Post on 01-May-2015
La ricerca multidisciplinare a sostegno della filiera delle piante officinali
DIVERSITA’ BIOMOLECOLARE DI
PIANTE OFFICINALI SICILIANE
Giuseppe Ruberto
Aspetto salutistico delle Piante Officinali e loro utilizzo in naturopatiaCatania, 24 Novembre 2008, Le Ciminiere, V.le Africa, Piazzale Asia
Consiglio Nazionale delle RicercheIstituto di Chimica Biomolecolare – Valverde CT
La chimica dei prodotti naturali è probabilmente la più vecchia branca della chimica organica. Il suo sviluppo si deve alla curiosità verso l’attività biologica manifestata da questi composti, l’ampia diffusione delle medicine popolari, il loro aroma, etc., che inizialmente ha indotto al loro isolamento e determinazione strutturale, e successivamente alla loro sintesi e allo studio dei meccanismi biosintetici che li producono. Con il rapido sviluppo, in questi ultimi decenni, delle tecniche di isolamento, della cromatografia e della spettroscopia, la determinazione della struttura, in molti casi, è divenuta quasi una metodologia routinaria, anche se rimane il primo ed essenziale passo per qualsiasi ulteriore sviluppo. Dopo un iniziale periodo in cui l’isolamento è stato principalmente casuale, oggi si persegue sempre più un isolamento guidato dall’attività biologica, e dato che la maggior parte delle sostanze naturali esercita qualche tipo di bioattività, l’interesse oggi è rivolto verso le origini di tale bioattività e sulle interazioni che intercorrono fra i prodotti naturali e i siti recettoriali.
LA CHIMICA DEI PRODOTTI NATURALI
Metabolismo
Primario
•carboidrati
•lipidi
•proteine
•acidi nucleici
•coenzimi
Metabolismo
Secondario
•alcaloidi
•antrachinoni
•flavonoidi
•polifenoli
•steroidi
•terpeni
Oliessenziali
FUNZIONI NUTRIZIONALI
PRODOTTI NATURALIFUNZIONI NON NUTRIZIONALI
COSA SONO I PRODOTTI NATURALI
Sono i prodotti naturali, noti anche come metaboliti secondari, i responsabilidelle attività fitoterapeutiche di tutti i prodotti a base di erbe.
Sono ancora i prodotti naturali, intesi anche come “marker biomolecolari”, a stabilire la ‘bontà’ di una specie vegetale officinale, ed allo stesso tempo quella
di un suo qualsiasi derivato erboristico.
rosmarino
origano
timo
salvia
zafferano
coriandolo
finocchio(foglie)
finocchio(frutti)
PROGETTO PIANTE OFFICINALI SICILIANE
LE SPECIE ANALIZZATE
Finanziato da “Assessorato Agricoltura e Foreste – Regione Siciliana”elicriso
Salvia officinalis
O
O OH
O O
OHH
- thujone - thujone1,8- cineole camphor borneol
Monoterpeni Ossigenati
Monoterpeni idrocarburi
- pinene - pinene camphene
trans- caryophyllene
Sesquiterpeni idrocarburi
myrcene
globulol
Sesquiterpeni Ossigenati
Olio Essenziale
Sette differenti popolazioni di Salvia officinalis (A – G) sono coltivati in tre differenti ambienti: Catania, Troina EN, Avola SR.
- Thujone
Borneol
Camphene
- Pinene
Camphor
1,8- Cineole
- Thujone
0 10 20 30 40
S. officinalistipo A
Globulol
- Thujone
Pimaradiene
a- Pinene
- Pinene
a- ThujoneCamphor
1,8- Cineole
0 10 20 30
S. officinalis
tipo C
a- Humulene
- Caryophyll
Pimaradiene
- Pinene
- Thujone
Camphene
Camphora- Thujone
1,8- Cineole
0 10 20 30
S. officinalis
tipo E
Globulol
Camphene
- Thujone
- Pinene
Mircene
1,8- CineoleCamphor
Borneol
0 10 20 30 40 50
Salvia triloba
(wild)
Metaboliti secondari in estratti di salvia.
Marker Classe M. W.
-Carotene Carotenoide 536
Luteina “ 568
Scutellarein Flavonoide 286
Hispidulin “ 300
Cirsimaritin “ 314
Genkwanin “ 284
Salvigenin “ 328
Carnosol Terpene 330
Carnosic Acid “ 318
Methyl Carnosate
“332
Ethyl carnosate “ 346
Caffeic AcidAcido
Organico 180
Rosmarinic Acid “ 360
ESTRATTI DI SALVIA
O
O
OH
OH
MeO
O
OH
OH
OHOH
OH
O
OH
O
O
OH
OH
OH
OH
O
O
OH
OH
OH
MeO
OH
OHO
O
OH
OH
COOH
OH
OH
COMeO
O
O
OH
OH
OH
OH
O
OOH
MeO
MeO
OMe
O
O
OH
OH
MeO
MeO
Genkvaninn
Acido RosmarinicoAcido Caffeico
-Carotene
Luteina
Hispidulin
Carnosol Carnosic Acid Metil Carnosate
ScutellareinSalvigenin
Cirsimaritin
0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 8,0 9,0 10,0 11,0 12,0 13,0 14,0 15,0 16,0 17,0 18,0 19,0 20,0 21,0 22,0 23,0 24,0 25,0-50
100
200
300
400
500
600
700
800 Carotenoidi1 #24 [modif ied by HPLC] SAspAV 12 mg UV_VIS_5mAU
min
1 -
Lu
tein
a(e
st)
- 7
,72
8
2 -
Be
ta-c
aro
ten
e -
17
,51
4
WVL:450 nm
0,0 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 35,0 40,0 45,0 50,0 55,0 60,0 65,0-50
100
200
300
400
500 PPO #25 [modif ied by HPLC] SaECT AcOEt UV_VIS_1mAU
min
1 -
Aci
do
Ca
ffe
ico
- 1
5,2
68
2 -
Aci
do
Ro
sma
rin
ico
- 3
2,1
35
3 -
Qu
erc
etin
- 4
0,4
68
4 -
Na
rin
ge
nin
- 4
4,0
68
5 -
His
pid
ulin
- 4
4,9
35
6 -
Cir
sim
ari
tin -
49
,60
1
7 -
50
,46
8
8 -
55
,46
8
9 -
Sa
lvig
en
in -
56
,20
1
10
- C
arn
oso
l - 5
7,2
68
11
- M
eth
yl C
arn
osa
te -
59
,20
1
WVL:280 nm
0,0 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 35,0 40,0 45,0 50,0 55,0 60,0 65,0-500
0
500
1.000
1.500
2.000
2.500
3.000
3.500
1 - PPO #20 [modif ied by HPLC] SaspAv EtOH UV_VIS_22 - PPO #23 SaBCT EtOH UV_VIS_23 - PPO #26 SaECT EtOH UV_VIS_2mAU
min
3
2
1
1 - Acido Rosmarinico - 32,201
WVL:330 nm
A
B
C
A (n-esano), B (etil acetato), C (etanolo)
450 nm
280 nm
330 nm
Profili HPLC-UV-DAD di estratti di Salvia
Carotenoidi
Flavonoidi e Terpeni
Acidi organici
0,2254
0,176
0,212
0,26
0,2164
0,283
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
SaspAv
SaBCT
SaECT
Confronto tra i valori dei 13 markers chemotassonomiciper 3 diversi genotipi di SalviaSaspAv
SaBCT
SaECT
Confronto quali/quantitativo del contenuto di 13 markers biomolecolari in tre differenti popolazioni di S. officinalis
Gli oli essenziali dei taxa di Origano sono caratterizzati dalla presenza dominante dei seguenti gruppi di composti:
ORIGANO - ORIGANUM
OH
OH
OH
OH OH
OH
sabinene
thymol
terpinen- 4- ol
p- cimene - terpinene
trans- caryophyllene germacrene- D
carvacrol
linalool sabinene hydrate
spathulenol
O. majorana(syn. Majorana hortensis)
O. vulgare subsp. hirtum(syn. O. heracleoticum),
O. onites
O. vulgare subsp. vulgare
51 campioni di Origano provenenti da differenti ambienti Siciliani 1.8 – 6.6 % (v/w) il range di resa in olio essenziale – media 4.1%
81 componenti identificati;34 – 54 il range di componenti identificati nei 51 campioni - media 47.
GLI OLI ESSENZIALI DELL’ORIGANO SICILIANO
Selezionati Componenti dei 51 Campioni di Origano
#a Composto Range %b Inc #a Composto Range %b Inc
4 -Thujene 1.25 - 3.17 5121 -Terpinene 8.29 - 53.47 51
5 -Pinene 0.65 - 2.23 5122
cis-Sabinene hydrate 0.12 - 2.28 51
7 Sabinene n.d. - 5.02 4325 Linalol 0.15 - 3.88 51
8 -Pinene 0.23 - 2.18 5126
trans-Sabinene hydrate n.d. - 12.82 40
10 -Myrcene 2.07 - 4.79 5134 Terpinen-4-ol 0.50 - 9.58 51
14 -Terpinene 2.53 - 6.80 5138 -Terpineol n.d. - 3.18 40
15 p-Cimene 3.15 - 18.67 5142 Thymol methyl ether 0.13 - 6.05 51
16 Limonene 0.63 - 1.64 5148 Thymol 10.52 - 54.42 51
17 1,8-Cineole n.d. - 3.32 1749 Carvacrol 0.19 - 8.28 51
18 -Z-Ocimene n.d. - 3.29 4754 -Caryophyllene 0.57 - 3.97 51
20 -E-Ocimene 0.14 - 6.61 5165 -Bisabolene 0.23 - 3.61 51
a Il numero si riferisce all’ordine di eluizione in GC; b n.d. = non determinato; c numero di campioni in cui il componente è presente.
Analisi cluster degli oli essenziali di origano
thymol>> -terpinene≥p-cymenethymol> -terpinene>t-sabinene hydrate>terpinen-4-olthymol≥ -terpinene> p-cymenethymol>> -terpinene> p-cymenethymol> -terpinene> p-cymene-terpinene>> thymol> p-cymene-terpinene> thymol≥ p-cymene
Marker Classe M.W.
Vanillic AcidAcido
Organico 168
Rosmarinic Acid
“360
Aromadendrin
Flavonoide288
Naringenin “ 272
Luteolin “ 286
Sorbifolin “ 300
Apigenin “ 270
Cirsimaritin “ 314
Xanthomicrol “ 344
OH
O
OH
OMe
O
OH
O
O
OH
OH OH
OH
O
OOH
OH
OH
O
OOH
OH
OH
O
OOH
OH
OH
OH
O
OOH
OH
OH
OH
O
OOH
OH
OH
MeO
O
OOH
OH
MeO
MeO O
OOH
OH
MeO
MeO
OMe
Vanillic Acid Rosmarinic Acid
Naringenin Aromadendrin
Apigenin Luteolin Sorbifolin
Cirsimaritin Xanthomicrol
ESTRATTI DI ORIGANO
Metaboliti secondari in estratti di origano.
Confronto di tre profili cromatografici (HPLC-UV-DAD) di tre differenti estratti in acetato di eile di campioni di Origano
provenienti da differenti ambienti.
Thymus vulgaris L. è la più conosciuta specie di questo genere. Nella Farmacopea Europea è incluso solo il chemiotipo timolo/carvacrolo, le cui quantità oscillano fra 30-70% e 3-15%, rispettivamente. In Sicilia, la specie T. capitatus è quella spontaneamente più diffusa, essendo caratterizzata da un alto contenuto di carvacrolo.
OH
OHOH
terpinen- 4- ol
Monoterpeni Ossigenati
Monoterpeni idrocarburi
p- cymene - terpinene trans- caryophyllene
Sesquiterpeni
myrcene- terpinene Z- - bisabolene
carvacrol linanool
Principali componenti degli oli essenziali di Timo.
TIMO - THYMUS
Olio essenziale
41 campioni di Timo provenienti da differenti ambienti Siciliani 3.9 – 8.8 % (v/w) il range di resa in olio essenziale – media 6.2%
38 componenti identificati;27 – 37 il range di componenti identificati nei 41 campioni - media 33.
GLI OLI ESSENZIALI DEL TIMO SICILIANO
Selezionati Componenti dei 41 Campioni di Timo
a Il numero si riferisce all’ordine di eluizione in GC; b n.d. = not determinato; c numero di campioni in cui il componente è presente.
#a Composto range %b inc #a Composto range %b inc
3 -Pinene 0.56 - 1.04 41 19 Borneol n.d. - 1.13 40
6 Myrcene 1.16 - 2.10 41 20 Terpinen-4-ol 0.58 - 0.80 41
10 -Terpinene 1.00 - 2.22 41 26 Thymol 0.14 - 0.39 41
11 p-Cymene 4.63 – 11.45 41 27 Carvacrol 65.26 - 81.27 41
14 -Terpinene 2.10 - 9.09 41 29 -Caryophyllene 1.34 - 4.25 41
17 Linalool 0.27 - 0.95 41 33 Z--Bisabolene n.d. - 0.75 35
D endrogram ma per 41 V ariab ili
Legam e C om ple to
D istanze euclideeT
imo
02
8T
imo
03
1T
imo
00
8T
imo
03
0T
imo
03
6T
imo
03
5T
imo
02
6T
imo
02
4T
imo
02
3T
imo
02
2T
imo
03
4T
imo
01
1T
imo
04
3T
imo
03
9T
imo
03
2T
imo
01
9T
imo
00
7T
imo
03
3T
imo
01
5T
imo
01
6T
imo
00
6T
imo
04
5T
Imo
03
8T
imo
02
1T
imo
00
9T
imo
02
0T
imo
00
5T
imo
01
8T
imo
00
2T
imo
02
7T
imo
01
2T
imo
01
0T
imo
04
4T
imo
04
1T
imo
00
4T
imo
02
9T
imo
01
4T
imo
00
3T
Imo
03
7T
imo
01
3T
imo
00
1
0
5
10
15
20
Dis
tan
za L
eg
am
e
Analisi cluster degli oli essenziali di timo
carvacrol >> p-cymene > -terpinene
carv
acro
l ≈
70
%-
terp
inen
e ≈
8%
p-c
ym
en
e ≈
10
%
carv
acro
l ≈
80
%-
terp
inen
e ≈
3%
p-c
ym
en
e ≈
5%
carv
acro
l ≈
73
%-
terp
inen
e ≈
5%
P-c
ym
en
e ≈
8%
carvacrol ≈ 77%-terpinene ≈ 4%p-cymene ≈ 6%
carvacrol ≈ 75%-terpinene ≈ 4%p-cymene ≈ 6%
ESTRATTI DI TIMO
Marker Classe M.W.
Rosmarinic AcidAcido
Organico 360
Apigenin 7-O-glucuronide Flavonoide 446
Vicenin-2 (Apigenin 6,8 di-C-glc)
“594
Taxifolin di-O-glc* “ 628
Gardenin B glucoside* “ 520
Genkwanin rutinoside* “ 592
Apigenin “ 270
Eriodictyol “ 286
6-OH Luteolin “ 302
Luteolin “ 286
Thymusin “ 330
Cirsilineol “ 344
Diosmetin “ 300*corretto isomero non determinato
OH
O
O
O
OH
OH OH
OH
7
6
8 O
OOH
R'O
OHR
R
O
OOH
OH
OH
OH
R
O
OOR
OR'
MeO
O
OOH
OH
OH
OH
O
OOH
OH
OH
OH
OH
O
OOR
OMe
MeO
MeO
OMe
O
OOH
MeO
MeO
OMe
OH
O
OOH
OMe
OH
OH
O
OOH
MeO
OMeOH
OH
R = R' = H Apigenin
Genkwanin rutinosidein R o R'
R = H Luteolin
Eriodictyol
Rosmarinic Acid
R = C-glc; R' = H Vicenin-2
R = OH 6-Hydroxyluteolin
Taxifolin di-O-glucoside(in due degli OH)
Gardenin B glucosideR = glc
Cirsilineol
Diosmetin
Thymusin
R = H; R' = glu Apigenin 7-O-glucoronideMetaboliti Secondari negli Estratti di Timo.
Sono noti tre differenti chemiotipi di olio essenziale di Rosmarinus officinalis:
Tuttavia, l’olio essenziale, secondo la X F.U.I., deve contenere borneol (10 – 15%) e bornyl acetate (1.5 – 5.5%):
RO
R=H borneolR=Ac bornyl acetate
ROSMARINO - ROSMARINUS
O
O
O
1,8-cineolo canfora
verbenone
cineoliferumalta %
camphoriferum % > 20%
verbenoriferum % > 15%
41 campioni di Rosmarino provenienti da differenti ambienti Siciliani 0.7 – 2.8 % (v/w) il range di resa in olio essenziale – media 1.2%
93 componenti identificati;30 – 67 il range di componenti identificati nei 41 campioni - media 49.
Selezionati Componenti dei 41 campioni di Rosmarino
#a Composto range %b Inc #a Composto range %b Inc
3 -Pinene 2,21 - 39,83 41 24 Terpinolene n.d. - 3,55 26
4 Camphene 0,79 - 12,09 41 25 Linalool n.d. - 5,45 38
5 Thuja -2,4(10) Diene n.d. - 2,00 23 31 Camphor 2,55 - 30,53 41
9 -Pinene n.d. - 5,10 17 34 Isoborneol n.d. - 4,37 5
12 -Myrcene n.d. - 1,85 37 35trans-3-Pinocamphone n.d. - 2,78 28
14 -2-Carene n.d. - 2,83 10 37 Borneol n.d. - 17,72 36
15 -Terpinene n.d. - 2,70 40 41 -Terpineol n.d. - 4,65 40
16 p-Cymene n.d. - 2,61 39 45 Verbenone n.d. - 13,73 28
17 Limonene n.d. - 7,90 19 50 trans-Myrtanol n.d. - 2,68 26
18 1,8-Cineole 0,11 - 62,74 41 64 Caryophyllene –Z n.d. - 2,91 36
a Il numero si riferisce all’ordine di eluizione in GC; b n.d. = non determinato; c numero di campioni in cui il componente è presente.
GLI OLI ESSENZIALI DEL ROSMARINO SICILIANO
Analisi cluster degli oli essenziali di rosmarino
-pinene 16.55Canfora 13.131,8-Cineolo 10.49Borneolo 10.88Verbenone 9.98
-Pinene 33.03Canfora 19.64Canfene 9.96Borneolo 7.78Limonene 6.10Verbenone 4.96
1,8-Cineolo 43.62-Pinene 15.55Canfora 10.94Borneolo 8.90Canfene 5.83
a-Pinene 30.521,8-Cienolo 25.37Verbeneone 5.62Canfora 5.53Canfene 5.52Borneolo 5.44
1,8-Cineolo 59.49-Pinene 13.25Canfene 4.79-Terpineolo 4.27Isoborneolo 4.02
Marker Classe MW
Acido Caffeico Acido
organico 180
Acido Rosmarinico “ 360
Luteolin glucoside Flavonoide 624
Luteolin glucuronide “ 630
Eupafolin-glucoside “ 478
Sorbifolin-glucoside “ 462
Luteolin-glucuronide “ 462
Luteolin-glucuronide (acetil) 1 “ 504
Luteolin-glucuronide (acetil) 2 “ 504
Luteolin “ 286
Scutellarein “ 286
Hispidulin “ 300
Cirsimaritin “ 314
Cirsimaritin isomero “ 314
Genkwanin “ 284
Salvigenin “ 328
Carnosol Terpene 330
Carnosic Acid “ 318
Methyl Carnosate “ 332
Metaboliti Secondari negli Estratti di Rosmarino.
O
O
OH
OH
MeO
O
OH
OH
OHOH
OH
O
OH
O
O
OH
OH
O
O
OH
OH
OH
MeO
OH
OHO
O
OH
OH
COOH
OH
OH
COMeO
O
O
OH
OH
OH
OH
O
OOH
MeO
MeO
OMe
O
O
OH
OH
MeO
MeO
O
O
OH
OH
MeOOH
O
O
OH
OH
MeO
MeO
Genkvaninn
Acido RosmarinicoAcido Caffeico
Hispidulin
Carnosol Carnosic Acid Metil Carnosate
ScutellareinSalvigeni
Cirsimaritin
Lutolin e derivati Eupafolin glucoside
ESTRATTI DI ROSMARINO
Studi molecolari e valorizzazione di risorse per il settore biomedico Individuazione e caratterizzazione di nuove molecole da specie vegetali
per applicazioni in campo fitoterapico
Al contrario, le parti aeree della pianta sono scarsamente utilizzate, e considerate un prodotto di scarto. Abbiamo pertanto analizzato l’estratto lipidico delle foglie di G. glabra raccolta in Sicilia. Esso è stato sottoposto alla valutazione della sua efficacia antiossidante misurando il valore dei perossidi (PV) in olio di semi di girasole commerciale. Questa indagine ha permesso di stabilire che la capacità protettiva dell’estratto lipidico di foglie di liquirizia è paragonabile a quella del 2,6-di-tert-butil-4-metilfenolo (BHT), uno dei più comuni antiossidanti sintetici (v. grafico).
La liquirizia (Glycyrrhiza glabra L.) è una delle più conosciute piante medicinali nel mondo. La parte della pianta utilizzata come droga è rappresentata dalle radici (stoloni) essiccate. Essa è inclusa in molte farmacopee ufficiali di svariati paesi orientali dove sono descritti i principali usi terapeutici delle radici. Svariati composti triterpenici quali saponine(acido glicirrizico, acido glicirrizinico) e sapogenine (glicirretina, acido glicirretinico), insieme a flavoni, isoflavoni, calconi e composti correlati, sotto forma anche di glucosidi, sono stati isolati dalle radici di G. glabra e di specie congeneri. Questi composti sono considerati i principi attivi a cui si deve il largo numero di attività biologiche di questa pianta, i cui estratti sono utilizzati come tonici, antiflogistici, espettoranti ed
analgesici.
0
18
36
54
72
90
10 20 30 40giorni
PV
(m
eq
/kg
)
Variazione del valore dei perossidi (PV) di olio di semi di girasole con BHT (▲), estratto lipidico di foglie di liquirizia (■), bianco (♦).
Studi molecolari e valorizzazione di risorse per il settore biomedico Individuazione e caratterizzazione di nuove molecole da specie vegetali
per applicazioni in campo fitoterapico
OH
OH
OHOH
OHOH
OMeOH
GlcOOH
OMe
GA-23
PA-82
DO-07
Percentuale di inibizione della COX-2 indotta dal lipopolisaccaride (LPS) da parte di alcuni stilbeni su sangue intero umano.
Percentuale di inibizione della COX-1 da parte di alcuni stilbeni su sangue intero umano.
Sulla base degli incoraggianti risultati sull’attività antiossidante, i diidrostilbeni più abbondanti (GA-23, PA-82, DO-07) sono stati sottoposti ad una serie di saggii per verificarne l’attività inibente sulle cicloossigenasi, COX-1 e COX-2, che come è ben noto sono coinvolte nei processi infiammatori. I composti finora analizzati hanno mostrato un’attività inibente, più o meno marcata, sulle COX-2 ma non sulla COX-1. Ulteriori studi sono in corso per confermare questa selettività, e stabilire delle correlazioni fra struttura ed attività.
Inibizione della COX-1
0
20
40
60
80
100
120
Inib
izio
ne (
%)
Inibizione della COX-2
0
20
40
60
80
100
120
Inib
izio
ne
(%)
2006-2007
Mappatura per specie e per aree geografiche di provenienza dei campioni spontanei di piante
officinali
Finocchio
Rosmarino
Origano
Salvia
Timo
1051 campioni sono finora pervenuti a questa U.O. • 941 (ca. 90%) sono stati gli essenziali ottenuti ed analizzati:
origano, timo, rosmarino, finocchio, salvia, coriandolo;• 386 gli estratti ottenuti ed in parte analizzati:
salvia, timo, origano, rosmarino, zafferano.
Emerge un quadro fitochimico abbastanza ampio, anche se ancora con alcune lacune, della flora aromatica aromatica siciliana
sia allo stato spontaneo che coltivato.
La tipicità e ricchezza fitochimica delle specie spontanee, evidenziate in questo studio, costituiscono un patrimonio da salvaguardare ed, allo stesso tempo, sfruttare. Per quel che concerne i campioni coltivati, studiati in misura minore, emerge un quadro non del tutto omogeneo, essendo il settore ancora caratterizzato da ampi livelli di improvvisazione, ed incertezze e di una ancora non adeguata conoscenza di quelli che possono essere gli sviluppi potenziali di questo settore.
Alcune considerazioni
Dott. Edoardo NapoliDott.ssa Laura SiracusaDott.ssa Giusy Curcuruto Dott. Andrea PasqualeSig.ra Tonia StranoSig.ra Concetta RoccoSig. Agatino RendaSig. Antonio Giuffrida
Assessorato Agricoltura e Foreste - Regione SicilianaRao Erbe – San Gregorio CT