Bersani Fabrizio De Cristofaro Luca Di Lena Simone Frigerio Stefano Girotto Alessandro Maiorana...
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Bersani Fabrizio
De Cristofaro Luca
Di Lena Simone
Frigerio Stefano
Girotto Alessandro
Maiorana Antonina
Pecoraro Veronica
PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE TRASFORMAZIONE
BATTERICABATTERICA
PUNTO DI PARTENZA Aliquota di cellule competenti.
PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE TRASFORMAZIONE
BATTERICABATTERICA
SCOPO Trasformare le cellule batteriche inserendo il DNA
plasmidico che contiene il gene per la resistenza all’Ampicillina (AMP)
PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE BATTERICATRASFORMAZIONE BATTERICA
RISULTATI: Le cellule trasformate, piastrate su terreno con
antibiotico, svilupperanno delle colonie
.
PREPARAZIONE DI COLTURE LIQUIDE
Passaggio intermedio tra 1° e 2° fase: Vengono preparate colture liquide di batteri
trasformati, a partire da colonie cresciute su terreno solido.
SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNAMINIPREPS DI DNA
PUNTO DI PARTENZA Colture liquide in terreno selettivo (AMP)
SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNAMINIPREPS DI DNA
SCOPO Estrarre il DNA plasmidico da un’aliquota della
soluzione di partenza
SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNAMINIPREPS DI DNA
RISULTATI Soluzione di DNA plasmidico in eppendorf
TERZA FASE: ELETTROFORESIELETTROFORESI
PUNTO DI PARTENZA Aliquota di DNA plasmidico appena estratto Caricamento dei campioni su gel d’agarosio Corsa elettroforetica.
TERZA FASE: ELETTROFORESIELETTROFORESI
SCOPO Verificare l’avvenuta trasformazione delle cellule
batteriche dal punto di vista molecolare.
TERZA FASE: ELETTROFORESIELETTROFORESI
RISULTATI Dopo la corsa su gel d’agarosio, con l’ausilio del
colorante, si evidenziano le bande di DNA plasmidico.