Bersani Fabrizio De Cristofaro Luca Di Lena Simone Frigerio Stefano Girotto Alessandro Maiorana...

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Bersani Fabrizio De Cristofaro Luca Di Lena Simone Frigerio Stefano Girotto Alessandro Maiorana Antonina Pecoraro Veronica

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Bersani Fabrizio

De Cristofaro Luca

Di Lena Simone

Frigerio Stefano

Girotto Alessandro

Maiorana Antonina

Pecoraro Veronica

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PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE TRASFORMAZIONE

BATTERICABATTERICA

PUNTO DI PARTENZA Aliquota di cellule competenti.

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PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE TRASFORMAZIONE

BATTERICABATTERICA

SCOPO Trasformare le cellule batteriche inserendo il DNA

plasmidico che contiene il gene per la resistenza all’Ampicillina (AMP)

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PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE BATTERICATRASFORMAZIONE BATTERICA

RISULTATI: Le cellule trasformate, piastrate su terreno con

antibiotico, svilupperanno delle colonie 

.

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PREPARAZIONE DI COLTURE LIQUIDE

Passaggio intermedio tra 1° e 2° fase: Vengono preparate colture liquide di batteri

trasformati, a partire da colonie cresciute su terreno solido.

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SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNAMINIPREPS DI DNA

PUNTO DI PARTENZA Colture liquide in terreno selettivo (AMP)

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SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNAMINIPREPS DI DNA

SCOPO Estrarre il DNA plasmidico da un’aliquota della

soluzione di partenza

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SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNAMINIPREPS DI DNA

RISULTATI Soluzione di DNA plasmidico in eppendorf

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TERZA FASE: ELETTROFORESIELETTROFORESI

PUNTO DI PARTENZA Aliquota di DNA plasmidico appena estratto Caricamento dei campioni su gel d’agarosio Corsa elettroforetica.

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TERZA FASE: ELETTROFORESIELETTROFORESI

SCOPO Verificare l’avvenuta trasformazione delle cellule

batteriche dal punto di vista molecolare.

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TERZA FASE: ELETTROFORESIELETTROFORESI

RISULTATI Dopo la corsa su gel d’agarosio, con l’ausilio del

colorante, si evidenziano le bande di DNA plasmidico.