

Se han identificado seis predictores significativos que

proporcionan un 95% de precisión en el diagnóstico:

Y Lacasse, et al. Am J Respir Crit Care Med 2003. Vol 168. pp 952-958


CUANTIFICACIÓN DE

ANTICUERPOS IgG

ESPECÍFICOS


Técnica de Ouchterlony:

Se realiza en placas de agar en donde se practican

pocillos.

En uno de los pocillos se coloca el suero y en el resto

se colocan los antígenos.

Cuando difunden, ambos sistemas se encontrarán y

se formará en la zona de equivalencia el complejo Ag-Ac

correspondiente que se hace visible en forma de una línea de

precipitación.


Aves

Paloma / Bloom

Periquito

Loro

Pato

Plumas

Hongos

Aspergillus fumigatus

Penicillium frequentans

Mucor mucedo

Rizophus nigricans

Cuantificación IgG específica por ELISA

E E


Hongos


OBTENCIÓN EXTRACTOS

Materia prima (sustancia frente a la cual

el paciente refiere los síntomas)

Macerado (elución de las sustancias

alergénicas)

Diálisis (eliminación de los

componentes inferiores a 3.5 kDa)

Valoración Proteínas (BCA, Lorry, Bradford)


In vivo In vitro

Test cutáneos “Prick test”, IDR

Prueba de Provocación Bronquial Específica

Inmunoensayos ELISA

Western-blot


2123 24

11

47

60

12

17

0

10

20

30

40

50

60

70

Palom

aLo

ro

Per

iquito

Pat

o

Asp

ergillus

Pen

icilli

um

Muc

or

Rizop

hus

% p

acie

nte

s p

osit

ivo

s


Rodrigo MJ et al. Occup Environ Med 2000; 57: 159-64.


Rodrigo MJ et al. Occup Environ Med 2000; 57: 159-64.

Acs IgG específicos a suero de paloma y extracto de “bloom”


E E

E E


A B C

Media (DS)* 91 (103) 5.2 (3.4) 1.6 (0.07)

Mediana* 42 6.3 1.6

Rango* 1.6 - 298 1.6 - 8.5 1.6 - 1.8

% no detectable 20 40 100

A - Palomares B - Habitación con 1 paloma C - Habitación sin palomas * U/m3

CONCENTRACIÓN AMBIENTAL DE

ANTÍGENO DE PALOMA


# palomas (# palomas/m3) Habitación (m3) Ventilación (m2) [Ag] U/m3

45 (2.8) 15.7 6.2 1.6 50 (4.2) 12.0 6.0 1.6 75 (3.3) 22.2 3.6 28 22 (1.3) 16.2 2.6 41 29 (5.8) 5.0 0.6 42 60 (3.3) 18.0 0.4 43 27 (2.7) 10.0 5.0 129 100 (5.0) 20.2 8.5 198 28 (1.5) 18.7 2.5 216 50 (9.2) 5.4 0.4 298

CONCENTRACIÓN AMBIENTAL DE

ANTÍGENO DE PALOMA


Cruz MJ et al. Med Clin (Barc) 2003; 120: 578-83.


Morell F et al. Chest 2003; 124: 1145- 52.


Morell F et al. Medicine 2008; 87: 110- 30.


Morell F et al. Scand J Work Environ Health 2011; 37: 349- 56.


Morell F et al. Lancet Respir 2013; 1: 685- 94.


¡Muchas gracias!


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